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Bacterial killing by macrophage/splenocytes

Bacterial killing by macrophage/splenocytes# Biology - 生物学

y*u2012-08-15 07:08

1 楼

在外过年，一切从简了。
希望新的一年儿女们健康快乐成长，
祝老公快乐工作。
也祝大家一家人和和美美、平平安安、健健康康！
四菜一汤。
肉末雪里蕻，麻辣味；
油闷大虾；
洋葱青椒炒肉片；
微薄三文鱼。

b*e2012-08-15 07:08

2 楼

配偶稍微晚一些申请。
多谢。

b*n2012-08-15 07:08

3 楼

看了一下HP充电器的输出是5.3=2.0A
Nook STR用USB充电的时候屏幕就锁住了“USB Mode”不能用，即使已经从Win里面退出
设备也不行，很是烦人。

d*i2012-08-15 07:08

4 楼

有同学做过这个类似的实验没有？最近做这个老不成功，想请教一些细节问题。
谢谢！

i*e2012-08-15 07:08

5 楼

good

b*e2012-08-15 07:08

6 楼

It seems No.
Anyone who has this experiences please confirm.
Thanks.

d*m2012-08-15 07:08

7 楼

最近在做，有啥问题就说出来一起讨论呗

y*u2012-08-15 07:08

8 楼

首次在本版贴图就受到了鼓励。谢谢！

【在 i*****e 的大作中提到】

: good

Z*e2012-08-15 07:08

9 楼

我们填的是no，不过还没有批

【在 b*********e 的大作中提到】

: It seems No.
: Anyone who has this experiences please confirm.
: Thanks.

n*r2012-08-15 07:08

10 楼

Which bacteria and what kind of macrophages? Human or mouse?

s*y2012-08-15 07:08

11 楼

盘子看上去象纸盘.

【在 y********u 的大作中提到】

: 在外过年，一切从简了。
: 希望新的一年儿女们健康快乐成长，
: 祝老公快乐工作。
: 也祝大家一家人和和美美、平平安安、健健康康！
: 四菜一汤。
: 肉末雪里蕻，麻辣味；
: 油闷大虾；
: 洋葱青椒炒肉片；
: 微薄三文鱼。

W*C2012-08-15 07:08

12 楼

以前实验室有人做过，把细菌培养物扔给培养的巨噬细胞然后收集划板数克隆。还可
以用beads模拟，用流式测吞噬的beads。

d*i2012-08-15 07:08

13 楼

谢谢楼上几位！
1. 我要做peritoneal macrophage和splenocytes的bancteria killing。
2. 我是从mouse分离细胞后，把splenocyte (2x10^6)和bacteria混合在1.5mL的tube里
面，然后
放在37C培养箱30min。然后1500rpm离心，结果发现要么没有沉淀，要么在下一步洗去
bacteria的时候细胞沉淀就没有了。很郁闷！本来应该是这一步离心之后细胞形成
pellet，细菌在上清，去除上清就可以去除细菌了。
3. 做过的同学你们是怎么做的？
4. 后面还要用macrophage做同样的实验，这一步不能继续了，不知道怎么改进。
非常感谢！如果哪位手里有详细的protocol恳请能分享一下。

d*i2012-08-15 07:08

14 楼

细菌用的是HB101,细胞是mouse的。

【在 n******r 的大作中提到】

: Which bacteria and what kind of macrophages? Human or mouse?

c*i2012-08-15 07:08

15 楼

不应该啊，无论是否有phagocytosis,至少细胞应该在。37C后，是否在显微镜下观察细
胞形态完好？考虑换buffer看看

【在 d****i 的大作中提到】

: 谢谢楼上几位！
: 1. 我要做peritoneal macrophage和splenocytes的bancteria killing。
: 2. 我是从mouse分离细胞后，把splenocyte (2x10^6)和bacteria混合在1.5mL的tube里
: 面，然后
: 放在37C培养箱30min。然后1500rpm离心，结果发现要么没有沉淀，要么在下一步洗去
: bacteria的时候细胞沉淀就没有了。很郁闷！本来应该是这一步离心之后细胞形成
: pellet，细菌在上清，去除上清就可以去除细菌了。
: 3. 做过的同学你们是怎么做的？
: 4. 后面还要用macrophage做同样的实验，这一步不能继续了，不知道怎么改进。
: 非常感谢！如果哪位手里有详细的protocol恳请能分享一下。

d*i2012-08-15 07:08

16 楼

buffer用的是RPMI+10%FBS。确实不应该，但是好几次都这样，实在不知道哪里错了。

【在 c*****i 的大作中提到】

: 不应该啊，无论是否有phagocytosis,至少细胞应该在。37C后，是否在显微镜下观察细
: 胞形态完好？考虑换buffer看看