s*8
2 楼
研究了半天stranded RNA-seq protocol,彻底晕掉了~~
illumina的kit是在second strand cDNA中引入dUTP,然后amplify library的时候这条
链不扩增.
NEBnext的protocol是用USer 酶把这条链degrade,然后再扩增
这俩有什么区别??
我准备用KAPA的kit,因为这个kit不带adapter,需要自己买adaptor,本来想订NEB的
adapter的,但是NEB的protocol又不一样...彻底糊涂了,哪位大侠指教下?不胜感激!
illumina的kit是在second strand cDNA中引入dUTP,然后amplify library的时候这条
链不扩增.
NEBnext的protocol是用USer 酶把这条链degrade,然后再扩增
这俩有什么区别??
我准备用KAPA的kit,因为这个kit不带adapter,需要自己买adaptor,本来想订NEB的
adapter的,但是NEB的protocol又不一样...彻底糊涂了,哪位大侠指教下?不胜感激!
f*c
3 楼
前段时间听说北加有限制用水，不知道是不是真的
【在 M****7 的大作中提到】
: 去年鱼基本没钓到,难道今年连菜也没法种了? 不会搞定时定量供应水吧.
【在 M****7 的大作中提到】
: 去年鱼基本没钓到,难道今年连菜也没法种了? 不会搞定时定量供应水吧.
g*6
4 楼
illumina是利用高保真聚合酶不能扩增U实现的。
NEB的更干净一些，直接降解含U的第二链。有专门的文章比较过不同的方法。
KAPA的貌似跟illumina类似。
如果买NEB的adaptor要注意他们卖的是loop adaptor，序列中有一个U，连接完了之后
要用USER把loop打开成Y字形才能扩增。
不如直接买NEB整套kit省心。
NEB的更干净一些，直接降解含U的第二链。有专门的文章比较过不同的方法。
KAPA的貌似跟illumina类似。
如果买NEB的adaptor要注意他们卖的是loop adaptor，序列中有一个U，连接完了之后
要用USER把loop打开成Y字形才能扩增。
不如直接买NEB整套kit省心。
y*2
5 楼
真的是500年一遇吗？这也太可怕了，没有足够的用水，生活质量肯定受很大影响。有
一年我们这也是大夏天干旱少雨，我们的生活用水就来自Town里的几个大湖，因为要保
证消防用水和饮用水，所以Town里规定限时浇草坪，而且把夏天那几个月的水费调得巨
高，这样一来，家家草坪那年都是黄巴巴干秃秃的了。所以要是看见哪家草坪绿草如茵
，我们就说这家肯定豪。
【在 M****7 的大作中提到】
: 去年鱼基本没钓到,难道今年连菜也没法种了? 不会搞定时定量供应水吧.
一年我们这也是大夏天干旱少雨，我们的生活用水就来自Town里的几个大湖，因为要保
证消防用水和饮用水，所以Town里规定限时浇草坪，而且把夏天那几个月的水费调得巨
高，这样一来，家家草坪那年都是黄巴巴干秃秃的了。所以要是看见哪家草坪绿草如茵
，我们就说这家肯定豪。
【在 M****7 的大作中提到】
: 去年鱼基本没钓到,难道今年连菜也没法种了? 不会搞定时定量供应水吧.
s*8
6 楼
谢谢楼上的详细回复！我也觉得NEB的kits看起来不错，准备转投他家了。
f*c
7 楼
真限水了，就来投奔你哈
【在 y****2 的大作中提到】
: 真的是500年一遇吗？这也太可怕了，没有足够的用水，生活质量肯定受很大影响。有
: 一年我们这也是大夏天干旱少雨，我们的生活用水就来自Town里的几个大湖，因为要保
: 证消防用水和饮用水，所以Town里规定限时浇草坪，而且把夏天那几个月的水费调得巨
: 高，这样一来，家家草坪那年都是黄巴巴干秃秃的了。所以要是看见哪家草坪绿草如茵
: ，我们就说这家肯定豪。
【在 y****2 的大作中提到】
: 真的是500年一遇吗？这也太可怕了，没有足够的用水，生活质量肯定受很大影响。有
: 一年我们这也是大夏天干旱少雨，我们的生活用水就来自Town里的几个大湖，因为要保
: 证消防用水和饮用水，所以Town里规定限时浇草坪，而且把夏天那几个月的水费调得巨
: 高，这样一来，家家草坪那年都是黄巴巴干秃秃的了。所以要是看见哪家草坪绿草如茵
: ，我们就说这家肯定豪。
c*a
8 楼
美国的历史还不到300年，怎会是500年一遇？
【在 M****7 的大作中提到】
: 去年鱼基本没钓到,难道今年连菜也没法种了? 不会搞定时定量供应水吧.
