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请教一个同时收集蛋白和RNA的问题

请教一个同时收集蛋白和RNA的问题# Biology - 生物学

c*u2013-12-19 08:12

1 楼

【以下文字转载自 SanDiego 讨论区】
发信人: illusion06 (濯缨半糖主义), 信区: SanDiego
标题: 美瞳有多重要？……多张大图为证
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Feb 17 01:11:39 2010, 美东)
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佩戴前http://www.mitbbs.com/mitbbs_postdoc.php?board=SanDiego&ftype=0
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l*u2013-12-19 08:12

2 楼

☆─────────────────────────────────────☆
churchance (小二橙管) 于 (Tue Jan 11 12:48:48 2011, 美东) 提到:
还有投票的，欢迎继续给xtxtxtchris, and csboy2007投票。
版主评选里，staionCC，和skyblue0 也需要选票。谢谢大家
请在如下链接投票，回来可以吃包子。
请务必投票后在投票界面留言，避免骗包子的。
http://mitbbs.com/mitbbs_bbsshowvote.php?board=MyActivity
☆─────────────────────────────────────☆
kettle (曼玉喂猪) 于 (Tue Jan 11 12:50:55 2011, 美东) 提到:
目前的第一名好厉害，是谁啊

☆─────────────────────────────────────☆
churchance (小二橙管) 于 (Tue Jan 11 12:52:41 2011, 美东) 提到:
好像ps版的吧？
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athome (athome) 于 (Tue Jan 11 12:58:43 2011, 美东) 提到:
说实话，尽管xtxtxttchris 和csboy2007 在2010最后2个月在娇客版很活跃，但如果评
选2010年度活跃网友——即使是2010年度娇客版活跃网友——我还是认为有一点点差距滴
☆─────────────────────────────────────☆
churchance (小二橙管) 于 (Tue Jan 11 13:00:39 2011, 美东) 提到:
就是玩吗，不能认真的。。我这么活跃，我都没说话。哈哈
距滴
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xtxtxttchris (chris) 于 (Tue Jan 11 13:01:13 2011, 美东) 提到:
恩。我觉得也是。我11月后半部才刚到买买提滴。我是非常非常的新人
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athome (athome) 于 (Tue Jan 11 13:02:31 2011, 美东) 提到:
好吧，为了包子，神马都是浮云
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churchance (小二橙管) 于 (Tue Jan 11 13:03:26 2011, 美东) 提到:
主要是你和版草发的主题帖，虽然是转的，应该也是全年冠军了吧。
就是游戏，都是玩玩。。
我也没说投你俩才发包子不是，就是让大家积极参与活动。
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xtxtxttchris (chris) 于 (Tue Jan 11 13:05:31 2011, 美东) 提到:
我投橙子了
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sequel (暴力云) 于 (Tue Jan 11 13:10:51 2011, 美东) 提到:
我投了，要包子
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athome (athome) 于 (Tue Jan 11 13:12:46 2011, 美东) 提到:
等猴年吧
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TTU (Call for Drama) 于 (Tue Jan 11 13:17:37 2011, 美东) 提到:
re
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sequel (暴力云) 于 (Tue Jan 11 13:17:42 2011, 美东) 提到:
拿到了，哈哈
☆─────────────────────────────────────☆
athome (athome) 于 (Tue Jan 11 13:18:27 2011, 美东) 提到:
那位神马没有我的包子？？
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skyblue0 (头转星移) 于 (Tue Jan 11 13:18:47 2011, 美东) 提到:
投了留了
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sequel (暴力云) 于 (Tue Jan 11 13:19:15 2011, 美东) 提到:
要不我分你半个？
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athome (athome) 于 (Tue Jan 11 13:20:22 2011, 美东) 提到:
谢谢，我对橙子还是有信心的，尽管她经常说话不算数
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churchance (小二橙管) 于 (Tue Jan 11 13:20:54 2011, 美东) 提到:
你说清楚啊，不然不知你投了。呵呵
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churchance (小二橙管) 于 (Tue Jan 11 13:21:19 2011, 美东) 提到:
