o*1
2 楼
V*t
3 楼
好像消失了
跟管坤良王晓东的差距越来越大了。
跟管坤良王晓东的差距越来越大了。
g*n
4 楼
觉得值得就付年费保留
觉得不值得就关
觉得不值得就关
o*4
5 楼
许田弄出piggybac，这个牛逼大了，
不能要求他动不动就有这个级别的成果吧
不能要求他动不动就有这个级别的成果吧
b*n
6 楼
看能否要求转成freedom吧
不行就算了
【在 n*****y 的大作中提到】
: UA成功拿到了，sapphire不行，说没有，要么可以降级成不是preferred的
不行就算了
【在 n*****y 的大作中提到】
: UA成功拿到了，sapphire不行，说没有，要么可以降级成不是preferred的
V*t
7 楼
那个没用了吧
【在 o**4 的大作中提到】
: 许田弄出piggybac，这个牛逼大了，
: 不能要求他动不动就有这个级别的成果吧
【在 o**4 的大作中提到】
: 许田弄出piggybac，这个牛逼大了，
: 不能要求他动不动就有这个级别的成果吧
n*y
8 楼
本来就没打算今年关，就是打电话去问问offer，也没威胁要关卡。
UA还是nice一些，给了。
【在 g**n 的大作中提到】
: 觉得值得就付年费保留
: 觉得不值得就关
UA还是nice一些，给了。
【在 g**n 的大作中提到】
: 觉得值得就付年费保留
: 觉得不值得就关
a*n
9 楼
现在CRISPR技术更为先进了
【在 V******t 的大作中提到】
: 那个没用了吧
【在 V******t 的大作中提到】
: 那个没用了吧
f*y
10 楼
因为没有王和管那么善于发paper呗
K*4
11 楼
刚看到管最近有两篇文章retracted了
http://retractionwatch.com/2015/06/18/macarthur-awardee-retract
【在 f****y 的大作中提到】
: 因为没有王和管那么善于发paper呗
http://retractionwatch.com/2015/06/18/macarthur-awardee-retract
【在 f****y 的大作中提到】
: 因为没有王和管那么善于发paper呗
l*i
12 楼
Piggybac作为gene delivery tool还是不错的，但是不能应用于基因治疗，是一个大的
缺陷。
许田的主要问题还是他的那个用piggybac制作基因敲除小鼠的宏大项目。好几年前就听
说复旦给许田一栋楼，养上万只小鼠，就是为了这个项目。谁知CRISPR技术这么快就出
来了，直接砸了许多人的“饭碗”，许田也算其中一个“受害者”了。
非病毒类整合性载体，比如piggybac，sleeping beauty在基因治疗方面还是有很大优
势的。目前，在欧美都有sleeping beauty的基因治疗临床试验在开展.
缺陷。
许田的主要问题还是他的那个用piggybac制作基因敲除小鼠的宏大项目。好几年前就听
说复旦给许田一栋楼，养上万只小鼠，就是为了这个项目。谁知CRISPR技术这么快就出
来了，直接砸了许多人的“饭碗”，许田也算其中一个“受害者”了。
非病毒类整合性载体，比如piggybac，sleeping beauty在基因治疗方面还是有很大优
势的。目前，在欧美都有sleeping beauty的基因治疗临床试验在开展.
