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在hiPSC里做CRISPR mutation correction用ssODN靠谱么

在hiPSC里做CRISPR mutation correction用ssODN靠谱么# Biology - 生物学

A*t2015-01-28 08:01

1 楼

收到正式offer，但是问大老板的时候老板把邮件转给HR，HR官方回答是公司政策是一
年后给员工办绿卡，我现在H1b第四年，140已经批了，所以现在公司律师用批了的140
直接给我延期了三年（从今年7月开始三年）。
我现在的问题是：
1. 如果要6年满之后可以延h1b，是否要在h1b的第五年结束前新的140要批？也就是说
必须进新公司之后很快就开始办绿卡？
2. 新的绿卡和旧的绿卡之间是不是不能有太长时间的间隙？我听到的说法是如果两个
绿卡申请间隔的时间太长，比如一年什么的，第二个绿卡申请就可能没法port到旧的
priority date。如果这样，那我在现在公司等待的时间就是白费的。
3. 我现在在想用什么理由给大老板说这个问题，他们一句公司政策就把这个卡住了，
但如果不能马上办绿卡我确实不太想跳。
请版上的达人们帮帮忙解答一下，我已经放弃和他们negotiate工资了，绿卡就是唯一
的要求，只是新公司大老板踢皮球的态度让我很恼火，而且他还是我的旧老板呢，想给
他打个电话说一下情况。
包子答谢~~~~~

c*72015-01-28 08:01

2 楼

哦也

s*r2015-01-28 08:01

3 楼

请教下有经验的同学，看了文章说一般efficiency只有1%，很拼人品的样子，而且如果
挑到了mixed colony也没办法筛选。是不是plasmid donor带selection marker更保险
些, 虽然还要麻烦再挑一次克隆去掉marker。

p*i2015-01-28 08:01

4 楼

明说就是了，不马上办我就不来

r*e2015-01-28 08:01

5 楼

竟然直接埋了....还可以做很多事情

【在 c*******7 的大作中提到】

: 哦也

d*e2015-01-28 08:01

6 楼

靠谱，用ddPCR Sib selection

【在 s********r 的大作中提到】

: 请教下有经验的同学，看了文章说一般efficiency只有1%，很拼人品的样子，而且如果
: 挑到了mixed colony也没办法筛选。是不是plasmid donor带selection marker更保险
: 些, 虽然还要麻烦再挑一次克隆去掉marker。

q*o2015-01-28 08:01

7 楼

perm递上去就可以逐年延期140批了就可以三年一延，所以technically你在新公司没问
题，当然各种官僚或者说话不算不考虑在内

140

【在 A*******t 的大作中提到】

: 收到正式offer，但是问大老板的时候老板把邮件转给HR，HR官方回答是公司政策是一
: 年后给员工办绿卡，我现在H1b第四年，140已经批了，所以现在公司律师用批了的140
: 直接给我延期了三年（从今年7月开始三年）。
: 我现在的问题是：
: 1. 如果要6年满之后可以延h1b，是否要在h1b的第五年结束前新的140要批？也就是说
: 必须进新公司之后很快就开始办绿卡？
: 2. 新的绿卡和旧的绿卡之间是不是不能有太长时间的间隙？我听到的说法是如果两个
: 绿卡申请间隔的时间太长，比如一年什么的，第二个绿卡申请就可能没法port到旧的
: priority date。如果这样，那我在现在公司等待的时间就是白费的。
: 3. 我现在在想用什么理由给大老板说这个问题，他们一句公司政策就把这个卡住了，

c*72015-01-28 08:01

8 楼

=.=

【在 r*********e 的大作中提到】

: 竟然直接埋了....还可以做很多事情

A*t2015-01-28 08:01

9 楼

但是如果想用旧的排期，两个绿卡中间间隔时间不能太长，不是吗？

【在 q******o 的大作中提到】

: perm递上去就可以逐年延期140批了就可以三年一延，所以technically你在新公司没问
: 题，当然各种官僚或者说话不算不考虑在内
:
: 140

a*c2015-01-28 08:01

10 楼

隐晦啊。

【在 r*********e 的大作中提到】

: 竟然直接埋了....还可以做很多事情

f*u2015-01-28 08:01

11 楼

你前一个I-140确立的PD是什么时候？只要I-140批了不管是哪个公司的，都可以用来延
H-1B。但是只有在排期不current的时候才能延。一旦排期current了，你又没法拿前一
个公司的I-140交I-485，又不能继续延H-1B。
看你的意思是说跳槽的这个H-1B已经办好了。只要第2年之内能把你的PERM file上去，
三年之内拿到新I-140的问题不大，而且可以保留先前一个I-140的PD。这样你就没什么
好担心的了。

140

【在 A*******t 的大作中提到】

q*o2015-01-28 08:01

12 楼

从没听说过这个说法

【在 A*******t 的大作中提到】

: 但是如果想用旧的排期，两个绿卡中间间隔时间不能太长，不是吗？

q*o2015-01-28 08:01

13 楼

哦，任何公司的140都可以延H1么，涨新知识了，也是只需要140 approve的复印件就够
了是么？

【在 f**u 的大作中提到】

: 你前一个I-140确立的PD是什么时候？只要I-140批了不管是哪个公司的，都可以用来延
: H-1B。但是只有在排期不current的时候才能延。一旦排期current了，你又没法拿前一
: 个公司的I-140交I-485，又不能继续延H-1B。
: 看你的意思是说跳槽的这个H-1B已经办好了。只要第2年之内能把你的PERM file上去，
: 三年之内拿到新I-140的问题不大，而且可以保留先前一个I-140的PD。这样你就没什么
: 好担心的了。
:
: 140