靠。。。。
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TTU (Call for Drama) 于 (Tue Jan 11 13:27:22 2011, 美东) 提到:
就像悟空出世
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catchafish (CAF) 于 (Tue Jan 11 14:11:11 2011, 美东) 提到:
还有建议班花先奔一下才名副其实，我再投你。
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xtxtxttchris (chris) 于 (Tue Jan 11 14:16:14 2011, 美东) 提到:
我上下前后左右都奔过了
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babyfox (小狐狸般若) 于 (Tue Jan 11 14:17:44 2011, 美东) 提到:
你咋把裙子脱了呢？这样不好看～
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xtxtxttchris (chris) 于 (Tue Jan 11 14:20:18 2011, 美东) 提到:
我改成头像了
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babyfox (小狐狸般若) 于 (Tue Jan 11 14:24:11 2011, 美东) 提到:
你这个头像，很适合到鸟版去捧个场，到时候crashinfo肯定会“包养”你。
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xtxtxttchris (chris) 于 (Tue Jan 11 14:48:26 2011, 美东) 提到:
他还混那里?!
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athome (athome) 于 (Tue Jan 11 14:51:16 2011, 美东) 提到:
还是我来包养吧，管饭。
☆─────────────────────────────────────☆
babyfox (小狐狸般若) 于 (Tue Jan 11 15:01:24 2011, 美东) 提到:
你去看看，他是那里的老大。他那个鸟版比这里冷清多了，可我就是不明白，他怎么那
么有钱？还成天把包子挂在外面显摆。相比之下，我们橙大可真是穷啊！
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babyfox (小狐狸般若) 于 (Tue Jan 11 15:03:05 2011, 美东) 提到:
光管饭？我们小桃有那么cheap吗？
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xtxtxttchris (chris) 于 (Tue Jan 11 15:03:50 2011, 美东) 提到:
管住吗？
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churchance (小二橙管) 于 (Tue Jan 11 15:09:06 2011, 美东) 提到:
快把版4欢迎包发了，不然额度被我用光了。呵呵
恩，剩下的额度给你过瘾了。
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xtxtxttchris (chris) 于 (Tue Jan 11 15:13:25 2011, 美东) 提到:
我问个很傻的问题吧，我是怎么进十大候选的？橙子推荐的？
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churchance (小二橙管) 于 (Tue Jan 11 15:16:09 2011, 美东) 提到:
小狐狸智弱也推荐你了。
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churchance (小二橙管) 于 (Tue Jan 11 15:17:03 2011, 美东) 提到:
：-） glad to see u here.
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lanzhu (小懒猪) 于 (Tue Jan 11 15:17:58 2011, 美东) 提到:
不敢不敢，怎能和支书争额度
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babyfox (小狐狸般若) 于 (Tue Jan 11 15:18:43 2011, 美东) 提到:
为什么说我“智弱”？我哪里来的资格推荐十大？
昨天傻呼呼的自封“名猿”，还被痛扁一顿呢～55555
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lanzhu (小懒猪) 于 (Tue Jan 11 15:18:47 2011, 美东) 提到:
y应该是系统统计的吧
不是有那个什么水枪的统计
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xtxtxttchris (chris) 于 (Tue Jan 11 15:18:55 2011, 美东) 提到:
我脚着你们2个是不是合计着要卖我啊？
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churchance (小二橙管) 于 (Tue Jan 11 15:19:22 2011, 美东) 提到:
表客气吗。。我的电脑，m键，字都要磨掉了。
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DabaoSODBoy () 于 (Tue Jan 11 15:19:39 2011, 美东) 提到:
re
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churchance (小二橙管) 于 (Tue Jan 11 15:20:56 2011, 美东) 提到:
你也很笨类。。找deal在行，这个外行了。
myact 版。
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lanzhu (小懒猪) 于 (Tue Jan 11 15:22:09 2011, 美东) 提到:
