没人聊聊CRISPR-CAS9吗？可是大火了很久了 - 未名空间MITBBS历史存档

没人聊聊CRISPR-CAS9吗？可是大火了很久了# Biology - 生物学

a*s2015-03-01 08:03

1 楼

平常就一天到晚龟缩在他的房间里，我一开始用厨房或living room,他就出来凑热闹了
，你要只是和狗狗说个Hi,当然无所谓啦，他还得停下正在做的事情，然后就深情地摸
啊摸啊，我家狗狗可是男狗狗，谁要你那么嗯嗯阿阿地摸了。狗狗在啃骨头玩他自己的
，也要过去骚扰人家地摸。摸完也就罢了，他倒还次次不落赶紧把手洗了。我就说了，
你摸狗狗次数太多了，你不烦，我烦。你倒记着摸完洗手，你摸之前谁知道你是刚吃过
拉过还是在自己身上摸过，你咋就不先洗洗手呢？多次明示暗示之后还是无效。
然后我就一睁眼吃地发了个eamil （roommate 老美）, 大意是：if i were you, i
would first treat him as a person. you do something for his needs, not for
your own pleasure; second i would treat him as LZ's most close company (
friend, son, bf, gf, whatever). whatever you do to him is to LZ. Excessively
too much intimacy just makes people feel uncomfortable.
然后今天他就龟缩在他的房间里，真的再也不出来了。
其实我也不知道我是不是做的有点过分了，请大家评评。

a*i2015-03-01 08:03

2 楼

还有Feng Zhang和doudna的矛盾？不得不说CAS9这玩意儿确实好用，亲身体验啊，感觉
又是个诺奖大热。

j*62015-03-01 08:03

3 楼

OMG.这个不是坑么?你真mean. 狗狗都喜欢attention的.他主动去跟狗玩很难得了. ..

T*G2015-03-01 08:03

4 楼

和大火的cell-based therapy 结合上能上临床效果不错的话，诺奖没得跑。feng
zhang我没见过，karl party时见过几次，对FZ当年工作推崇有加，一个人在不同的地
方能repeat自己的成功，尤其是生物领域，是很不容易的

【在 a*****i 的大作中提到】

: 还有Feng Zhang和doudna的矛盾？不得不说CAS9这玩意儿确实好用，亲身体验啊，感觉
: 又是个诺奖大热。

l*o2015-03-01 08:03

5 楼

我觉得是坑

b*n2015-03-01 08:03

6 楼

Novartis很明显要用CRISPR改进CD19CAR.
我感觉可能会敲掉T细胞本身的HLA和TCR，这样可以给所有病人用一样的产品，不用单
独扩增细胞。不知道这个想法靠谱不。
有前辈能点评一下其他可能的途径吗?

y*o2015-03-01 08:03

7 楼

他应该是真的很喜欢你的狗狗，不然不会老是去摸它啊和它玩什么的，你要真遇到对狗
特别mean的室友，那才叫惨呢

r*g2015-03-01 08:03

8 楼

真是牛人，从来没想过这个问题
你说的完全对！体外扩增CD8 细胞是可以实现的～所以，这个办法可靠~ 不知道敲掉
HLA难度有多大了

【在 b*****n 的大作中提到】

: Novartis很明显要用CRISPR改进CD19CAR.
: 我感觉可能会敲掉T细胞本身的HLA和TCR，这样可以给所有病人用一样的产品，不用单
: 独扩增细胞。不知道这个想法靠谱不。
: 有前辈能点评一下其他可能的途径吗?

Y*Y2015-03-01 08:03

9 楼

如果你真的希望你roommate treats your dog like the way he should treat you,看
过这封信之后，估计你roommate会不时踢你得狗两脚

K*42015-03-01 08:03

10 楼

平心而论，Crispr的最初几次突破，包括98年，02年，05，06年的工作奠定了分子基
础，而zhang feng进入这个领域实在太晚了。

【在 a*****i 的大作中提到】

: 还有Feng Zhang和doudna的矛盾？不得不说CAS9这玩意儿确实好用，亲身体验啊，感觉
: 又是个诺奖大热。

D*t2015-03-01 08:03

11 楼

难不成你更愿意室友讨厌你的狗狗？

z*t2015-03-01 08:03

12 楼

不是做免疫的，这么做的风险性如何？

【在 b*****n 的大作中提到】

: Novartis很明显要用CRISPR改进CD19CAR.
: 我感觉可能会敲掉T细胞本身的HLA和TCR，这样可以给所有病人用一样的产品，不用单
: 独扩增细胞。不知道这个想法靠谱不。
: 有前辈能点评一下其他可能的途径吗?