【在 M****7 的大作中提到】
: 去年鱼基本没钓到,难道今年连菜也没法种了? 不会搞定时定量供应水吧.
k*s
9 楼
我们前年大旱限水,菜没法浇,草都死了..
T*m
10 楼
踏雪寻梅好！
真的这么旱呢！估计今年的农副产品价格又要上涨了。
真的这么旱呢！估计今年的农副产品价格又要上涨了。
R*m
11 楼
时幼，有夏，大旱而泽尽竭。喜可渔，竟无忧。冬至，无米可炊，人猪同食。
【在 M****7 的大作中提到】
: 去年鱼基本没钓到,难道今年连菜也没法种了? 不会搞定时定量供应水吧.
【在 M****7 的大作中提到】
: 去年鱼基本没钓到,难道今年连菜也没法种了? 不会搞定时定量供应水吧.
y*2
12 楼
来吧，美眉，不过如果真的旱成那样，那加州农民可怎么活呀，今天正好看见一篇文章
＂California drying-----the state is experiencing its driest year on record
and it could get worse",所以这已经是历史记录了，文章里有幅图显示 ＂san Jose
's almaden reservoir is at less than 3% of capacity＂水库底下干裂的黑色泥土
到处都是，太可怕。
为加州祈雨。
【在 f*****c 的大作中提到】
: 真限水了，就来投奔你哈
＂California drying-----the state is experiencing its driest year on record
and it could get worse",所以这已经是历史记录了，文章里有幅图显示 ＂san Jose
's almaden reservoir is at less than 3% of capacity＂水库底下干裂的黑色泥土
到处都是，太可怕。
为加州祈雨。
【在 f*****c 的大作中提到】
: 真限水了，就来投奔你哈
g*r
13 楼
旱在北加，南加木事
【在 M****7 的大作中提到】
: 去年鱼基本没钓到,难道今年连菜也没法种了? 不会搞定时定量供应水吧.
【在 M****7 的大作中提到】
: 去年鱼基本没钓到,难道今年连菜也没法种了? 不会搞定时定量供应水吧.
g*r
14 楼
应该是真的， 幸好你在南加
【在 f*****c 的大作中提到】
: 前段时间听说北加有限制用水，不知道是不是真的
【在 f*****c 的大作中提到】
: 前段时间听说北加有限制用水，不知道是不是真的
g*e
15 楼
有印象南加的水三分之二来自北加，奇怪为啥没影响。可能科罗拉多河水今年充裕，可
以多供给南加。
【在 g****r 的大作中提到】
: 旱在北加，南加木事
以多供给南加。
【在 g****r 的大作中提到】
: 旱在北加，南加木事
M*7
16 楼
传教士在明代就到加州了, 500年有了.
【在 c******a 的大作中提到】
: 美国的历史还不到300年，怎会是500年一遇？
【在 c******a 的大作中提到】
: 美国的历史还不到300年，怎会是500年一遇？
M*7
17 楼
游大难得铲雪有空啊.
确实很旱. 后院的竹子都干死一半了.趁还没禁止浇院子,现在每天浇竹子.希望它们能
缓过来.
北加某镇已经禁止浇地了.
【在 T*******m 的大作中提到】
: 踏雪寻梅好！
: 真的这么旱呢！估计今年的农副产品价格又要上涨了。
确实很旱. 后院的竹子都干死一半了.趁还没禁止浇院子,现在每天浇竹子.希望它们能
缓过来.
北加某镇已经禁止浇地了.