寄支ＳＨＡＲＰＩＥ去描描？
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xtxtxttchris (chris) 于 (Tue Jan 11 15:22:10 2011, 美东) 提到:
那么到底是咋回事呢？
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mayvillage (盛夏的繁花) 于 (Tue Jan 11 15:22:34 2011, 美东) 提到:
是常来，只是没冒头~
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babyfox (小狐狸般若) 于 (Tue Jan 11 15:22:47 2011, 美东) 提到:
神马“水枪”？你们黑帮又在说行话了～
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lanzhu (小懒猪) 于 (Tue Jan 11 15:23:34 2011, 美东) 提到:
唉唉唉，　这答案可是得自你的真传啊
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churchance (小二橙管) 于 (Tue Jan 11 15:24:19 2011, 美东) 提到:
看看无耻的版草！！
发信人: csboy2007 (我叫包守腿。。宇宙无敌包子控), 信区: MyActivity
标题: Re: ★★2010年度评选活动开始了！★★
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Dec 21 11:12:20 2010, 美东)
乘着大家还都在推荐斑竹，我先推荐一个活跃网友。
csboy2007
主要活动版面，joke版。
次要活动版面，joke版。
评语：
这是一场转贴的马拉松，他忍住没有包子的饥饿和疲倦，不肯停驻手指，在键盘上飞舞。
上苍用网速考验人类的幽默，他就舍弃机器人，付出艰辛，守住信心。他是转手，他一
定要赢。他的脚步为人们丈量出一份伟大的肚皮舞。
谢谢：）
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lanzhu (小懒猪) 于 (Tue Jan 11 15:25:33 2011, 美东) 提到:
版草Ｖ５！
舞。
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xtxtxttchris (chris) 于 (Tue Jan 11 15:25:37 2011, 美东) 提到:
啊～～～～～～～～～～
舞。
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xtxtxttchris (chris) 于 (Tue Jan 11 15:27:01 2011, 美东) 提到:
但是我是怎么回事呢？我没有自荐过呀？谁替我写过吗？
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churchance (小二橙管) 于 (Tue Jan 11 15:27:56 2011, 美东) 提到:
给您clue 了啊。。信区: MyActivity
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babyfox (小狐狸般若) 于 (Tue Jan 11 15:28:13 2011, 美东) 提到:
我是想把你卖个好价钱来着，可是总被人说弱智，怕最后自己吃亏、还要连累你啊！
而且，我被人拎着尾巴抡了好几圈，终于想明白了，小笨狐狸对你木有所有权，所以卖
你属于非法交易，她现在被工商局的追杀，落荒而逃鸟～
☆─────────────────────────────────────☆
lanzhu (小懒猪) 于 (Tue Jan 11 15:30:26 2011, 美东) 提到:
"你不知道weiming.info么？可以有水枪排名的"
那这个又是什么？
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babyfox (小狐狸般若) 于 (Tue Jan 11 15:31:36 2011, 美东) 提到:
是个网站？去看看
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churchance (小二橙管) 于 (Tue Jan 11 15:31:59 2011, 美东) 提到:
谢谢，来一捆。
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xtxtxttchris (chris) 于 (Tue Jan 11 15:32:53 2011, 美东) 提到:
MyActivity的中文是啥？或者给我个链接。。。
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churchance (小二橙管) 于 (Tue Jan 11 15:33:05 2011, 美东) 提到:
你说水枪排名啊。。她说候选人的推荐呢。
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churchance (小二橙管) 于 (Tue Jan 11 15:34:08 2011, 美东) 提到:
吃包子
http://mitbbs.com/article/MyActivity/12517523_3.html
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xtxtxttchris (chris) 于 (Tue Jan 11 15:34:33 2011, 美东) 提到:
我给你正式授权吧
☆─────────────────────────────────────☆
xtxtxttchris (chris) 于 (Tue Jan 11 15:35:58 2011, 美东) 提到:
哈哈哈，你要笑死我啊，写的比版草的还肉麻
☆─────────────────────────────────────☆
athome (athome) 于 (Tue Jan 11 15:37:18 2011, 美东) 提到:
如果你不介意和我睡在一张席梦思上的话，没问题啊。
☆─────────────────────────────────────☆
babyfox (小狐狸般若) 于 (Tue Jan 11 15:38:03 2011, 美东) 提到:
小笨狐狸还没考到营业执照呢~55
刚才不是给你推荐了一个很强大的agent吗？他要卖不掉你就让他“包养”你，嘻嘻～
橙子大哥不要打我哈～