T*k2015-03-01 08:03

13 楼

人家喜欢你的狗狗才老摸的吧。你很过分。

w*r2015-03-01 08:03

14 楼

Reversible epigenetic down-regulation of MHC molecules by devil facial
tumour disease illustrates immune escape by a contagious cancer.
防止癌化?

【在 z*t 的大作中提到】

: 不是做免疫的，这么做的风险性如何？

a*s2015-03-01 08:03

15 楼

hehe, 不是坑，真事。我想可能是我仍然对他以前的一些事情耿耿于怀所致，唉，道歉
吧

z*t2015-03-01 08:03

16 楼

嗯，而且我觉得你TCR要没了，怎么调节这些进入体内非自体的t细胞呢？要是t细胞短
期起作用倒还好关键是你这细胞要长期在体内存在？

【在 w***r 的大作中提到】

: Reversible epigenetic down-regulation of MHC molecules by devil facial
: tumour disease illustrates immune escape by a contagious cancer.
: 防止癌化?

I*e2015-03-01 08:03

17 楼

你是做的很过分.

Excessively

【在 a**s 的大作中提到】

: 平常就一天到晚龟缩在他的房间里，我一开始用厨房或living room,他就出来凑热闹了
: ，你要只是和狗狗说个Hi,当然无所谓啦，他还得停下正在做的事情，然后就深情地摸
: 啊摸啊，我家狗狗可是男狗狗，谁要你那么嗯嗯阿阿地摸了。狗狗在啃骨头玩他自己的
: ，也要过去骚扰人家地摸。摸完也就罢了，他倒还次次不落赶紧把手洗了。我就说了，
: 你摸狗狗次数太多了，你不烦，我烦。你倒记着摸完洗手，你摸之前谁知道你是刚吃过
: 拉过还是在自己身上摸过，你咋就不先洗洗手呢？多次明示暗示之后还是无效。
: 然后我就一睁眼吃地发了个eamil （roommate 老美）, 大意是：if i were you, i
: would first treat him as a person. you do something for his needs, not for
: your own pleasure; second i would treat him as LZ's most close company (
: friend, son, bf, gf, whatever). whatever you do to him is to LZ. Excessively

b*n2015-03-01 08:03

18 楼

CD19CAR 体外扩增以后在体内主要是靠B细胞激活的
肿瘤杀完自然就降低留了记忆性的细胞在体内所以可以长期控制复发
当然加一个suicide gene会更保险

【在 z*t 的大作中提到】

: 嗯，而且我觉得你TCR要没了，怎么调节这些进入体内非自体的t细胞呢？要是t细胞短
: 期起作用倒还好关键是你这细胞要长期在体内存在？

y*i2015-03-01 08:03

19 楼

他喜欢你的狗有什么错啦？
这样写信给人家太 mean了

z*t2015-03-01 08:03

20 楼

不过TCR没有了残留下来的T cell activation 是不是就不好使了？
但是用Crispr screening来找增强肿瘤免疫的分子倒是可以，记得之前nature上有一篇
类似的in vivo screen的paper

【在 b*****n 的大作中提到】

:
: CD19CAR 体外扩增以后在体内主要是靠B细胞激活的
: 肿瘤杀完自然就降低留了记忆性的细胞在体内所以可以长期控制复发
: 当然加一个suicide gene会更保险

c*t2015-03-01 08:03

21 楼

哈哈，你只是对他个人有意见

b*n2015-03-01 08:03

22 楼

另一个方案可以敲掉checkpoint比如PD1,这样可以特定的增强CD19CAR的杀伤能力。
对，那篇文章针对的是实体瘤,敲掉这些基因应该会很有帮助。不过对于血液瘤，
CD19CAR已经可以体内扩增，而且现在80%以上的患者都有反应，存活率也很高。我个人
感觉现在诺华的问题主要是怎么降低成本，实现量产的问题。

