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请教构建过lentiviruse沉默质粒的大侠
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请教构建过lentiviruse沉默质粒的大侠# Biology - 生物学
n*l
1
请教构建lentivirus质粒的大拿,菜鸟求教
我想沉默pc12细胞的一个基因。查到某公司有公布的基因的沉默序列,在pGFP-shlenti
上。我想构建到lvthm上
问题是我们实验室构建的模版都是(21nt+9bp的loop+21nt的反向互补)在lVTHM上。公
司公布的是(29nt+7bp+29nt的反向互补)
。直接把用(29nt+9bp的loop+29nt的反向互
补)可以直接构建到lvthm上 影响沉默效率么,另外,loop的长短会影响沉默效率么。
万分感谢。
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p*i
2
你可以直接在sigma买,不用这么麻烦。
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n*l
3
sigma 买什么? 我要的是大鼠的某个序列沉默。
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d*r
4
理论上不会影响吧,但我也没横向比较过7bp和9bp的loop效果到底差多少。
我们用过21+6+21的,效果最好能到90%
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r*e
5
长度没问题(19-29都有),序列才是关键。最近在做一个22nt的序列,我一不小心漏了
5'一个nt,成了21nt竟然一点都不行。但并不是说21nt长度不行。(有点拗口,但就是
这个意思)

shlenti

【在 n*******l 的大作中提到】
: 请教构建lentivirus质粒的大拿,菜鸟求教
: 我想沉默pc12细胞的一个基因。查到某公司有公布的基因的沉默序列,在pGFP-shlenti
: 上。我想构建到lvthm上
: 问题是我们实验室构建的模版都是(21nt+9bp的loop+21nt的反向互补)在lVTHM上。公
: 司公布的是(29nt+7bp+29nt的反向互补)
: 。直接把用(29nt+9bp的loop+29nt的反向互
: 补)可以直接构建到lvthm上 影响沉默效率么,另外,loop的长短会影响沉默效率么。
: 万分感谢。

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a*a
6
origin, openbiosystem

【在 n*******l 的大作中提到】
: sigma 买什么? 我要的是大鼠的某个序列沉默。
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j*n
7
自建的话请参考lentiweb
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