o*4
13 楼
还是很有用的，
作为基因表达载体也是很不错的
【在 V******t 的大作中提到】
: 那个没用了吧
作为基因表达载体也是很不错的
【在 V******t 的大作中提到】
: 那个没用了吧
a*n
14 楼
这个作为基因表达载体的优势具体在什么地方啊？
是否转到细胞里能够稳定表达跟内源性接近的水平？
【在 o**4 的大作中提到】
: 还是很有用的，
: 作为基因表达载体也是很不错的
是否转到细胞里能够稳定表达跟内源性接近的水平？
【在 o**4 的大作中提到】
: 还是很有用的，
: 作为基因表达载体也是很不错的
o*4
15 楼
具体机理不清楚，
不过我们几个大基因，用别的系统都不行，只有piggybac非常好使
【在 a*****n 的大作中提到】
: 这个作为基因表达载体的优势具体在什么地方啊？
: 是否转到细胞里能够稳定表达跟内源性接近的水平？
不过我们几个大基因，用别的系统都不行，只有piggybac非常好使
【在 a*****n 的大作中提到】
: 这个作为基因表达载体的优势具体在什么地方啊？
: 是否转到细胞里能够稳定表达跟内源性接近的水平？
a*n
16 楼
请问你们是转染细胞吗？有没有文献或者protocol资料可以参考？
我现在研究的一个基因，knockdown或者crispr knockout在细胞里的表型一致，但是都
不能被rescue，我怀疑rescue的方法是过量表达，表达太多蛋白导致不能正常发挥功能
，我想找到一个能够表达尽量低的载体，也比较容易做的
多谢！
【在 o**4 的大作中提到】
: 具体机理不清楚，
: 不过我们几个大基因，用别的系统都不行，只有piggybac非常好使
我现在研究的一个基因，knockdown或者crispr knockout在细胞里的表型一致，但是都
不能被rescue，我怀疑rescue的方法是过量表达，表达太多蛋白导致不能正常发挥功能
，我想找到一个能够表达尽量低的载体，也比较容易做的
多谢！
【在 o**4 的大作中提到】
: 具体机理不清楚，
: 不过我们几个大基因，用别的系统都不行，只有piggybac非常好使
o*4
17 楼
就是正常转染piggybac载体，就会整合到基因组稳定表达
【在 a*****n 的大作中提到】
: 请问你们是转染细胞吗？有没有文献或者protocol资料可以参考？
: 我现在研究的一个基因，knockdown或者crispr knockout在细胞里的表型一致，但是都
: 不能被rescue，我怀疑rescue的方法是过量表达，表达太多蛋白导致不能正常发挥功能
: ，我想找到一个能够表达尽量低的载体，也比较容易做的
: 多谢！
【在 a*****n 的大作中提到】
: 请问你们是转染细胞吗？有没有文献或者protocol资料可以参考？
: 我现在研究的一个基因，knockdown或者crispr knockout在细胞里的表型一致，但是都
: 不能被rescue，我怀疑rescue的方法是过量表达，表达太多蛋白导致不能正常发挥功能
: ，我想找到一个能够表达尽量低的载体，也比较容易做的
: 多谢！
a*n
18 楼
这个克隆和转染难做吗？
【在 o**4 的大作中提到】
: 就是正常转染piggybac载体，就会整合到基因组稳定表达
【在 o**4 的大作中提到】
: 就是正常转染piggybac载体，就会整合到基因组稳定表达
j*i
19 楼
piggybac用plasmid表达的话很容易多拷贝 所以表达量不会低 当然 也可以用极低量的
PB transpoase 然后多筛选几个单拷贝克隆 其中有的克隆表达量会低
【在 a*****n 的大作中提到】
: 请问你们是转染细胞吗？有没有文献或者protocol资料可以参考？
: 我现在研究的一个基因，knockdown或者crispr knockout在细胞里的表型一致，但是都
: 不能被rescue，我怀疑rescue的方法是过量表达，表达太多蛋白导致不能正常发挥功能
: ，我想找到一个能够表达尽量低的载体，也比较容易做的
: 多谢！
PB transpoase 然后多筛选几个单拷贝克隆 其中有的克隆表达量会低
【在 a*****n 的大作中提到】
: 请问你们是转染细胞吗？有没有文献或者protocol资料可以参考？
: 我现在研究的一个基因，knockdown或者crispr knockout在细胞里的表型一致，但是都
: 不能被rescue，我怀疑rescue的方法是过量表达，表达太多蛋白导致不能正常发挥功能
: ，我想找到一个能够表达尽量低的载体，也比较容易做的
: 多谢！
o*4
20 楼
不难，
就是普通的克隆跟转染
【在 a*****n 的大作中提到】
: 这个克隆和转染难做吗？
就是普通的克隆跟转染
【在 a*****n 的大作中提到】
: 这个克隆和转染难做吗？
L*y
21 楼
参加过许田的 seminar，许的报告很精彩，其英语表达能力极强，显的很 smart。他的
专长是遗传，不可能象搞生化和结构的那样大批量生产文章。但是许的文章很有分量，
象在果蝇里广泛应用的Genetic mosaic技术，就是许完善发展来的。
【在 V******t 的大作中提到】
: 好像消失了
: 跟管坤良王晓东的差距越来越大了。