【在 z*t 的大作中提到】

: 不过TCR没有了残留下来的T cell activation 是不是就不好使了？
: 但是用Crispr screening来找增强肿瘤免疫的分子倒是可以，记得之前nature上有一篇
: 类似的in vivo screen的paper

o*d2015-03-01 08:03

23 楼

你真变态

Excessively

【在 a**s 的大作中提到】

: 平常就一天到晚龟缩在他的房间里，我一开始用厨房或living room,他就出来凑热闹了
: ，你要只是和狗狗说个Hi,当然无所谓啦，他还得停下正在做的事情，然后就深情地摸
: 啊摸啊，我家狗狗可是男狗狗，谁要你那么嗯嗯阿阿地摸了。狗狗在啃骨头玩他自己的
: ，也要过去骚扰人家地摸。摸完也就罢了，他倒还次次不落赶紧把手洗了。我就说了，
: 你摸狗狗次数太多了，你不烦，我烦。你倒记着摸完洗手，你摸之前谁知道你是刚吃过
: 拉过还是在自己身上摸过，你咋就不先洗洗手呢？多次明示暗示之后还是无效。
: 然后我就一睁眼吃地发了个eamil （roommate 老美）, 大意是：if i were you, i
: would first treat him as a person. you do something for his needs, not for
: your own pleasure; second i would treat him as LZ's most close company (
: friend, son, bf, gf, whatever). whatever you do to him is to LZ. Excessively

x*32015-03-01 08:03

24 楼

学习ing

l*y2015-03-01 08:03

25 楼

这样是很mean. 你还是道个谦吧。

a*i2015-03-01 08:03

26 楼

好多大牛啊！本人做工程的，用yeast。自从用了这个以后，真是啥都能干啊，缺失，
整合，定点诱变，以前那些经典方法全都不用了。而且最牛X的是，这玩意效率太高啊
，缺失整合诱变啥的基本都是接近100%positive rate……我这生物做了这么多年，唯
一见过的最没水分实打实的研究成果就是这个了……

w*12015-03-01 08:03

27 楼

我还以为是老摸你鸡鸡呢，仔细一看是狗狗，摸了就摸了吧。

Excessively

【在 a**s 的大作中提到】

: 平常就一天到晚龟缩在他的房间里，我一开始用厨房或living room,他就出来凑热闹了
: ，你要只是和狗狗说个Hi,当然无所谓啦，他还得停下正在做的事情，然后就深情地摸
: 啊摸啊，我家狗狗可是男狗狗，谁要你那么嗯嗯阿阿地摸了。狗狗在啃骨头玩他自己的
: ，也要过去骚扰人家地摸。摸完也就罢了，他倒还次次不落赶紧把手洗了。我就说了，
: 你摸狗狗次数太多了，你不烦，我烦。你倒记着摸完洗手，你摸之前谁知道你是刚吃过
: 拉过还是在自己身上摸过，你咋就不先洗洗手呢？多次明示暗示之后还是无效。
: 然后我就一睁眼吃地发了个eamil （roommate 老美）, 大意是：if i were you, i
: would first treat him as a person. you do something for his needs, not for
: your own pleasure; second i would treat him as LZ's most close company (
: friend, son, bf, gf, whatever). whatever you do to him is to LZ. Excessively

w*r2015-03-01 08:03

28 楼

你是在yeast里用crispr？

【在 a*****i 的大作中提到】

: 好多大牛啊！本人做工程的，用yeast。自从用了这个以后，真是啥都能干啊，缺失，
: 整合，定点诱变，以前那些经典方法全都不用了。而且最牛X的是，这玩意效率太高啊
: ，缺失整合诱变啥的基本都是接近100%positive rate……我这生物做了这么多年，唯
: 一见过的最没水分实打实的研究成果就是这个了……

