如何证明一个蛋白是RNA Binding Protein - 未名空间MITBBS历史存档

如何证明一个蛋白是RNA Binding Protein# Biology - 生物学

z*c2014-01-18 08:01

1 楼

以表现是我双重性格：）
以虎妈老大的资质，不折腾的话，顶多去个州立，现在去哈佛，这是实实在在的效果。
没有规矩不成方圆。孩子懂什么，大人得教，爱好得培养，幸福？也得培养。
昨晚看到了一个关于幼儿启蒙的Video Clip。说婴幼儿哭是天生的而笑不是，笑是模
仿家长表情。当时我就震惊了。

b*12014-01-18 08:01

2 楼

如果h1b tranfer 去新公司，那么老公司可否申请把握的H1b从full time 转为part
time? 还是必须重新申请一个quota...

r*a2014-01-18 08:01

3 楼

我们研究的一个蛋白，有一个HTH motif
以前的文章证明它可以in vitro结合DNA，但是10多年来一直没有后续进展
我们觉得，它可能实际上结合的是RNA
它在几个大规模RNA binding protein的筛选里被发现
同时有报道它可以和ribosome结合，可能通过RNA方式
现在，我们不知道它倒底结合什么RNA
有什么好的方法可以证明这个是RNA结合蛋白呢？

z*c2014-01-18 08:01

4 楼

这个说得太好了！居然很多大妈都看懂了。

J*A2014-01-18 08:01

5 楼

你都transfer走了，老公司还能对你的H1B做什么？

a*k2014-01-18 08:01

6 楼

yeast three hybrid

我们研究的一个蛋白，有一个HTH motif
以前的文章证明它可以in vitro结合DNA，但是10多年来一直没有后续进展
我们觉得，它可能实际上结合的是RNA
它在几个大规模RNA binding protein的筛选里被发现
同时有报道它可以和ribosome结合，可能通过RNA方式
现在，我们不知道它倒底结合什么RNA
有什么好的方法可以证明这个是RNA结合蛋白呢？

【在 r**a 的大作中提到】

: 我们研究的一个蛋白，有一个HTH motif
: 以前的文章证明它可以in vitro结合DNA，但是10多年来一直没有后续进展
: 我们觉得，它可能实际上结合的是RNA
: 它在几个大规模RNA binding protein的筛选里被发现
: 同时有报道它可以和ribosome结合，可能通过RNA方式
: 现在，我们不知道它倒底结合什么RNA
: 有什么好的方法可以证明这个是RNA结合蛋白呢？

x*62014-01-18 08:01

7 楼

糟蹋这个词用的。。。。。

b*12014-01-18 08:01

8 楼

是想给老公司继续做part time........

r*a2014-01-18 08:01

9 楼

这个可以在不知道结合什么RNA的情况下做？

【在 a********k 的大作中提到】

: yeast three hybrid
:
: 我们研究的一个蛋白，有一个HTH motif
: 以前的文章证明它可以in vitro结合DNA，但是10多年来一直没有后续进展
: 我们觉得，它可能实际上结合的是RNA
: 它在几个大规模RNA binding protein的筛选里被发现
: 同时有报道它可以和ribosome结合，可能通过RNA方式
: 现在，我们不知道它倒底结合什么RNA
: 有什么好的方法可以证明这个是RNA结合蛋白呢？

V*o2014-01-18 08:01

10 楼

why? Tiger mom's older kid knew alphabet at 18 months! Why do you think she
could go to a so-so college without Tiger mom??

【在 z**c 的大作中提到】

: 以表现是我双重性格：）
: 以虎妈老大的资质，不折腾的话，顶多去个州立，现在去哈佛，这是实实在在的效果。
: 没有规矩不成方圆。孩子懂什么，大人得教，爱好得培养，幸福？也得培养。
: 昨晚看到了一个关于幼儿启蒙的Video Clip。说婴幼儿哭是天生的而笑不是，笑是模
: 仿家长表情。当时我就震惊了。

g*n2014-01-18 08:01

11 楼

当然不用什么新的quota

c*r2014-01-18 08:01

12 楼

有好的抗体吗？
有的话能不能做CoIP，然后提取RNA做RNA-seq？
我的目标蛋白是localized，计划用类似的方法看这个complex里有没有localized RNA
。不知道是否可行。

