s*a
2 楼
大家提取细胞蛋白的常用方法是哪个：
1，消化，离心，去上清，加 lysis buffer。
2，往皿中加 PBS，刮下来，离心，去上清，加 lysis buffer。
3，直接往皿中加 lysis buffer，刮下来，离心，取上清。
这 3 种方法对于最终的蛋白的质或量上有比较大的影响么？
我经常用 1 和 3，但好像我见过的说明书中，凡是涉及到收集细胞这块，一般都是用
的方法 2 。
谢谢！
1，消化，离心，去上清，加 lysis buffer。
2，往皿中加 PBS，刮下来，离心，去上清，加 lysis buffer。
3，直接往皿中加 lysis buffer，刮下来，离心，取上清。
这 3 种方法对于最终的蛋白的质或量上有比较大的影响么？
我经常用 1 和 3，但好像我见过的说明书中，凡是涉及到收集细胞这块，一般都是用
的方法 2 。
谢谢！
j*o
3 楼
上网查余额,看看卡里的钱是哪天充进去的.
s*y
4 楼
一直都是PBS洗完之后直接加loading buffer，我是不是太豪放了……
【在 s**********a 的大作中提到】
: 大家提取细胞蛋白的常用方法是哪个：
: 1，消化，离心，去上清，加 lysis buffer。
: 2，往皿中加 PBS，刮下来，离心，去上清，加 lysis buffer。
: 3，直接往皿中加 lysis buffer，刮下来，离心，取上清。
: 这 3 种方法对于最终的蛋白的质或量上有比较大的影响么？
: 我经常用 1 和 3，但好像我见过的说明书中，凡是涉及到收集细胞这块，一般都是用
: 的方法 2 。
: 谢谢！
【在 s**********a 的大作中提到】
: 大家提取细胞蛋白的常用方法是哪个：
: 1，消化，离心，去上清，加 lysis buffer。
: 2，往皿中加 PBS，刮下来，离心，去上清，加 lysis buffer。
: 3，直接往皿中加 lysis buffer，刮下来，离心，取上清。
: 这 3 种方法对于最终的蛋白的质或量上有比较大的影响么？
: 我经常用 1 和 3，但好像我见过的说明书中，凡是涉及到收集细胞这块，一般都是用
: 的方法 2 。
: 谢谢！
p*y
5 楼
所以是从充钱的那天算起的啊. 亏了
多谢!
【在 j********o 的大作中提到】
: 上网查余额,看看卡里的钱是哪天充进去的.
多谢!
【在 j********o 的大作中提到】
: 上网查余额,看看卡里的钱是哪天充进去的.
j*n
6 楼
虽说1-3我都做过 但我个人不喜欢1 是因为总觉得胰酶消化本身就是一种刺激 尤其对
做信号转导的 谁能说清有没有影响？
2我也不常用，倒不是这个方法理论上有啥缺陷，只是我经常遇到细胞在PBS里面离心不
易，经常细胞不能完全形成pellet EP管里面还好点 15ml离心管尤其严重
3我比较常用 其实是省事 缺点是总会一定程度掺入PBS而稀释裂解液 可能会导致最后
蛋白浓度不够而影响实验 不过一般来说吸干净了影响不大
看你个人爱好了
【在 s**********a 的大作中提到】
: 大家提取细胞蛋白的常用方法是哪个：
: 1，消化，离心，去上清，加 lysis buffer。
: 2，往皿中加 PBS，刮下来，离心，去上清，加 lysis buffer。
: 3，直接往皿中加 lysis buffer，刮下来，离心，取上清。
: 这 3 种方法对于最终的蛋白的质或量上有比较大的影响么？
: 我经常用 1 和 3，但好像我见过的说明书中，凡是涉及到收集细胞这块，一般都是用
: 的方法 2 。
: 谢谢！
z*8
7 楼
是那个prepaid card吗？
a*n
8 楼
做蛋白质三样都可以，消化离心提出来的蛋白多一些
z*a
9 楼
coask
【在 z*****8 的大作中提到】
: 是那个prepaid card吗？
【在 z*****8 的大作中提到】
: 是那个prepaid card吗？
z*a
10 楼
coask
【在 z*****8 的大作中提到】
: 是那个prepaid card吗？
【在 z*****8 的大作中提到】
: 是那个prepaid card吗？
b*f
11 楼
co ask
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