☆─────────────────────────────────────☆
babyfox (小狐狸般若) 于 (Tue Jan 11 15:40:21 2011, 美东) 提到:
小桃，悄悄告诉你：他那席梦思是垃圾堆里拣来的，上面还有猫尿。。。我呕～
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xtxtxttchris (chris) 于 (Tue Jan 11 15:40:50 2011, 美东) 提到:
那至少要画个38线
☆─────────────────────────────────────☆
athome (athome) 于 (Tue Jan 11 15:42:39 2011, 美东) 提到:
有段时间坛子里流行闺蜜抢男友/老公的，我还不相信。现在我信了。
☆─────────────────────────────────────☆
scoreboard (计分版.小S) 于 (Tue Jan 11 15:43:24 2011, 美东) 提到:
吃
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lanzhu (小懒猪) 于 (Tue Jan 11 15:43:31 2011, 美东) 提到:
Feel free
☆─────────────────────────────────────☆
athome (athome) 于 (Tue Jan 11 15:43:40 2011, 美东) 提到:
没问题，我越线就是禽兽。
☆─────────────────────────────────────☆
lanzhu (小懒猪) 于 (Tue Jan 11 15:44:30 2011, 美东) 提到:
赞支书
☆─────────────────────────────────────☆
churchance (小二橙管) 于 (Tue Jan 11 15:44:33 2011, 美东) 提到:
哈哈，说你能开杂货店果然不假。。
☆─────────────────────────────────────☆
babyfox (小狐狸般若) 于 (Tue Jan 11 15:46:32 2011, 美东) 提到:
没明白，什么意思？
☆─────────────────────────────────────☆
lanzhu (小懒猪) 于 (Tue Jan 11 15:47:08 2011, 美东) 提到:
支书一句话我就跑了趟杂货店
☆─────────────────────────────────────☆
athome (athome) 于 (Tue Jan 11 15:48:39 2011, 美东) 提到:
你诬陷我的席梦思是垃圾堆里拣来的，上面还有猫尿，想要达到什么目的？再说，你怎
么知道上面有猫尿的？
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churchance (小二橙管) 于 (Tue Jan 11 15:50:24 2011, 美东) 提到:
也就我能认出
瞎舔瞎舔瞎舔舔个累死
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babyfox (小狐狸般若) 于 (Tue Jan 11 15:51:42 2011, 美东) 提到:
我立马认出来了，这下你不能再蔑视我的智慧了～
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churchance (小二橙管) 于 (Tue Jan 11 15:53:23 2011, 美东) 提到:
小狐狸智弱和小狐狸笨弱，你觉得哪个你更喜欢？
☆─────────────────────────────────────☆
babyfox (小狐狸般若) 于 (Tue Jan 11 15:55:16 2011, 美东) 提到:
你照照镜子、看看自己那副总是找不到地方piu~piu 、WS 得不能再 WS 的样子，就只
能在床垫上了...哎～小桃要跟了你，估计连懒猪都看不下去！
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babyfox (小狐狸般若) 于 (Tue Jan 11 15:57:06 2011, 美东) 提到:
嗯，“笨弱”很好听，比般若强多了！
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xtxtxttchris (chris) 于 (Tue Jan 11 16:01:50 2011, 美东) 提到:
我如果发包子，这行为是不是就算贿赂啊？
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lanzhu (小懒猪) 于 (Tue Jan 11 16:02:37 2011, 美东) 提到:
算感谢
发吧
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churchance (小二橙管) 于 (Tue Jan 11 16:05:09 2011, 美东) 提到:
你捐版里吧。。算是赞助版面，版面鼓励大家支持版面的投票。
☆─────────────────────────────────────☆
xtxtxttchris (chris) 于 (Tue Jan 11 16:14:30 2011, 美东) 提到:
没问题啊。我肯定捐
☆─────────────────────────────────────☆
babyfox (小狐狸般若) 于 (Tue Jan 11 16:18:27 2011, 美东) 提到:
美女真大方，赞一个！
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HappyHope (笑红) 于 (Tue Jan 11 16:50:10 2011, 美东) 提到:
男ID要伪币有什么用？
博美女一笑。
男ID要伪币还有什么用？
博老婆一笑。
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HappyHope (笑红) 于 (Tue Jan 11 16:52:03 2011, 美东) 提到:
小狐狸，把班花卖给我吧
☆─────────────────────────────────────☆
HappyHope (笑红) 于 (Tue Jan 11 16:53:29 2011, 美东) 提到:
美女不用发包子，笑笑就够了。
☆─────────────────────────────────────☆
xtxtxttchris (chris) 于 (Tue Jan 11 18:03:57 2011, 美东) 提到:
我做签名了