【在 r**a 的大作中提到】

: 我们研究的一个蛋白，有一个HTH motif
: 以前的文章证明它可以in vitro结合DNA，但是10多年来一直没有后续进展
: 我们觉得，它可能实际上结合的是RNA
: 它在几个大规模RNA binding protein的筛选里被发现
: 同时有报道它可以和ribosome结合，可能通过RNA方式
: 现在，我们不知道它倒底结合什么RNA
: 有什么好的方法可以证明这个是RNA结合蛋白呢？

x*s2014-01-18 08:01

13 楼

18个月就认全字母不算啥吧？很多娃能做到啊。。虎妈的问题上我同意这位小弟的。。
。当然还有个问题是，她家娃是不是在申请表格上填亚裔还是白种。。。。。

she

【在 V*********o 的大作中提到】

: why? Tiger mom's older kid knew alphabet at 18 months! Why do you think she
: could go to a so-so college without Tiger mom??

b*m2014-01-18 08:01

14 楼

这是两个quota。

f*92014-01-18 08:01

15 楼

用crispr／cas9
给这个蛋白的chr上加个tag然后做RNA IP
或者用biotin label 的oligo pulldown RNA 核protein 做protein seq

V*o2014-01-18 08:01

16 楼

you must have a very smart kid at home.
I know about 20 kids in person. None of them knew alphabet at 18 months. So
, IMHO, it's a marvelous skill for a 18 months. Maybe i am like a frog at
the bottom of a well. :-(

【在 x**s 的大作中提到】

: 18个月就认全字母不算啥吧？很多娃能做到啊。。虎妈的问题上我同意这位小弟的。。
: 。当然还有个问题是，她家娃是不是在申请表格上填亚裔还是白种。。。。。
:
: she

s*c2014-01-18 08:01

17 楼

不用名额，但前提你的新h1b，选的是new concurrent employer。

q*g2014-01-18 08:01

18 楼

我觉得这个方法可行。即使没有好抗体，连个HA，也可以看看是否有RNA结合。

RNA

【在 c*********r 的大作中提到】

: 有好的抗体吗？
: 有的话能不能做CoIP，然后提取RNA做RNA-seq？
: 我的目标蛋白是localized，计划用类似的方法看这个complex里有没有localized RNA
: 。不知道是否可行。

r*f2014-01-18 08:01

19 楼

长得不怎么亚裔,姓也是...是不是有2种血统以上的选择？

【在 x**s 的大作中提到】

: 18个月就认全字母不算啥吧？很多娃能做到啊。。虎妈的问题上我同意这位小弟的。。
: 。当然还有个问题是，她家娃是不是在申请表格上填亚裔还是白种。。。。。
:
: she

k*b2014-01-18 08:01

20 楼

你的新公司会知道你在接私活

g*a2014-01-18 08:01

21 楼

这个方法可行不 CLIP (Cross-Linking and Immunoprecipitation) Identification
of RNAs Bound by a Specific Protein）

x*s2014-01-18 08:01

22 楼

也不是啦，是看父母投入的时间多不多而已。俺家都是平庸娃，谁让父母的智商都只有
100呢。我真觉得早认字啥的不说明啥，俺家娃说话就特别晚，现在还经常口齿不清的

So

【在 V*********o 的大作中提到】

: you must have a very smart kid at home.
: I know about 20 kids in person. None of them knew alphabet at 18 months. So
: , IMHO, it's a marvelous skill for a 18 months. Maybe i am like a frog at
: the bottom of a well. :-(

g*n2014-01-18 08:01

23 楼

You have one approved industry H1b, you can get multi part time H1b without
restricition of quota.

g*62014-01-18 08:01

24 楼

in vitro: 细菌表达GST融合蛋白，做GST pull down，可以用你提到的in vitro
transcribed rRNA，33P标记，完了之后做液闪。
in cell lines：转染HA/FLAG标记的蛋白表达质粒，做RNA immunoprecipitation，然
后做qPCR或RNA-seq。前面有人提到用CRISPR敲进标记，我觉得可能比较麻烦，不如用
质粒来的简单。当然最可信的方法还是用目的蛋白的抗体。