n*w2015-03-01 08:03

29 楼

我以为摸你的鸡鸡。。。

a*i2015-03-01 08:03

30 楼

嗯是的。我们实验室在这块算是走在前面的了。算是赌对了。

【在 w***r 的大作中提到】

: 你是在yeast里用crispr？

a*s2015-03-01 08:03

31 楼

奇了怪了，同胞口口声声都是我太mean，今天跟两老美朋友说了，人家都支持我，不支
持他们的同胞。另外告诉你们吧，roommate 也没咋样，和好如初。

w*r2015-03-01 08:03

32 楼

用yeast 能做啥工程，应用方向？

【在 a*****i 的大作中提到】

: 嗯是的。我们实验室在这块算是走在前面的了。算是赌对了。

D*t2015-03-01 08:03

33 楼

那就去找你的老美同胞吧，别在这现眼了。

支持他们的同胞。另外告诉你们吧，roommate 也没咋样，和好如初。

【在 a**s 的大作中提到】

: 奇了怪了，同胞口口声声都是我太mean，今天跟两老美朋友说了，人家都支持我，不支
: 持他们的同胞。另外告诉你们吧，roommate 也没咋样，和好如初。

a*i2015-03-01 08:03

34 楼

对的

【在 w***r 的大作中提到】

: 用yeast 能做啥工程，应用方向？

S*t2015-03-01 08:03

35 楼

老美从来不当面说人不对，就是客气,别当真

【在 a**s 的大作中提到】

: 奇了怪了，同胞口口声声都是我太mean，今天跟两老美朋友说了，人家都支持我，不支
: 持他们的同胞。另外告诉你们吧，roommate 也没咋样，和好如初。

b*r2015-03-01 08:03

36 楼

敲掉MHC I的话会被自体的其他细胞识别认为是异体细胞攻击吧。同种异体移植的排斥
反应我记得就是基于这个。
这个思路这么直接怎么可能没人想过试过

【在 b*****n 的大作中提到】

: Novartis很明显要用CRISPR改进CD19CAR.
: 我感觉可能会敲掉T细胞本身的HLA和TCR，这样可以给所有病人用一样的产品，不用单
: 独扩增细胞。不知道这个想法靠谱不。
: 有前辈能点评一下其他可能的途径吗?

P*22015-03-01 08:03

37 楼

反正要是别人喜欢我的狗，喜欢摸，我是很高兴的。我认识的别的养狗人也都这样。
绝大部分狗狗都是喜欢attention喜欢被pet的。如果你的狗enjoy，你干嘛这么不高兴。
感觉你那两老美朋友要不就是很个例，要么就是口上支持你而已。

【在 a**s 的大作中提到】

: 奇了怪了，同胞口口声声都是我太mean，今天跟两老美朋友说了，人家都支持我，不支
: 持他们的同胞。另外告诉你们吧，roommate 也没咋样，和好如初。

n*e2015-03-01 08:03

38 楼

敲掉pd1,ctla4是比较现实的选择。
对于实体瘤，关键还是抗原怎么选。

【在 b*****n 的大作中提到】

: Novartis很明显要用CRISPR改进CD19CAR.
: 我感觉可能会敲掉T细胞本身的HLA和TCR，这样可以给所有病人用一样的产品，不用单
: 独扩增细胞。不知道这个想法靠谱不。
: 有前辈能点评一下其他可能的途径吗?

y*u2015-03-01 08:03

39 楼

跳一个

m*a2015-03-01 08:03

40 楼

感觉Feng Zhang就是个做技术的工匠，不管是开始的optogenetics，还是后来的TALEN
，最近的CRISPR，他都是在改进和实现技术。即使拿不了诺贝尔，他还是做出了非常大
的贡献的。

D*t2015-03-01 08:03

41 楼

奇了怪了，您要是跟老中当面说，老中们也会附和一下，免得让您下不来台，心里怎么
想的可就不知道了吧？不信您把帖子发到美国同胞的宠物论坛上，看看人家挤兑不挤兑
您？
Too simple, Too naive.

【在 a**s 的大作中提到】

: 奇了怪了，同胞口口声声都是我太mean，今天跟两老美朋友说了，人家都支持我，不支
: 持他们的同胞。另外告诉你们吧，roommate 也没咋样，和好如初。

c*e2015-03-01 08:03

42 楼

精确敲掉primary T cells不容易的吧。

【在 n**e 的大作中提到】

: 敲掉pd1,ctla4是比较现实的选择。
: 对于实体瘤，关键还是抗原怎么选。

c*e2015-03-01 08:03

43 楼

奇了怪了，同胞们这么多人都意见一致，你不听．俩老美说了就当圣旨了？
神马人哦

【在 a**s 的大作中提到】

: 奇了怪了，同胞口口声声都是我太mean，今天跟两老美朋友说了，人家都支持我，不支
: 持他们的同胞。另外告诉你们吧，roommate 也没咋样，和好如初。

a*i2015-03-01 08:03

44 楼

还有Feng Zhang和doudna的矛盾？不得不说CAS9这玩意儿确实好用，亲身体验啊，感觉
又是个诺奖大热。

Y*Y2015-03-01 08:03

45 楼

浮云，都是浮云

【在 c*******e 的大作中提到】

: 奇了怪了，同胞们这么多人都意见一致，你不听．俩老美说了就当圣旨了？
: 神马人哦

T*G2015-03-01 08:03

46 楼

和大火的cell-based therapy 结合上能上临床效果不错的话，诺奖没得跑。feng
zhang我没见过，karl party时见过几次，对FZ当年工作推崇有加，一个人在不同的地
方能repeat自己的成功，尤其是生物领域，是很不容易的