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yuxuxin (开水泡妞) 于 (Tue Jan 11 18:29:42 2011, 美东) 提到:
那还不赏我个包子？
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babyfox (小狐狸般若) 于 (Tue Jan 11 18:30:03 2011, 美东) 提到:
你不是说我们这里是青楼吗？要买头牌得找我们老鸨商量，我是伺候头牌的丫鬟。
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catchafish (CAF) 于 (Tue Jan 11 21:13:33 2011, 美东) 提到:
没看到呢。。。私奔一个吧？
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Vega2009 (.......) 于 (Tue Jan 11 21:23:39 2011, 美东) 提到:
又投了。
☆─────────────────────────────────────☆
churchance (小二橙管) 于 (Tue Jan 11 21:39:26 2011, 美东) 提到:
靠
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xtxtxttchris (chris) 于 (Wed Jan 12 01:40:38 2011, 美东) 提到:
刚才去看了一下，已经快垫底了。。。
☆─────────────────────────────────────☆
churchance (小二橙管) 于 (Wed Jan 12 03:03:26 2011, 美东) 提到:
恩，发现这贴里全是版聊。。包子才发出去15个。。
☆─────────────────────────────────────☆
csboy2007 (我叫包守腿。。宇宙无敌包子控) 于 (Wed Jan 12 15:10:12 2011, 美东) 提到:
yeah，谢谢谢谢，谢谢老大，谢谢大家，我也投票了，给了版花。。。还有我。。。哇
咔咔，好ws啊。不知道是不是也有包子啊：）
☆─────────────────────────────────────☆
churchance (小二橙管) 于 (Wed Jan 12 15:12:36 2011, 美东) 提到:
ft,快给版里捐点。。
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csboy2007 (我叫包守腿。。宇宙无敌包子控) 于 (Wed Jan 12 15:15:12 2011, 美东) 提到:
我得奖的奖金统统给版上好不好呀，哇咔咔。
我是可爱的小狗狗，最喜欢被人家用肉包子打。哇咔咔
哇咔咔
哈哈，老大是不是有点想抽俺两下的感觉。哇咔咔
☆─────────────────────────────────────☆
babyfox (小狐狸般若) 于 (Wed Jan 12 15:15:19 2011, 美东) 提到:
老大，你那么多马甲，都去帮投吧，小桃快不行了，555～
☆─────────────────────────────────────☆
churchance (小二橙管) 于 (Wed Jan 12 15:18:11 2011, 美东) 提到:
马甲有屁用，再多能有几个。。你爱上小桃了？
☆─────────────────────────────────────☆
xtxtxttchris (chris) 于 (Wed Jan 12 15:31:36 2011, 美东) 提到:
万能的橙子啊，你帮我double check一下，小狐狸是女的吧？
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churchance (小二橙管) 于 (Wed Jan 12 15:33:19 2011, 美东) 提到:
我pm你吧。
☆─────────────────────────────────────☆
babyfox (小狐狸般若) 于 (Wed Jan 12 15:33:37 2011, 美东) 提到:
哈哈，他木有办法确证，还是你来吧！
☆─────────────────────────────────────☆
xtxtxttchris (chris) 于 (Wed Jan 12 15:56:14 2011, 美东) 提到:
妞～奔个给大爷看看，大爷有包子～
☆─────────────────────────────────────☆
babyfox (小狐狸般若) 于 (Wed Jan 12 15:59:18 2011, 美东) 提到:
你不是大爷，妞不给你奔～
☆─────────────────────────────────────☆
xpchong (chongchong) 于 (Wed Jan 12 16:02:00 2011, 美东) 提到:
吃
☆─────────────────────────────────────☆
qilikala888 (qilikala) 于 (Wed Jan 12 16:33:48 2011, 美东) 提到:
本版的版草应该是河马，其他人都不够料
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babyfox (小狐狸般若) 于 (Wed Jan 12 16:44:31 2011, 美东) 提到:
kettle长久无佳作问世，已经被老大正式弃用。
喜新厌旧，乃老大之本色～
☆─────────────────────────────────────☆
churchance (小二橙管) 于 (Wed Jan 19 23:51:58 2011, 美东) 提到:
顶上来
还有投票的，欢迎继续给xtxtxtchris, and csboy2007投票。
版主评选里，staionCC，和skyblue0 也需要选票。谢谢大家
☆─────────────────────────────────────☆
lanzhu (小懒猪) 于 (Wed Jan 19 23:58:16 2011, 美东) 提到:
都结束了还顶啊
☆─────────────────────────────────────☆
churchance (小二橙管) 于 (Thu Jan 20 00:01:17 2011, 美东) 提到:
不是还有一天么？
☆─────────────────────────────────────☆
xtxtxttchris (chris) 于 (Thu Jan 20 10:16:39 2011, 美东) 提到:
555555555我倒数第五