x*s2014-01-18 08:01

25 楼

呵呵，这种肯定不选亚裔的了。。。

【在 r*f 的大作中提到】

: 长得不怎么亚裔,姓也是...是不是有2种血统以上的选择？

m*D2014-01-18 08:01

26 楼

能不能in vitro translation合成S-35标记你的蛋白，然后把这个蛋白和你感兴趣的细
胞里分离纯化出来total RNA混合（注意buffer,pH），上Electrophoretic mobility
shift assay（EMSA)gel,比较有RNA和没有RNA的lane上条带的变化。还可以再有一个蛋
白-RNA-RNase的lane作比较。应该可以证明你的蛋白是不是和RNA结合。

s*t2014-01-18 08:01

27 楼

楼主大叔的中文真是值得worry啊。

【在 x********6 的大作中提到】

: 糟蹋这个词用的。。。。。

r*a2014-01-18 08:01

28 楼

谢谢各位的建议。
目前，我们还不准备做RNA-seq,觉得耗费是不是太大了
我们第一步，只是想证明这个是RNA binding的蛋白
我们目前有一个myc tag的蛋白，在转在果蝇里面（我们是做果蝇的），而且是
functional的，所以可以用这个抗体，但是在果蝇里面好象没有好的办法标记RNA （我
不知道能不能尝试，用oligo dT的beads，pulldown，能不能拉下我的蛋白？）
还有一个，我们已经在那个HTH motif做了点突变，有几个突变体有很好的现象，
所以我们还想进一步证明，这个作用是通过这个区域进行的。
所以，只要是一个体外的实验，证明上面两点就可以了。
midwestPhD大哥的方法不错，就是我个人对这个EMSA有点怵（听说挺麻烦的），以前硕
士的时候帮一个师兄一起搞过，没有做出来。

【在 m*********D 的大作中提到】

: 能不能in vitro translation合成S-35标记你的蛋白，然后把这个蛋白和你感兴趣的细
: 胞里分离纯化出来total RNA混合（注意buffer,pH），上Electrophoretic mobility
: shift assay（EMSA)gel,比较有RNA和没有RNA的lane上条带的变化。还可以再有一个蛋
: 白-RNA-RNase的lane作比较。应该可以证明你的蛋白是不是和RNA结合。

a*t2014-01-18 08:01

29 楼

端看你对幸福的定义. 另外这个婴幼儿笑是模仿家长表情的说法很另类阿.

【在 z**c 的大作中提到】

: 以表现是我双重性格：）
: 以虎妈老大的资质，不折腾的话，顶多去个州立，现在去哈佛，这是实实在在的效果。
: 没有规矩不成方圆。孩子懂什么，大人得教，爱好得培养，幸福？也得培养。
: 昨晚看到了一个关于幼儿启蒙的Video Clip。说婴幼儿哭是天生的而笑不是，笑是模
: 仿家长表情。当时我就震惊了。

c*r2014-01-18 08:01

30 楼

不做RNA-seq也可以用抗体pull down，提RNA，测一下有没有RNA；如果有的话，可以进
一步反转录合成cDNA、dsDNA做个library，然后克隆测序吧。我想。

【在 r**a 的大作中提到】

: 谢谢各位的建议。
: 目前，我们还不准备做RNA-seq,觉得耗费是不是太大了
: 我们第一步，只是想证明这个是RNA binding的蛋白
: 我们目前有一个myc tag的蛋白，在转在果蝇里面（我们是做果蝇的），而且是
: functional的，所以可以用这个抗体，但是在果蝇里面好象没有好的办法标记RNA （我
: 不知道能不能尝试，用oligo dT的beads，pulldown，能不能拉下我的蛋白？）
: 还有一个，我们已经在那个HTH motif做了点突变，有几个突变体有很好的现象，
: 所以我们还想进一步证明，这个作用是通过这个区域进行的。
: 所以，只要是一个体外的实验，证明上面两点就可以了。
: midwestPhD大哥的方法不错，就是我个人对这个EMSA有点怵（听说挺麻烦的），以前硕

z*c2014-01-18 08:01

31 楼

聪明的大妈立马看出来了：这显然是为了挑起话题，再把虎妈糟蹋一遍啊：）
赶快给我这个机会吧。

r*a2014-01-18 08:01

32 楼

如果这个方法可行，是最好的拉。
不过不好意思，对RNA，不适特别在行，
请问，这里怎么提取RNA，然后测RNA呢？
总不至于Nanodrop测浓度吧？
还有弄成cDNA之后，用随机引物合成dsDNA？
谢谢先了；－）