【在 a*****i 的大作中提到】

: 还有Feng Zhang和doudna的矛盾？不得不说CAS9这玩意儿确实好用，亲身体验啊，感觉
: 又是个诺奖大热。

g*72015-03-01 08:03

47 楼

明显是坑，鉴定完毕

b*n2015-03-01 08:03

48 楼

Novartis很明显要用CRISPR改进CD19CAR.
我感觉可能会敲掉T细胞本身的HLA和TCR，这样可以给所有病人用一样的产品，不用单
独扩增细胞。不知道这个想法靠谱不。
有前辈能点评一下其他可能的途径吗?

r*g2015-03-01 08:03

49 楼

真是牛人，从来没想过这个问题
你说的完全对！体外扩增CD8 细胞是可以实现的～所以，这个办法可靠~ 不知道敲掉
HLA难度有多大了

【在 b*****n 的大作中提到】

: Novartis很明显要用CRISPR改进CD19CAR.
: 我感觉可能会敲掉T细胞本身的HLA和TCR，这样可以给所有病人用一样的产品，不用单
: 独扩增细胞。不知道这个想法靠谱不。
: 有前辈能点评一下其他可能的途径吗?

K*42015-03-01 08:03

50 楼

平心而论，Crispr的最初几次突破，包括98年，02年，05，06年的工作奠定了分子基
础，而zhang feng进入这个领域实在太晚了。

【在 a*****i 的大作中提到】

: 还有Feng Zhang和doudna的矛盾？不得不说CAS9这玩意儿确实好用，亲身体验啊，感觉
: 又是个诺奖大热。

z*t2015-03-01 08:03

51 楼

不是做免疫的，这么做的风险性如何？

【在 b*****n 的大作中提到】

: Novartis很明显要用CRISPR改进CD19CAR.
: 我感觉可能会敲掉T细胞本身的HLA和TCR，这样可以给所有病人用一样的产品，不用单
: 独扩增细胞。不知道这个想法靠谱不。
: 有前辈能点评一下其他可能的途径吗?

w*r2015-03-01 08:03

52 楼

Reversible epigenetic down-regulation of MHC molecules by devil facial
tumour disease illustrates immune escape by a contagious cancer.
防止癌化?

【在 z*t 的大作中提到】

: 不是做免疫的，这么做的风险性如何？

z*t2015-03-01 08:03

53 楼

嗯，而且我觉得你TCR要没了，怎么调节这些进入体内非自体的t细胞呢？要是t细胞短
期起作用倒还好关键是你这细胞要长期在体内存在？

【在 w***r 的大作中提到】

: Reversible epigenetic down-regulation of MHC molecules by devil facial
: tumour disease illustrates immune escape by a contagious cancer.
: 防止癌化?

b*n2015-03-01 08:03

54 楼

CD19CAR 体外扩增以后在体内主要是靠B细胞激活的
肿瘤杀完自然就降低留了记忆性的细胞在体内所以可以长期控制复发
当然加一个suicide gene会更保险

【在 z*t 的大作中提到】

: 嗯，而且我觉得你TCR要没了，怎么调节这些进入体内非自体的t细胞呢？要是t细胞短
: 期起作用倒还好关键是你这细胞要长期在体内存在？

z*t2015-03-01 08:03

55 楼

不过TCR没有了残留下来的T cell activation 是不是就不好使了？
但是用Crispr screening来找增强肿瘤免疫的分子倒是可以，记得之前nature上有一篇
类似的in vivo screen的paper

【在 b*****n 的大作中提到】

:
: CD19CAR 体外扩增以后在体内主要是靠B细胞激活的
: 肿瘤杀完自然就降低留了记忆性的细胞在体内所以可以长期控制复发
: 当然加一个suicide gene会更保险

b*n2015-03-01 08:03

56 楼

另一个方案可以敲掉checkpoint比如PD1,这样可以特定的增强CD19CAR的杀伤能力。
对，那篇文章针对的是实体瘤,敲掉这些基因应该会很有帮助。不过对于血液瘤，
CD19CAR已经可以体内扩增，而且现在80%以上的患者都有反应，存活率也很高。我个人
感觉现在诺华的问题主要是怎么降低成本，实现量产的问题。