d*i2013-12-19 08:12

3 楼

做了一个实验，用药处理细胞后取mRNA，发现mRNA增加非常多。然后又做了一次试验取
protein，看看这个基因的蛋白 western水平有没有增加，结果发现蛋白水平没有增加
。因为一般来说mRNA增加很多protein也会相应增加。不知道是那里做错了，为了同时
做mRNA和protein，打算用dadish养细胞并加药处理，收集细胞后一分为二，分别做RNA
和protein。
打算这样做：收集细胞的时候先把细胞刮下来，离心后重悬，然后一分为二，分别加入
RNA和protein的lysis buffer。
问题：我还想用这些protein检测post-translational modifications，比如磷酸化乙
酰化什么的。
在收集细胞过程中，这些post-translational modifications可能改变，能不能用PBS
把medium洗掉之后用4%的formaldehyde固定一下细胞，保留所有post-translational
modifications？
请大家指点一下。谢谢！

w*e2013-12-19 08:12

4 楼

呵呵

T*i2013-12-19 08:12

5 楼

有用Trizol先提RNA再提蛋白的流程，你应该能google 到。不过不知道对于
posttranslational modifications怎么样。对于磷酸化，有一大堆phosphatase
inhibitors，最便宜的应该是Sodium Vanadate。不过一般几个同时用，才能抑制多种
phosphatase。