【在 c*********r 的大作中提到】

: 不做RNA-seq也可以用抗体pull down，提RNA，测一下有没有RNA；如果有的话，可以进
: 一步反转录合成cDNA、dsDNA做个library，然后克隆测序吧。我想。

w*w2014-01-18 08:01

33 楼

我儿子生出来第一天就会笑，难道也是模仿？
我听朋友说宝宝笑是在回忆上辈子开心的事儿

【在 z**c 的大作中提到】

: 以表现是我双重性格：）
: 以虎妈老大的资质，不折腾的话，顶多去个州立，现在去哈佛，这是实实在在的效果。
: 没有规矩不成方圆。孩子懂什么，大人得教，爱好得培养，幸福？也得培养。
: 昨晚看到了一个关于幼儿启蒙的Video Clip。说婴幼儿哭是天生的而笑不是，笑是模
: 仿家长表情。当时我就震惊了。

c*r2014-01-18 08:01

34 楼

我也不是内行。我觉得看你的input有多少。Input多的话，RNA怎么提都可以，用RNA
extraction kit，用trizol；RNA量大的话，用Nanodrop就可以检测吧。Input少的话，
可能需要比较小心，检测的话也需要用比较灵敏可靠的方法吧，这里我就不太了解了，
等版上其他高手解答吧。
Library构建的话有经典的方法吧，是不是最好用poly T primer + random primer来把
各种RNA都尽可能反转录？我没具体做过library，你再查查资料吧。我比较担心的是如
果rRNA比较多的话，最后挑克隆测序大部分都是rRNA。这样的话就最好不用random
primer了，或者通过其它方式deplete rRNA。其实rRNA多、input量大的话跑个RNA胶就
能检测RNA了。关键是你的蛋白可能会和哪些种类的RNA结合：rRNA, RNA with poly (A
) tail, RNA without poly (A) tail，甚至是小RNA。各种情况可能要分开讨论吧。
只是个人一点看法，仅供参考。

【在 r**a 的大作中提到】

: 如果这个方法可行，是最好的拉。
: 不过不好意思，对RNA，不适特别在行，
: 请问，这里怎么提取RNA，然后测RNA呢？
: 总不至于Nanodrop测浓度吧？
: 还有弄成cDNA之后，用随机引物合成dsDNA？
: 谢谢先了；－）

l*r2014-01-18 08:01

35 楼

I don't quite buy the statement of the clip. My son laughed during his first
week and he could not even see well at that time.

【在 z**c 的大作中提到】

: 以表现是我双重性格：）
: 以虎妈老大的资质，不折腾的话，顶多去个州立，现在去哈佛，这是实实在在的效果。
: 没有规矩不成方圆。孩子懂什么，大人得教，爱好得培养，幸福？也得培养。
: 昨晚看到了一个关于幼儿启蒙的Video Clip。说婴幼儿哭是天生的而笑不是，笑是模
: 仿家长表情。当时我就震惊了。

s*r2014-01-18 08:01

36 楼

clip肯定能pull到rna的，很多都是非特异，需要对比wt和rna binding domain
mutated两个样品间的区别，知道target的可以用realtime测，不知道target的只能上
array或者seq看

【在 r**a 的大作中提到】

: 如果这个方法可行，是最好的拉。
: 不过不好意思，对RNA，不适特别在行，
: 请问，这里怎么提取RNA，然后测RNA呢？
: 总不至于Nanodrop测浓度吧？
: 还有弄成cDNA之后，用随机引物合成dsDNA？
: 谢谢先了；－）

f*g2014-01-18 08:01

37 楼

同诧异
偶知道的娃娃，大概要20个月才利索的说话，18个月的时候就算认得也说不出来啊
不过，提前几个月也实在没啥意思啊

So

【在 V*********o 的大作中提到】

: you must have a very smart kid at home.
: I know about 20 kids in person. None of them knew alphabet at 18 months. So
: , IMHO, it's a marvelous skill for a 18 months. Maybe i am like a frog at
: the bottom of a well. :-(

