蛋白纯化杂斑怎么去？# Biology - 生物学
b*y
1 楼
今天要回国，准备用AP回来。主申请人持AP入关，听说有人进小屋子几个小时，也有的
人快一些。过来人能不能分享一下海关的问题？
还有入关的时候还是走与原来H1-B一样的通道吗？
包子答谢。如果我今天来不及转账，回来后会转。
人快一些。过来人能不能分享一下海关的问题？
还有入关的时候还是走与原来H1-B一样的通道吗？
包子答谢。如果我今天来不及转账，回来后会转。
F*D
2 楼
【 以下文字转载自 Sex 讨论区 】
发信人: baty (甜意), 信区: Sex
标 题: Re: 好友想做援交，该怎么阻止她？
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Oct 14 20:50:26 2010, 美东)
你帮她去见好了。
发信人: baty (甜意), 信区: Sex
标 题: Re: 好友想做援交，该怎么阻止她？
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Oct 14 20:50:26 2010, 美东)
你帮她去见好了。
a*g
3 楼
最近做GST-tag的蛋白纯化，蛋白纯化出来后，在sepharose-４bbeads上切，elusion下
来蛋白总有杂带，一条大概７０kd，一条２７kd后者经检验发现是GST。前者未知，请
大牛们帮忙判断下是什么原因？
来蛋白总有杂带，一条大概７０kd，一条２７kd后者经检验发现是GST。前者未知，请
大牛们帮忙判断下是什么原因？
t*4
4 楼
入关的时候还是走vistor通道.
进小屋子是历史了，现在99%不会。
可能问的：回去干什么？呆了多久？在美作甚么工作？也可能p都不问，盖章签写AOS,
一挥手，走人。
进小屋子是历史了，现在99%不会。
可能问的：回去干什么？呆了多久？在美作甚么工作？也可能p都不问，盖章签写AOS,
一挥手，走人。
b*n
5 楼
70kD band might be DnaK
it's very normal to copurify the molecular chaperone when you try to purify
those overexpressed fusion proteins
to remove DnaK, you can add 5 mM ATP and 5 mM Mg2+ into lysate and incubate
for 20 min at room temperature prior to purification (i.e., before loading
onto the affinity column)
【在 a********g 的大作中提到】
: 最近做GST-tag的蛋白纯化，蛋白纯化出来后，在sepharose-４bbeads上切，elusion下
: 来蛋白总有杂带，一条大概７０kd，一条２７kd后者经检验发现是GST。前者未知，请
: 大牛们帮忙判断下是什么原因？
it's very normal to copurify the molecular chaperone when you try to purify
those overexpressed fusion proteins
to remove DnaK, you can add 5 mM ATP and 5 mM Mg2+ into lysate and incubate
for 20 min at room temperature prior to purification (i.e., before loading
onto the affinity column)
【在 a********g 的大作中提到】
: 最近做GST-tag的蛋白纯化，蛋白纯化出来后，在sepharose-４bbeads上切，elusion下
: 来蛋白总有杂带，一条大概７０kd，一条２７kd后者经检验发现是GST。前者未知，请
: 大牛们帮忙判断下是什么原因？
b*y
6 楼
多谢了
【在 t****4 的大作中提到】
: 入关的时候还是走vistor通道.
: 进小屋子是历史了，现在99%不会。
: 可能问的：回去干什么？呆了多久？在美作甚么工作？也可能p都不问，盖章签写AOS,
: 一挥手，走人。
【在 t****4 的大作中提到】
: 入关的时候还是走vistor通道.
: 进小屋子是历史了，现在99%不会。
: 可能问的：回去干什么？呆了多久？在美作甚么工作？也可能p都不问，盖章签写AOS,
: 一挥手，走人。
a*g
7 楼
Thank you so much.
purify
incubate
【在 b******n 的大作中提到】
: 70kD band might be DnaK
: it's very normal to copurify the molecular chaperone when you try to purify
: those overexpressed fusion proteins
: to remove DnaK, you can add 5 mM ATP and 5 mM Mg2+ into lysate and incubate
: for 20 min at room temperature prior to purification (i.e., before loading
: onto the affinity column)
purify
incubate
【在 b******n 的大作中提到】
: 70kD band might be DnaK
: it's very normal to copurify the molecular chaperone when you try to purify
: those overexpressed fusion proteins
: to remove DnaK, you can add 5 mM ATP and 5 mM Mg2+ into lysate and incubate
: for 20 min at room temperature prior to purification (i.e., before loading
: onto the affinity column)
b*u
8 楼
一句都没问，偶的CASe
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p*u
9 楼
请问你用的是combo card吗？是不用进＂小黑屋＂了吗？谢谢
一句都没问，偶的CASe[发表自未名空间手机版 - m.mitbbs.com]
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【在 b*****u 的大作中提到】
: 一句都没问，偶的CASe
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一句都没问，偶的CASe[发表自未名空间手机版 - m.mitbbs.com]
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【在 b*****u 的大作中提到】
: 一句都没问，偶的CASe
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b*u
10 楼
这喔个combo卡好像挺新的，跟以前ap纸不同，所以进小黑屋了，不过他们没理我，就
是查了查电脑，stamp了下，什么问题都没问。
我看他们爱不释手的看我的卡，就随口问了下是不是没见过，他们说是的以前是paper.
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【在 p*******u 的大作中提到】
: 请问你用的是combo card吗？是不用进＂小黑屋＂了吗？谢谢
:
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是查了查电脑，stamp了下，什么问题都没问。
我看他们爱不释手的看我的卡，就随口问了下是不是没见过，他们说是的以前是paper.
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【在 p*******u 的大作中提到】
: 请问你用的是combo card吗？是不用进＂小黑屋＂了吗？谢谢
:
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p*u
11 楼
May I ask at which airport you came into US, if you don't mind? thanks again.
paper.
【在 b*****u 的大作中提到】
: 这喔个combo卡好像挺新的，跟以前ap纸不同，所以进小黑屋了，不过他们没理我，就
: 是查了查电脑，stamp了下，什么问题都没问。
: 我看他们爱不释手的看我的卡，就随口问了下是不是没见过，他们说是的以前是paper.
:
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paper.
【在 b*****u 的大作中提到】
: 这喔个combo卡好像挺新的，跟以前ap纸不同，所以进小黑屋了，不过他们没理我，就
: 是查了查电脑，stamp了下，什么问题都没问。
: 我看他们爱不释手的看我的卡，就随口问了下是不是没见过，他们说是的以前是paper.
:
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a*n
12 楼
据说会问你妈贵姓
【在 b******y 的大作中提到】
: 今天要回国，准备用AP回来。主申请人持AP入关，听说有人进小屋子几个小时，也有的
: 人快一些。过来人能不能分享一下海关的问题？
: 还有入关的时候还是走与原来H1-B一样的通道吗？
: 包子答谢。如果我今天来不及转账，回来后会转。
【在 b******y 的大作中提到】
: 今天要回国，准备用AP回来。主申请人持AP入关，听说有人进小屋子几个小时，也有的
: 人快一些。过来人能不能分享一下海关的问题？
: 还有入关的时候还是走与原来H1-B一样的通道吗？
: 包子答谢。如果我今天来不及转账，回来后会转。
a*v
13 楼
No question asked, and took less than 2 mins since the officer need to write
down the LIN* number on the passport. Chicago.
down the LIN* number on the passport. Chicago.
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