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问大家一个问题：关于野生型P53表达的

问大家一个问题：关于野生型P53表达的# Biology - 生物学

d*a2011-12-21 08:12

1 楼

我现在学校给我一半钱，一年有半年的TA. 另外半年给其他学校的导师做课题。
CPT 只能用一年，而我需要大约一年半给这个老师工作。如果这个老师把钱打到我所
在的学校，需要较55% 的overhead fee，这样的话道我手里就没有多少钱了. 这种情
况怎么处理呢？

G*Y2011-12-21 08:12

2 楼

6～7分吧
十面理伏画面不错(但是还不彻底
电脑做出来的感觉，
黎明演的不错
刘妹妹依然漂亮，演技在稳步提高
缺点
太拖沓
人物，除了冯绍峰，都太瘦，肩膀连衣服都挣不起来，打个P的仗
韩信被演成一个傻B

w*o2011-12-21 08:12

3 楼

想请教一个问题
wild type P53一般不稳定，用WB很难检测。我现在在一种病毒永生化的细胞（normal
cell）中用WB测到了P53，也就是说这是突变体的P53了？那么这个P53有意义吗或者说
这是P53吗？因为我用的抗体是普通P53 Ab，而突变体P53也就很难和他特异性的结合了
。此外，在这种我不知道他是怎么样突变的情况下，我怎么来设计引物做RT-PCR？
多谢各位了

s*h2011-12-21 08:12

4 楼

CPT如果不是full time的就可以超过一年，你不是给这个其它老师一星期干40小时吧？

【在 d********a 的大作中提到】

: 我现在学校给我一半钱，一年有半年的TA. 另外半年给其他学校的导师做课题。
: CPT 只能用一年，而我需要大约一年半给这个老师工作。如果这个老师把钱打到我所
: 在的学校，需要较55% 的overhead fee，这样的话道我手里就没有多少钱了. 这种情
: 况怎么处理呢？

r*e2011-12-21 08:12

5 楼

western应该没大问题，你用哪个抗体？只是某个特定的突变不能识别吧。而且你的情况
也不一定突变了，可能被stabilized。

normal

【在 w**********o 的大作中提到】

: 想请教一个问题
: wild type P53一般不稳定，用WB很难检测。我现在在一种病毒永生化的细胞（normal
: cell）中用WB测到了P53，也就是说这是突变体的P53了？那么这个P53有意义吗或者说
: 这是P53吗？因为我用的抗体是普通P53 Ab，而突变体P53也就很难和他特异性的结合了
: 。此外，在这种我不知道他是怎么样突变的情况下，我怎么来设计引物做RT-PCR？
: 多谢各位了

d*a2011-12-21 08:12

6 楼

那不是full time的话，我需要注册全部的学分吗？就是说需要给学校交多少费用呢？

w*o2011-12-21 08:12

7 楼

谢谢你的回复，你的意思是说我用regular p53 antibody检测出来的就是这个细胞系中
的本身的野生型的p53，而那些突变的在WB中没有体现出来了？（或者是说这种rugular
antibody,特异性没有那么强，所有的P53都反映出来了呢）

情况

【在 r***e 的大作中提到】

: western应该没大问题，你用哪个抗体？只是某个特定的突变不能识别吧。而且你的情况
: 也不一定突变了，可能被stabilized。
:
: normal

m*z2011-12-21 08:12

8 楼

你用的什么抗体？

normal

【在 w**********o 的大作中提到】

t*y2011-12-21 08:12

9 楼

楼主的生物学基础知识有待提高。p53被检测到很正常。抗体能够识别的目标序列长度
也就10个氨基酸左右，即使有突变，大部分情况也能被普通抗体识别。这种实验没有必
要做p53的RT-PCR。

o*i2011-12-21 08:12

10 楼

I am not an expert of cancer biology.
To my knowledge, wt p53 could exist in immortal cell lines, such as large T
transformed cells.
And I was taught, n years ago, that p53 could be induced by several factors,
such as DNA damage, viral infection and stress blablabla.
Your antibody probably cannot discriminate mutate from wt.
What assure you that p53 got mutated anyway? Am I missing something here.
说英文真XX累啊老夫有待提高啊

normal

【在 w**********o 的大作中提到】

w*o2011-12-21 08:12

11 楼

多谢指点。不是生物出身，还在学习阶段，见笑了。

【在 t******y 的大作中提到】

: 楼主的生物学基础知识有待提高。p53被检测到很正常。抗体能够识别的目标序列长度
: 也就10个氨基酸左右，即使有突变，大部分情况也能被普通抗体识别。这种实验没有必
: 要做p53的RT-PCR。

w*o2011-12-21 08:12

12 楼

学习了，多谢。我没有证据来说他突变了，只是野生型的很难测的到，怀疑他是否突
变。不过您已经告诉我了immortalization could induce its expression. 多谢。

T
factors,

【在 o**i 的大作中提到】

: I am not an expert of cancer biology.
: To my knowledge, wt p53 could exist in immortal cell lines, such as large T
: transformed cells.
: And I was taught, n years ago, that p53 could be induced by several factors,
: such as DNA damage, viral infection and stress blablabla.
: Your antibody probably cannot discriminate mutate from wt.
: What assure you that p53 got mutated anyway? Am I missing something here.
: 说英文真XX累啊老夫有待提高啊
:
: normal

w*o2011-12-21 08:12

13 楼

多谢回复，问题解决了，我用的是CST的。normal

【在 m*****z 的大作中提到】

: 你用的什么抗体？
:
: normal