l*12014-01-18 08:01

38 楼

用GFP UV-corissing immunoprecipitated mRNAs assay
pls refer,
>
GFP-Based Method for Detection of mRNA-Protein Interactions
HeLa cells expressing N- or C-terminally EGFP/YFP-tagged proteins (Table S7)
were induced with tetracycline, irradiated with UV light, and lysed. GFP-
binding protein (GBP; GFP agarose trap, Chromotek)-immunoprecipitated mRNAs
were detected using an oligo(dT)25 probe fused to TRed dye (Sigma).
RNAs coimmunoprecipitated with GFP/YFP-tagged proteins were identified by
RNASeq. Detailed protocols can be found in the Supplemental Information.
cited from
Cell. (2012).149:1393-406.
Insights into RNA biology from an atlas of mammalian mRNA-binding proteins.
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22658674
PDf link:
HTTP double dot//rnajc.ucsf.edu/sites/rnajc.ucsf.edu/files/
CastelloArticlePlusSupplementalJune2012.pdf
or
Nat Protoc. (2013). 8: 491-500.
System-wide identification of RNA-binding proteins by interactome capture.
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23411631
more alternative methods such as
Proc Natl Acad Sci U S A. (2013). 110: 5416-21.
RNA-protein analysis using a conditional CRISPR nuclease.
pls check
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?linkname=pubmed_pubmed_cited
then S(earch)I(t)(by)Y(ourself)..

【在 r**a 的大作中提到】

: 谢谢各位的建议。
: 目前，我们还不准备做RNA-seq,觉得耗费是不是太大了
: 我们第一步，只是想证明这个是RNA binding的蛋白
: 我们目前有一个myc tag的蛋白，在转在果蝇里面（我们是做果蝇的），而且是
: functional的，所以可以用这个抗体，但是在果蝇里面好象没有好的办法标记RNA （我
: 不知道能不能尝试，用oligo dT的beads，pulldown，能不能拉下我的蛋白？）
: 还有一个，我们已经在那个HTH motif做了点突变，有几个突变体有很好的现象，
: 所以我们还想进一步证明，这个作用是通过这个区域进行的。
: 所以，只要是一个体外的实验，证明上面两点就可以了。
: midwestPhD大哥的方法不错，就是我个人对这个EMSA有点怵（听说挺麻烦的），以前硕

r*e2014-01-18 08:01

39 楼

你得奔个你孩子才能服众。

【在 z**c 的大作中提到】

: 以表现是我双重性格：）
: 以虎妈老大的资质，不折腾的话，顶多去个州立，现在去哈佛，这是实实在在的效果。
: 没有规矩不成方圆。孩子懂什么，大人得教，爱好得培养，幸福？也得培养。
: 昨晚看到了一个关于幼儿启蒙的Video Clip。说婴幼儿哭是天生的而笑不是，笑是模
: 仿家长表情。当时我就震惊了。

j*n2014-01-18 08:01

40 楼

RNA protection assay.
Crosslink, then RNase digest, then qPCR or other

l*O2014-01-18 08:01

41 楼

我家老大就会. 所以当时听别人说他们家小孩不会，我都很惊讶。不过我家老二三岁才
认全，我终于明白。

So

【在 V*********o 的大作中提到】

: you must have a very smart kid at home.
: I know about 20 kids in person. None of them knew alphabet at 18 months. So
: , IMHO, it's a marvelous skill for a 18 months. Maybe i am like a frog at
: the bottom of a well. :-(

h*h2014-01-18 08:01

42 楼

如果是yeast的话可以试试用tagged U1A去pulldown对应的mRNA然后看看你的蛋白在不
在mRNA上面

b*l2014-01-18 08:01

43 楼

你们老大比老二现在聪明很多吗?

【在 l*****O 的大作中提到】

: 我家老大就会. 所以当时听别人说他们家小孩不会，我都很惊讶。不过我家老二三岁才
: 认全，我终于明白。
:
: So

r*a2014-01-18 08:01

44 楼

谢谢大家的建议。
和老板讨论了一下，他建议简单的先来，
就IP拉下RNA，然后用random primer，看能不能弄下条带了
试试看吧，不知道行不行！

【在 r**a 的大作中提到】

: 我们研究的一个蛋白，有一个HTH motif
: 以前的文章证明它可以in vitro结合DNA，但是10多年来一直没有后续进展
: 我们觉得，它可能实际上结合的是RNA
: 它在几个大规模RNA binding protein的筛选里被发现
: 同时有报道它可以和ribosome结合，可能通过RNA方式
: 现在，我们不知道它倒底结合什么RNA
: 有什么好的方法可以证明这个是RNA结合蛋白呢？

z*c2014-01-18 08:01

45 楼

按照科学的观点来说，婴儿的神经发育在出生的时候还极不完善。比如视觉非常差。
最早发育的唇部神经，因为这是关系到生命的。记得刚生老大在医院的时候，一直哭
，我们都抓瞎，不知道什么原因。然后我太太的死党来了，她已经有孩子了，把手指
头往唇边一拨弄，我老大立马顺做手指头就过去了。然后我太太的死党肯定地说，饿
了。果然是。

