D*a
2 楼
跑太散了吧，梯度胶，小孔膜试试
w*y
3 楼
没其他描述--胶，转膜的电压，时间等等，怎么帮你找原因？
G*d
4 楼
0.2 pvdf
semi-dry. 90mA 1h
semi-dry. 90mA 1h
s*y
5 楼
我还以为闹鬼了把旧帖子都翻上来了呢。
前一阵子有另外一个同学也上来问过几乎一模一样的问题，大家七嘴八舌给了
很多不同的建议，不知道他最后是怎么解决的？
【在 G*******d 的大作中提到】
: Why?
前一阵子有另外一个同学也上来问过几乎一模一样的问题，大家七嘴八舌给了
很多不同的建议，不知道他最后是怎么解决的？
【在 G*******d 的大作中提到】
: Why?
s*u
6 楼
Use Cellsignal protocol, do not use semi-dry.
【在 G*******d 的大作中提到】
: 0.2 pvdf
: semi-dry. 90mA 1h
【在 G*******d 的大作中提到】
: 0.2 pvdf
: semi-dry. 90mA 1h
G*d
7 楼
They did not say exact the detailed information
Just say that
"Volumes are for 10 cm x 10 cm (100 cm2) of membrane; for different sized
membranes, adjust volumes accordingly."
【在 s**u 的大作中提到】
: Use Cellsignal protocol, do not use semi-dry.
Just say that
"Volumes are for 10 cm x 10 cm (100 cm2) of membrane; for different sized
membranes, adjust volumes accordingly."
【在 s**u 的大作中提到】
: Use Cellsignal protocol, do not use semi-dry.
D*a
8 楼
我们用biorad 4-20梯度，0.2 pvdf，和 biorad那套转膜的叫transblot，跑10kDa以下
的看得挺清楚的。
的看得挺清楚的。
l*1
9 楼
sure
LZ 考古下
Re: 有人做过10kDa蛋白的western嘛？
[版面:生物学][首篇作者：cheesecake] , 2006年09月21日12:39:58
[分页:1 ]
[ 1 ]
发信人: cheesecake (cake), 信区: Biology
标 题: Re: 有人做过10kDa蛋白的western嘛？
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Sep 21 12:39:58 2006)
I agree with that.
I used 4-15% geadient and 0.45um membrane (.2 is better) and tested 7KD
protein without any problem.
http://www.mitbbs.com/article_t/Biology/11565847.html
LZ 考古下
Re: 有人做过10kDa蛋白的western嘛？
[版面:生物学][首篇作者：cheesecake] , 2006年09月21日12:39:58
[分页:1 ]
[ 1 ]
发信人: cheesecake (cake), 信区: Biology
标 题: Re: 有人做过10kDa蛋白的western嘛？
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Sep 21 12:39:58 2006)
I agree with that.
I used 4-15% geadient and 0.45um membrane (.2 is better) and tested 7KD
protein without any problem.
http://www.mitbbs.com/article_t/Biology/11565847.html
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