f*u2015-01-28 08:01

14 楼

对。批准了的I-140 和不当前的排期，两个条件缺一不可。

【在 q******o 的大作中提到】

: 哦，任何公司的140都可以延H1么，涨新知识了，也是只需要140 approve的复印件就够
: 了是么？

d*p2015-01-28 08:01

15 楼

超过6年延h1b有个必要条件：排期不current,如果你排期current而新140没下来，就不
能延了，你算下时间，有这个可能没有

A*t2015-01-28 08:01

16 楼

我的排期比较后，是去年8月的，近期不会current
你说“只要第2年之内能把你的PERM file上去，三年之内拿到新I-140的问题不大，而
且可以保留先前一个I-140的PD”，但是我听人说，最好两个140中间隔的时间不要太长
，否则保留前一个140的PD可能会有问题。

【在 f**u 的大作中提到】

A*t2015-01-28 08:01

17 楼

去年8月的

【在 d*******p 的大作中提到】

: 超过6年延h1b有个必要条件：排期不current,如果你排期current而新140没下来，就不
: 能延了，你算下时间，有这个可能没有

l*n2015-01-28 08:01

18 楼

跟新公司老板好好聊聊，规矩是死的人是活的，早一年给你办他们也不损失什么。

f*u2015-01-28 08:01

19 楼

没这个说法。

【在 A*******t 的大作中提到】

: 我的排期比较后，是去年8月的，近期不会current
: 你说“只要第2年之内能把你的PERM file上去，三年之内拿到新I-140的问题不大，而
: 且可以保留先前一个I-140的PD”，但是我听人说，最好两个140中间隔的时间不要太长
: ，否则保留前一个140的PD可能会有问题。

b*g2015-01-28 08:01

20 楼

"早一年给你办他们也不损失什么"? 你很傻很天真阿

【在 l*****n 的大作中提到】

: 跟新公司老板好好聊聊，规矩是死的人是活的，早一年给你办他们也不损失什么。

a*g2015-01-28 08:01

21 楼

如果是大公司,　很难得有变动

【在 l*****n 的大作中提到】

: 跟新公司老板好好聊聊，规矩是死的人是活的，早一年给你办他们也不损失什么。

q*o2015-01-28 08:01

22 楼

没什么是一定的，fund从你direct manager，或者 one level up，所以只要你的
manager争取，HR没理由不给面子，这是他们的工作

【在 a****g 的大作中提到】

: 如果是大公司,　很难得有变动

pc2015-01-28 08:01

23 楼

如果manager手下还有n号人，都排了大半年了等着呢？

【在 q******o 的大作中提到】

: 没什么是一定的，fund从你direct manager，或者 one level up，所以只要你的
: manager争取，HR没理由不给面子，这是他们的工作

q*o2015-01-28 08:01

24 楼

那当然另说，不过除了IT公司大面积H1b，一般公司不会有这种情况吧

【在 pc 的大作中提到】

: 如果manager手下还有n号人，都排了大半年了等着呢？

l*n2015-01-28 08:01

25 楼

我也在大公司，我来的时候就这么商量的，没什么不可能，看运气

【在 a****g 的大作中提到】

: 如果是大公司,　很难得有变动

r*r2015-01-28 08:01

26 楼

我怎么考古看到的是即使current了，而新的140还没下来，也可以延1年呢？
哪位明白的请来解惑？

【在 d*******p 的大作中提到】

: 超过6年延h1b有个必要条件：排期不current,如果你排期current而新140没下来，就不
: 能延了，你算下时间，有这个可能没有

f*u2015-01-28 08:01

27 楼

你说的也对。104(c) 和 106(a) (Public Law 106-313 即 AC21 法案) 分别对应的是
这两条。

【在 r****r 的大作中提到】

: 我怎么考古看到的是即使current了，而新的140还没下来，也可以延1年呢？
: 哪位明白的请来解惑？

A*t2015-01-28 08:01

28 楼

google了一下，在网上找到这么一段话：
Re: Can I port my EB2 priority date - I140 approved and changing employer
First of all, throw the idea of "porting" out the window. It is confusing
you. The law provides that when an I-140 is approved, that priority date
becomes your priority date for all subsequently approved I-140 petitions.
Nothing gets moved. No discretion is involved. Very simply, that date is
your permanent priority date for ALL subsequently approved I-140 petitions
regardless of employer, job, or preference category. The only exception lies
in cases where the original I-140 is revoked by the USCIS (not the employer
) for fraud or mistake.

m*l2015-01-28 08:01

29 楼

就是只要有个已批的i140, 之后都可以port pd了？

google了一下，在网上找到这么一段话：Re: Can I port my EB2 priority date -
I140 approved and changing em........

【在 A*******t 的大作中提到】

: google了一下，在网上找到这么一段话：
: Re: Can I port my EB2 priority date - I140 approved and changing employer
: First of all, throw the idea of "porting" out the window. It is confusing
: you. The law provides that when an I-140 is approved, that priority date
: becomes your priority date for all subsequently approved I-140 petitions.
: Nothing gets moved. No discretion is involved. Very simply, that date is
: your permanent priority date for ALL subsequently approved I-140 petitions
: regardless of employer, job, or preference category. The only exception lies
: in cases where the original I-140 is revoked by the USCIS (not the employer
: ) for fraud or mistake.

A*t2015-01-28 08:01

30 楼

Update一下，找了HR，找了大老板，由1年argue到9个月，今天由9个月argue到半年。
。。过程比较折腾，最后打算从了。