【在 w*********w 的大作中提到】

: 我儿子生出来第一天就会笑，难道也是模仿？
: 我听朋友说宝宝笑是在回忆上辈子开心的事儿

b*k2014-01-18 08:01

46 楼

~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~请问这个筛选是怎么做的呢？
我感觉RBP是一个比较难做的领域，可能是一个金矿。

【在 r**a 的大作中提到】

: 我们研究的一个蛋白，有一个HTH motif
: 以前的文章证明它可以in vitro结合DNA，但是10多年来一直没有后续进展
: 我们觉得，它可能实际上结合的是RNA
: 它在几个大规模RNA binding protein的筛选里被发现
: 同时有报道它可以和ribosome结合，可能通过RNA方式
: 现在，我们不知道它倒底结合什么RNA
: 有什么好的方法可以证明这个是RNA结合蛋白呢？

h*e2014-01-18 08:01

47 楼

看你这题目起的，吸引眼球也不能这么糟蹋你自己的名声不是？

【在 z**c 的大作中提到】

: 以表现是我双重性格：）
: 以虎妈老大的资质，不折腾的话，顶多去个州立，现在去哈佛，这是实实在在的效果。
: 没有规矩不成方圆。孩子懂什么，大人得教，爱好得培养，幸福？也得培养。
: 昨晚看到了一个关于幼儿启蒙的Video Clip。说婴幼儿哭是天生的而笑不是，笑是模
: 仿家长表情。当时我就震惊了。

r*a2014-01-18 08:01

48 楼

lotkaeuler11的回复里，好几个文章都是讲这个的
我就是主要看的其中的一个cell文章

【在 b******k 的大作中提到】

:
: ~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~~请问这个筛选是怎么做的呢？
: 我感觉RBP是一个比较难做的领域，可能是一个金矿。

z*c2014-01-18 08:01

49 楼

又有字不认识了？怎么跟大妈们聊个天，就这么困难呐？

【在 h*********e 的大作中提到】

: 看你这题目起的，吸引眼球也不能这么糟蹋你自己的名声不是？

a*e2014-01-18 08:01

50 楼

crosslink,
IP,
+/- RNaseA/T1
purify nucleic acid
p32 labeling,
PAGE

h*e2014-01-18 08:01

51 楼

你不知道，和从前比，他的中文已经出落得灰常灰常好了，最近好几个帖子都能让人懂
个八九不离十。
以前，那才是惨不忍睹，每次读都抓心抓肝地郁闷。。。

【在 s******t 的大作中提到】

: 楼主大叔的中文真是值得worry啊。

v*a2014-01-18 08:01

52 楼

good idea

【在 f*********9 的大作中提到】

: 用crispr／cas9
: 给这个蛋白的chr上加个tag然后做RNA IP
: 或者用biotin label 的oligo pulldown RNA 核protein 做protein seq

a*n2014-01-18 08:01

53 楼

用小角中子散射可行

【在 r**a 的大作中提到】

: 我们研究的一个蛋白，有一个HTH motif
: 以前的文章证明它可以in vitro结合DNA，但是10多年来一直没有后续进展
: 我们觉得，它可能实际上结合的是RNA
: 它在几个大规模RNA binding protein的筛选里被发现
: 同时有报道它可以和ribosome结合，可能通过RNA方式
: 现在，我们不知道它倒底结合什么RNA
: 有什么好的方法可以证明这个是RNA结合蛋白呢？

m*i2014-01-18 08:01

54 楼

这个是最靠谱的。要跑SDS-PAGE，再转上nitrocellulose，然后曝光用phosphoimager
看。用高浓度RNase，这样如果看到的条带是和protein MW差不多就是了。negative
ctrl用IgG和没有UV x-link