【在 z*t 的大作中提到】

: 不过TCR没有了残留下来的T cell activation 是不是就不好使了？
: 但是用Crispr screening来找增强肿瘤免疫的分子倒是可以，记得之前nature上有一篇
: 类似的in vivo screen的paper

x*32015-03-01 08:03

57 楼

学习ing

a*i2015-03-01 08:03

58 楼

好多大牛啊！本人做工程的，用yeast。自从用了这个以后，真是啥都能干啊，缺失，
整合，定点诱变，以前那些经典方法全都不用了。而且最牛X的是，这玩意效率太高啊
，缺失整合诱变啥的基本都是接近100%positive rate……我这生物做了这么多年，唯
一见过的最没水分实打实的研究成果就是这个了……

w*r2015-03-01 08:03

59 楼

你是在yeast里用crispr？

【在 a*****i 的大作中提到】

: 好多大牛啊！本人做工程的，用yeast。自从用了这个以后，真是啥都能干啊，缺失，
: 整合，定点诱变，以前那些经典方法全都不用了。而且最牛X的是，这玩意效率太高啊
: ，缺失整合诱变啥的基本都是接近100%positive rate……我这生物做了这么多年，唯
: 一见过的最没水分实打实的研究成果就是这个了……

a*i2015-03-01 08:03

60 楼

嗯是的。我们实验室在这块算是走在前面的了。算是赌对了。

【在 w***r 的大作中提到】

: 你是在yeast里用crispr？

w*r2015-03-01 08:03

61 楼

用yeast 能做啥工程，应用方向？

【在 a*****i 的大作中提到】

: 嗯是的。我们实验室在这块算是走在前面的了。算是赌对了。

a*i2015-03-01 08:03

62 楼

对的

【在 w***r 的大作中提到】

: 用yeast 能做啥工程，应用方向？

b*r2015-03-01 08:03

63 楼

敲掉MHC I的话会被自体的其他细胞识别认为是异体细胞攻击吧。同种异体移植的排斥
反应我记得就是基于这个。
这个思路这么直接怎么可能没人想过试过

【在 b*****n 的大作中提到】

: Novartis很明显要用CRISPR改进CD19CAR.
: 我感觉可能会敲掉T细胞本身的HLA和TCR，这样可以给所有病人用一样的产品，不用单
: 独扩增细胞。不知道这个想法靠谱不。
: 有前辈能点评一下其他可能的途径吗?

n*e2015-03-01 08:03

64 楼

敲掉pd1,ctla4是比较现实的选择。
对于实体瘤，关键还是抗原怎么选。

【在 b*****n 的大作中提到】

: Novartis很明显要用CRISPR改进CD19CAR.
: 我感觉可能会敲掉T细胞本身的HLA和TCR，这样可以给所有病人用一样的产品，不用单
: 独扩增细胞。不知道这个想法靠谱不。
: 有前辈能点评一下其他可能的途径吗?

m*a2015-03-01 08:03

65 楼

感觉Feng Zhang就是个做技术的工匠，不管是开始的optogenetics，还是后来的TALEN
，最近的CRISPR，他都是在改进和实现技术。即使拿不了诺贝尔，他还是做出了非常大
的贡献的。

c*e2015-03-01 08:03

66 楼

精确敲掉primary T cells不容易的吧。

【在 n**e 的大作中提到】

: 敲掉pd1,ctla4是比较现实的选择。
: 对于实体瘤，关键还是抗原怎么选。

j*n2015-03-01 08:03

67 楼

赞同做yeast 偏应用
比如一把敲掉10个基因
一把整合100个copy到基因组上
随机ko库转录激活库等
虽然idea不新可以做的或者用到的地方还真不少

★ 发自iPhone App: ChineseWeb 8.7

【在 a*****i 的大作中提到】

: 好多大牛啊！本人做工程的，用yeast。自从用了这个以后，真是啥都能干啊，缺失，
: 整合，定点诱变，以前那些经典方法全都不用了。而且最牛X的是，这玩意效率太高啊
: ，缺失整合诱变啥的基本都是接近100%positive rate……我这生物做了这么多年，唯
: 一见过的最没水分实打实的研究成果就是这个了……

n*e2015-03-01 08:03

68 楼

可以先分离细胞再敲吧。

【在 c********e 的大作中提到】

:
: 精确敲掉primary T cells不容易的吧。

w*d2015-03-01 08:03

69 楼

我怎么没有你们那么幸运？用在人的THP1上，成功率很低呀? GFP sorting 后得到的细
胞，提出DNA后测序，几乎没有阳性的。
各位可以给些指导吗？
我用的是Sigma的系统。
多谢了！