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promoter region mutation求助！谢谢

promoter region mutation求助！谢谢# Biology - 生物学

l*a2013-01-28 08:01

1 楼

profit market share

z*92013-01-28 08:01

2 楼

我以前做基因的突变总是用overlapping PCR，这次我需要在Promoter region做修饰，
例如再加一个promoter的repeat，我还是如法炮制，总是不灵，PCR终产物始终没有我
的insert，估计是由于promoter的repeat sequence导致的pcr失败。
请问各位对于promoter region的manipulation还有没有其他的trick，谢谢，

D*n2013-01-28 08:01

3 楼

HTC真不给力

【在 l******a 的大作中提到】

: profit market share

z*92013-01-28 08:01

4 楼

自己顶，谢谢，

r*r2013-01-28 08:01

5 楼

where is moto?

【在 l******a 的大作中提到】

: profit market share

b*n2013-01-28 08:01

6 楼

老方法，promoter引入酶切位点，然后把要重复的片段插进去
很早还有用同切酶的，保证可以插入multiple repeat

【在 z*******9 的大作中提到】

: 自己顶，谢谢，

l*a2013-01-28 08:01

7 楼

negative profit?

【在 r*****r 的大作中提到】

: where is moto?

H*i2013-01-28 08:01

8 楼

质粒里面没有BsaI位点得话，可以用末端酶切BsaI构建（当然也可以尝试其他同类型酶
），这样不会引入多余序列。
如果有得话可以用bsaI方法构建包含你promoter的片段，然后用各种方法和其他部分连
起来
另外promoter不长得话也可以直接合出来然后用PCR和原来部分连起来（有些时候不太
容易，promoter 或者重复序列repeat次数超过需要，不过一般换换条件啥的总能挑到
对的）

F*y2013-01-28 08:01

9 楼

看起来三星转型得快，基本没有受排挤

z*92013-01-28 08:01

10 楼

谢谢，

y*j2013-01-28 08:01

11 楼

标题叫8家，但是标出来只有七家，注意中间有一个很小很小的浅绿。诺基亚和三星之间。
可能是moto

【在 r*****r 的大作中提到】

: where is moto?

G*g2013-01-28 08:01

12 楼

HTC比起其他两个公司只是个小虾米，能活到现在不错了。

【在 D******n 的大作中提到】

: HTC真不给力

M*n2013-01-28 08:01

13 楼

apple vs. nokia,
others are nothing.

l*a2013-01-28 08:01

14 楼

看圖能力
馬田，這個圖不是算積分啊！

【在 M*****n 的大作中提到】

: apple vs. nokia,
: others are nothing.

M*n2013-01-28 08:01

15 楼

apple takes what nokia has.
others just sit there and watching.

【在 l******a 的大作中提到】

:
: 看圖能力
: 馬田，這個圖不是算積分啊！

p*w2013-01-28 08:01

16 楼

可怜的 nokia

【在 l******a 的大作中提到】

: profit market share

l*a2013-01-28 08:01

17 楼

your original post got too "abstract".
that makes sense.
蘋果，諾基亞整個一個互補啊。
more poetically put:
if you play song "Nokia" backward, you will end up with an Apple!
haha

【在 M*****n 的大作中提到】

: apple takes what nokia has.
: others just sit there and watching.