【在 T*******m 的大作中提到】
: 踏雪寻梅好！
: 真的这么旱呢！估计今年的农副产品价格又要上涨了。
M*7
18 楼
古董兄经过大风大浪,也经过大旱大涝啊.
【在 R*******m 的大作中提到】
: 时幼，有夏，大旱而泽尽竭。喜可渔，竟无忧。冬至，无米可炊，人猪同食。
【在 R*******m 的大作中提到】
: 时幼，有夏，大旱而泽尽竭。喜可渔，竟无忧。冬至，无米可炊，人猪同食。
M*7
19 楼
祈雨还不如把你们那的大雪送过来.
record
Jose
【在 y****2 的大作中提到】
: 来吧，美眉，不过如果真的旱成那样，那加州农民可怎么活呀，今天正好看见一篇文章
: ＂California drying-----the state is experiencing its driest year on record
: and it could get worse",所以这已经是历史记录了，文章里有幅图显示 ＂san Jose
: 's almaden reservoir is at less than 3% of capacity＂水库底下干裂的黑色泥土
: 到处都是，太可怕。
: 为加州祈雨。
record
Jose
【在 y****2 的大作中提到】
: 来吧，美眉，不过如果真的旱成那样，那加州农民可怎么活呀，今天正好看见一篇文章
: ＂California drying-----the state is experiencing its driest year on record
: and it could get worse",所以这已经是历史记录了，文章里有幅图显示 ＂san Jose
: 's almaden reservoir is at less than 3% of capacity＂水库底下干裂的黑色泥土
: 到处都是，太可怕。
: 为加州祈雨。
f*c
20 楼
啊，还想着来砍竹子呢，这下可好，没有了
【在 M****7 的大作中提到】
: 游大难得铲雪有空啊.
: 确实很旱. 后院的竹子都干死一半了.趁还没禁止浇院子,现在每天浇竹子.希望它们能
: 缓过来.
: 北加某镇已经禁止浇地了.
【在 M****7 的大作中提到】
: 游大难得铲雪有空啊.
: 确实很旱. 后院的竹子都干死一半了.趁还没禁止浇院子,现在每天浇竹子.希望它们能
: 缓过来.
: 北加某镇已经禁止浇地了.
M*7
21 楼
刚刚, 影响还是有的吧. 浇树更频繁了吧.
【在 g***e 的大作中提到】
: 有印象南加的水三分之二来自北加，奇怪为啥没影响。可能科罗拉多河水今年充裕，可
: 以多供给南加。
【在 g***e 的大作中提到】
: 有印象南加的水三分之二来自北加，奇怪为啥没影响。可能科罗拉多河水今年充裕，可
: 以多供给南加。
M*7
22 楼
美女在哪个州?
【在 k****s 的大作中提到】
: 我们前年大旱限水,菜没法浇,草都死了..
【在 k****s 的大作中提到】
: 我们前年大旱限水,菜没法浇,草都死了..
M*7
23 楼
希望南加不要搞限量供水.
【在 g****r 的大作中提到】
: 旱在北加，南加木事
【在 g****r 的大作中提到】
: 旱在北加，南加木事
g*e
24 楼
最近下了几场雨，能偷会儿懒了。
【在 M****7 的大作中提到】
: 刚刚, 影响还是有的吧. 浇树更频繁了吧.
【在 M****7 的大作中提到】
: 刚刚, 影响还是有的吧. 浇树更频繁了吧.
g*r
25 楼
南加因为长期缺水，所以不断地在花我们的水费营造储水的水库。现在南加水库的储水
量即使不用北加delta来的和科罗拉多河里的水注入都足够用倒2016年。据说州政府正
在考虑让南加让水给北加救急
【在 g***e 的大作中提到】
: 有印象南加的水三分之二来自北加，奇怪为啥没影响。可能科罗拉多河水今年充裕，可
: 以多供给南加。
量即使不用北加delta来的和科罗拉多河里的水注入都足够用倒2016年。据说州政府正
在考虑让南加让水给北加救急
【在 g***e 的大作中提到】
: 有印象南加的水三分之二来自北加，奇怪为啥没影响。可能科罗拉多河水今年充裕，可
: 以多供给南加。
g*r
26 楼
为支援北加， 到夏天我猜会被限水
【在 M****7 的大作中提到】
: 希望南加不要搞限量供水.
