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siRNA and DNA cotransfection

siRNA and DNA cotransfection# Biology - 生物学

f*l2012-10-21 07:10

1 楼

总算放下了点心.
central MA, base 115k + bonus 10k
五年美国经验,国内两年经验

s*g2012-10-21 07:10

2 楼

☆─────────────────────────────────────☆
Forp (mushrooms^turtle shells) 于 (Tue Jun 8 10:54:09 2010, 美东) 提到:
http://www.mitbbs.com/ym_article/LiuLaw/31076327.html
从上面的文章看来的：
1）材料太多，会导致delay，或者RFE；
2）最近Eb1的case，趋向于NOID或者Denial的，都暂时hold，在等一个案子的结论。“Of particular note, the TSC supervisor announced that adjudicators are awaiting guidance from USCIS Headquarters on the 9th Circuit's ruling in Kazarian v. Holder. As of this
, the TSC will hold all EB-1A Notice of Intent to Deny (NOID) and denials u

v*e2012-10-21 07:10

3 楼

有人做过siRNA和plasmid cotransfection吗？我用2000转的不好。可是分别单转都还
好。有什么经验可以分享的吗？thanks!

l*82012-10-21 07:10

4 楼

GXGX!!

h*y2012-10-21 07:10

5 楼

a couple of suggestions.
1. optimize the ratio of your siRNA and plasmid DNA, as they will compete fo
r lipo-2000
2. try other non-liposome based reagents, such as FuGene 6 or PEI.

【在 v****e 的大作中提到】

: 有人做过siRNA和plasmid cotransfection吗？我用2000转的不好。可是分别单转都还
: 好。有什么经验可以分享的吗？thanks!

k*p2012-10-21 07:10

6 楼

admire

【在 f*****l 的大作中提到】

: 总算放下了点心.
: central MA, base 115k + bonus 10k
: 五年美国经验,国内两年经验

p*e2012-10-21 07:10

7 楼

Thanks for your suggestions, LZ's trouble is also mine.
BTW, what's the ideal ratio for siRNA/plasmid?

fo

【在 h******y 的大作中提到】

: a couple of suggestions.
: 1. optimize the ratio of your siRNA and plasmid DNA, as they will compete fo
: r lipo-2000
: 2. try other non-liposome based reagents, such as FuGene 6 or PEI.

p*n2012-10-21 07:10

8 楼

cong~沾沾喜气，希望我也能早点拿到offer

【在 f*****l 的大作中提到】

: 总算放下了点心.
: central MA, base 115k + bonus 10k
: 五年美国经验,国内两年经验

b*s2012-10-21 07:10

9 楼

40pmol RNAi vs. 1ug dsDNA worked fine for me.
i used lipo2000

【在 p*****e 的大作中提到】

: Thanks for your suggestions, LZ's trouble is also mine.
: BTW, what's the ideal ratio for siRNA/plasmid?
:
: fo

f*u2012-10-21 07:10

10 楼

什么degree阿，美国的还是中国的阿

w*r2012-10-21 07:10

11 楼

分别转，lipo2000转质粒的效率在我的手里效率比较差（也可能我们的细胞比较不容转
染）。
siRNA和lipoRNAiMax在一个管子里混好，
DNA和lipofectimine或者lipoLTX在另一个管子里混好，
然后一起加进去。
因为两种东西一起加毒性会大一点，细胞会死一些，
所以转染的时候，细胞的起始密度可以比单独转染siRNA或者质粒的密度要高一点

a*n2012-10-21 07:10

12 楼

Cong~好多钱~

h*y2012-10-21 07:10

13 楼

calculate the moles of your plasmid DNA based on its size. Then try several
different ratios of your siRNA and DNA, for example, 1:1, 1:2, 2:1, etc.

【在 p*****e 的大作中提到】

: Thanks for your suggestions, LZ's trouble is also mine.
: BTW, what's the ideal ratio for siRNA/plasmid?
:
: fo

s*g2012-10-21 07:10

14 楼

恭喜恭喜，沾点喜气。