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问大家一个100bp左右长引物的合成问题

问大家一个100bp左右长引物的合成问题# Biology - 生物学

h*r2013-09-13 07:09

1 楼

需要合成一段长约100bp的引物，做表达用，所以不希望有突变。请问这种情况下可以
直接合成吗？例如普通的脱盐级别能保证质量不？或者去做个基因片段的合成？
有经验的给点建议把。另外，我没做过从page胶纯化primer,所以这个也不考虑。
多谢！问题解决了，一定发包子。

h*e2013-09-13 07:09

2 楼

我最长用到120bp，在sigma合成的，hplc纯化的就行
突变基本没有吧

A*u2013-09-13 07:09

3 楼

hplc纯化比脱盐高级么？

【在 h***e 的大作中提到】

: 我最长用到120bp，在sigma合成的，hplc纯化的就行
: 突变基本没有吧

n*32013-09-13 07:09

4 楼

用常规40－50bp左右的引物彼此重叠20bp去pcr,很容易得到你的产物，很少有突变的，
挑2－3个送去测序，一定有你要的正确克隆。hplc纯化的引物也不是100%没有突变的，
而且超贵

h*r2013-09-13 07:09

5 楼

这个想法好。不行我就把这个片段合成了，反正合成的能保证序列争取。再去和别的装
配。

g*52013-09-13 07:09

6 楼

IDT, <500BP, $99?

z*32013-09-13 07:09

7 楼

I used to order from Sigma (100 to 150 bp), PAGE purified grade, and ask
Sigma to provide the PAGE gel picture for show the quality of the oligo.
Normally, <60 bp is purified by desalt column. HPLC comes between 60 to 100.
PAGE is the best for >100 bp. IMO.

h*r2013-09-13 07:09

8 楼

唉，看到这个我很犹豫要不要做cDNA克隆？
苦哈哈的，还不如花点儿钱。

【在 g*********5 的大作中提到】

: IDT, <500BP, $99?