【在 M****7 的大作中提到】
: 希望南加不要搞限量供水.
l*d
27 楼
哎，担忧山农和老四家的果树！
T*m
28 楼
老古董还能用文言文写文章，牛！
【在 R*******m 的大作中提到】
: 时幼，有夏，大旱而泽尽竭。喜可渔，竟无忧。冬至，无米可炊，人猪同食。
【在 R*******m 的大作中提到】
: 时幼，有夏，大旱而泽尽竭。喜可渔，竟无忧。冬至，无米可炊，人猪同食。
T*m
29 楼
时老，有冬，大雪而泽尽冻。无可渔，忧甚。春至，无米可炊，人猪同食空心菜。
能缓过来.: 北加某镇已经禁止浇地了.
【在 M****7 的大作中提到】
: 游大难得铲雪有空啊.
: 确实很旱. 后院的竹子都干死一半了.趁还没禁止浇院子,现在每天浇竹子.希望它们能
: 缓过来.
: 北加某镇已经禁止浇地了.
能缓过来.: 北加某镇已经禁止浇地了.
【在 M****7 的大作中提到】
: 游大难得铲雪有空啊.
: 确实很旱. 后院的竹子都干死一半了.趁还没禁止浇院子,现在每天浇竹子.希望它们能
: 缓过来.
: 北加某镇已经禁止浇地了.
f*c
30 楼
空心菜今年要火，你漏看游子的贴了
【在 T*******m 的大作中提到】
: 时老，有冬，大雪而泽尽冻。无可渔，忧甚。春至，无米可炊，人猪同食空心菜。
:
: 能缓过来.: 北加某镇已经禁止浇地了.
【在 T*******m 的大作中提到】
: 时老，有冬，大雪而泽尽冻。无可渔，忧甚。春至，无米可炊，人猪同食空心菜。
:
: 能缓过来.: 北加某镇已经禁止浇地了.
T*m
31 楼
空心菜一直很火的啊，哈哈。
【在 f*****c 的大作中提到】
: 空心菜今年要火，你漏看游子的贴了
【在 f*****c 的大作中提到】
: 空心菜今年要火，你漏看游子的贴了
l*6
32 楼
南加一样干旱无雨。
往年雨季翠绿的山坡都是黄乎乎的。
官方报道说是160年来最干的雨季。
不是500年。
【在 g****r 的大作中提到】
: 旱在北加，南加木事
往年雨季翠绿的山坡都是黄乎乎的。
官方报道说是160年来最干的雨季。
不是500年。
【在 g****r 的大作中提到】
: 旱在北加，南加木事
y*2
33 楼
老古董真有才，你还记得我预定的10集系列散文吗？老古董是不是忘了？
【在 R*******m 的大作中提到】
: 时幼，有夏，大旱而泽尽竭。喜可渔，竟无忧。冬至，无米可炊，人猪同食。
【在 R*******m 的大作中提到】
: 时幼，有夏，大旱而泽尽竭。喜可渔，竟无忧。冬至，无米可炊，人猪同食。
s*e
34 楼
吗你，南加还不是因为洛基山脉充沛的雪水给通过科罗拉多河给引到内华达/南加来了
。当然，苦了下游墨西哥。
【在 g****r 的大作中提到】
: 旱在北加，南加木事
。当然，苦了下游墨西哥。
【在 g****r 的大作中提到】
: 旱在北加，南加木事
R*m
35 楼
哈哈!
【在 T*******m 的大作中提到】
: 时老，有冬，大雪而泽尽冻。无可渔，忧甚。春至，无米可炊，人猪同食空心菜。
:
: 能缓过来.: 北加某镇已经禁止浇地了.
【在 T*******m 的大作中提到】
: 时老，有冬，大雪而泽尽冻。无可渔，忧甚。春至，无米可炊，人猪同食空心菜。
:
: 能缓过来.: 北加某镇已经禁止浇地了.
G*a
36 楼
古董哥，记得看大美女奔啊。
【在 R*******m 的大作中提到】
: 哈哈!
【在 R*******m 的大作中提到】
: 哈哈!