RNA
PBS

【在 d****i 的大作中提到】

: 做了一个实验，用药处理细胞后取mRNA，发现mRNA增加非常多。然后又做了一次试验取
: protein，看看这个基因的蛋白 western水平有没有增加，结果发现蛋白水平没有增加
: 。因为一般来说mRNA增加很多protein也会相应增加。不知道是那里做错了，为了同时
: 做mRNA和protein，打算用dadish养细胞并加药处理，收集细胞后一分为二，分别做RNA
: 和protein。
: 打算这样做：收集细胞的时候先把细胞刮下来，离心后重悬，然后一分为二，分别加入
: RNA和protein的lysis buffer。
: 问题：我还想用这些protein检测post-translational modifications，比如磷酸化乙
: 酰化什么的。
: 在收集细胞过程中，这些post-translational modifications可能改变，能不能用PBS

s*s2013-12-19 08:12

6 楼

cool

d*i2013-12-19 08:12

7 楼

非常感谢！你说的那个先RNA后protein的方法我是知道的，但是我不想因为RNA提取过
程中给protein引入其他的杂质，比如残留的酚氯仿什么的。

【在 T****i 的大作中提到】

: 有用Trizol先提RNA再提蛋白的流程，你应该能google 到。不过不知道对于
: posttranslational modifications怎么样。对于磷酸化，有一大堆phosphatase
: inhibitors，最便宜的应该是Sodium Vanadate。不过一般几个同时用，才能抑制多种
: phosphatase。
:
: RNA
: PBS

T*i2013-12-19 08:12

8 楼

now my cat wants to order a pair....damn u..

d*i2013-12-19 08:12

9 楼

另外我想的是4%的formaldehyde固定一下细胞可能会保留all kinds of post-
translational modifications,以后不管做啥拿来用就行了。

T*i2013-12-19 08:12

10 楼

PFA crosslinking火候不好掌握。不过以前看人做过。能做好的都是牛人啊。

【在 d****i 的大作中提到】

: 另外我想的是4%的formaldehyde固定一下细胞可能会保留all kinds of post-
: translational modifications,以后不管做啥拿来用就行了。

s*s2013-12-19 08:12

11 楼

Trizol除了RNA，抽DNA和蛋白都很麻烦，样品够多的话还是分开来做吧

【在 T****i 的大作中提到】

d*i2013-12-19 08:12

12 楼

细胞系，样品足够多。但是我希望是同一个dish的treatment来的分别作RNA和protein
。

【在 s******s 的大作中提到】

: Trizol除了RNA，抽DNA和蛋白都很麻烦，样品够多的话还是分开来做吧

c*b2013-12-19 08:12

13 楼

要不试试这个
http://www.clontech.com/US/Products/Nucleic_Acid_Purification/R
看你的RNA有多abundant和稳定了。我一般就是拿着1X的SDS－PAGE loading buffer把
蛋白提出来一半上样然后另一半用trizol或者RNAzol提，不过我加了酒精之后不是离心
沉淀而是用个柱子（其实质粒小提的柱子都可以）来纯化然后elute，反正做RT－PCR是
没有问题的。

protein

【在 d****i 的大作中提到】

:
: 细胞系，样品足够多。但是我希望是同一个dish的treatment来的分别作RNA和protein
: 。

d*i2013-12-19 08:12

14 楼

谢谢！直接加入SDS－PAGE loading buffer对蛋白的各种posttranslational
modifications有保护作用吗？

【在 c********b 的大作中提到】

: 要不试试这个
: http://www.clontech.com/US/Products/Nucleic_Acid_Purification/R
: 看你的RNA有多abundant和稳定了。我一般就是拿着1X的SDS－PAGE loading buffer把
: 蛋白提出来一半上样然后另一半用trizol或者RNAzol提，不过我加了酒精之后不是离心
: 沉淀而是用个柱子（其实质粒小提的柱子都可以）来纯化然后elute，反正做RT－PCR是
: 没有问题的。
:
: protein

c*b2013-12-19 08:12

15 楼

做蛋白的话很多时候都是case－by－case的，你不试试怎么能完全知道呢？

【在 d****i 的大作中提到】

:
: 谢谢！直接加入SDS－PAGE loading buffer对蛋白的各种posttranslational
: modifications有保护作用吗？