R*m
37 楼
我居然答应过蓝妹妹10集系列? 早就忘记了,不好意思啊.
最近浙江版有一好友归来,特写杂记 (1),算第一集吧. 请蓝妹妹等前去捧场.杂纪的(2)
,下周发花版,请轻拍.
=============================
[BSSD] 湾区回来：杂纪(1)
http://www.mitbbs.com/article_t/Zhejiang/31523357.html
【在 y****2 的大作中提到】
: 老古董真有才，你还记得我预定的10集系列散文吗？老古董是不是忘了？
最近浙江版有一好友归来,特写杂记 (1),算第一集吧. 请蓝妹妹等前去捧场.杂纪的(2)
,下周发花版,请轻拍.
=============================
[BSSD] 湾区回来：杂纪(1)
http://www.mitbbs.com/article_t/Zhejiang/31523357.html
【在 y****2 的大作中提到】
: 老古董真有才，你还记得我预定的10集系列散文吗？老古董是不是忘了？
s*e
38 楼
比原文還有味道：）
【在 T*******m 的大作中提到】
: 时老，有冬，大雪而泽尽冻。无可渔，忧甚。春至，无米可炊，人猪同食空心菜。
:
: 能缓过来.: 北加某镇已经禁止浇地了.
【在 T*******m 的大作中提到】
: 时老，有冬，大雪而泽尽冻。无可渔，忧甚。春至，无米可炊，人猪同食空心菜。
:
: 能缓过来.: 北加某镇已经禁止浇地了.
R*m
39 楼
那个美女新奔啊?不是私奔吧? LOL
【在 G********a 的大作中提到】
: 古董哥，记得看大美女奔啊。
【在 G********a 的大作中提到】
: 古董哥，记得看大美女奔啊。
M*7
40 楼
您这空心菜转基因的吧,这么抗冻.
【在 T*******m 的大作中提到】
: 时老，有冬，大雪而泽尽冻。无可渔，忧甚。春至，无米可炊，人猪同食空心菜。
:
: 能缓过来.: 北加某镇已经禁止浇地了.
【在 T*******m 的大作中提到】
: 时老，有冬，大雪而泽尽冻。无可渔，忧甚。春至，无米可炊，人猪同食空心菜。
:
: 能缓过来.: 北加某镇已经禁止浇地了.
s*8
41 楼
最近几天下雨赶脚好一些
m*r
42 楼
那个好像是研究树的年轮得出的结论。
今年确实很干，（南加）。往年雨水比较多的12月和1月，今年都几乎滴雨未下。好在
这几天下了点小雨，但完全不“解渴”。地往下挖3，4寸就像石头那么硬了。
【在 M****7 的大作中提到】
: 传教士在明代就到加州了, 500年有了.
今年确实很干，（南加）。往年雨水比较多的12月和1月，今年都几乎滴雨未下。好在
这几天下了点小雨，但完全不“解渴”。地往下挖3，4寸就像石头那么硬了。
【在 M****7 的大作中提到】
: 传教士在明代就到加州了, 500年有了.
m*y
43 楼
昨天锯了树枝，懒了一下，想着今天再把它们分解扔进垃圾桶，
结果悲剧了，那么久不下雨的，昨晚上下雨了。
早上把湿漉漉的大树枝拖开在院子里晒太阳，不知道傍晚能不能干了。
【在 m********r 的大作中提到】
: 那个好像是研究树的年轮得出的结论。
: 今年确实很干，（南加）。往年雨水比较多的12月和1月，今年都几乎滴雨未下。好在
: 这几天下了点小雨，但完全不“解渴”。地往下挖3，4寸就像石头那么硬了。
结果悲剧了，那么久不下雨的，昨晚上下雨了。
早上把湿漉漉的大树枝拖开在院子里晒太阳，不知道傍晚能不能干了。
【在 m********r 的大作中提到】
: 那个好像是研究树的年轮得出的结论。
: 今年确实很干，（南加）。往年雨水比较多的12月和1月，今年都几乎滴雨未下。好在
: 这几天下了点小雨，但完全不“解渴”。地往下挖3，4寸就像石头那么硬了。
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