专长是遗传，不可能象搞生化和结构的那样大批量生产文章。但是许的文章很有分量，
象在果蝇里广泛应用的Genetic mosaic技术，就是许完善发展来的。
【在 V******t 的大作中提到】
: 好像消失了
: 跟管坤良王晓东的差距越来越大了。
s*s
22 楼
许田phd做的FRT／FLP这个就够超重量级的工作了。这种级别的多做几个估计就能碰上
诺贝尔奖了。大家expectation太高。
【在 L*********y 的大作中提到】
: 参加过许田的 seminar，许的报告很精彩，其英语表达能力极强，显的很 smart。他的
: 专长是遗传，不可能象搞生化和结构的那样大批量生产文章。但是许的文章很有分量，
: 象在果蝇里广泛应用的Genetic mosaic技术，就是许完善发展来的。
诺贝尔奖了。大家expectation太高。
【在 L*********y 的大作中提到】
: 参加过许田的 seminar，许的报告很精彩，其英语表达能力极强，显的很 smart。他的
: 专长是遗传，不可能象搞生化和结构的那样大批量生产文章。但是许的文章很有分量，
: 象在果蝇里广泛应用的Genetic mosaic技术，就是许完善发展来的。
D*5
23 楼
http://www.jbc.org/content/279/31/32824.long
This retracted article, the first author Weiquan Li,is now working with Feng
Liu at Second XiangYa Hospital, Changsha, Hunan
【在 K**4 的大作中提到】
: 刚看到管最近有两篇文章retracted了
: http://retractionwatch.com/2015/06/18/macarthur-awardee-retract
This retracted article, the first author Weiquan Li,is now working with Feng
Liu at Second XiangYa Hospital, Changsha, Hunan
【在 K**4 的大作中提到】
: 刚看到管最近有两篇文章retracted了
: http://retractionwatch.com/2015/06/18/macarthur-awardee-retract
S*e
24 楼
这个JBC的文章也撤回
怎么个说法？
为了憋出来个大的?还是保证学术纯洁？
【在 K**4 的大作中提到】
: 刚看到管最近有两篇文章retracted了
: http://retractionwatch.com/2015/06/18/macarthur-awardee-retract
怎么个说法？
为了憋出来个大的?还是保证学术纯洁？
【在 K**4 的大作中提到】
: 刚看到管最近有两篇文章retracted了
: http://retractionwatch.com/2015/06/18/macarthur-awardee-retract
a*n
25 楼
为什么JBC就不能撤回？不懂你的逻辑
【在 S**********e 的大作中提到】
: 这个JBC的文章也撤回
: 怎么个说法？
: 为了憋出来个大的?还是保证学术纯洁？
【在 S**********e 的大作中提到】
: 这个JBC的文章也撤回
: 怎么个说法？
: 为了憋出来个大的?还是保证学术纯洁？
S*e
26 楼
大文章多数迫于压力撤回修改
小文章为啥费劲折腾？
【在 a*****n 的大作中提到】
: 为什么JBC就不能撤回？不懂你的逻辑
小文章为啥费劲折腾？
【在 a*****n 的大作中提到】
: 为什么JBC就不能撤回？不懂你的逻辑
a*n
27 楼
不一定是折腾，也不需要迫于压力啊，好的科学家发现自己之前的文章有问题会主动撤
回的，这个很正常的吧
【在 S**********e 的大作中提到】
: 大文章多数迫于压力撤回修改
: 小文章为啥费劲折腾？
回的，这个很正常的吧
【在 S**********e 的大作中提到】
: 大文章多数迫于压力撤回修改
: 小文章为啥费劲折腾？
S*e
28 楼
所以我说他是为了保持学术纯洁啊
【在 a*****n 的大作中提到】
: 不一定是折腾，也不需要迫于压力啊，好的科学家发现自己之前的文章有问题会主动撤
: 回的，这个很正常的吧
【在 a*****n 的大作中提到】
: 不一定是折腾，也不需要迫于压力啊，好的科学家发现自己之前的文章有问题会主动撤
: 回的，这个很正常的吧
a*n
29 楼
是啊，只是感觉你对JBC不是很客气啊，我刚投了一篇JBC，有点敏感，呵呵
【在 S**********e 的大作中提到】
: 所以我说他是为了保持学术纯洁啊
【在 S**********e 的大作中提到】
: 所以我说他是为了保持学术纯洁啊
S*e
30 楼
不是我看不上，是我觉得guan看不上，发了也罢，还要撤，挺逗的
【在 a*****n 的大作中提到】
: 是啊，只是感觉你对JBC不是很客气啊，我刚投了一篇JBC，有点敏感，呵呵
【在 a*****n 的大作中提到】
: 是啊，只是感觉你对JBC不是很客气啊，我刚投了一篇JBC，有点敏感，呵呵
l*e
31 楼
许很大气，高瞻远瞩
管更多是努力
管更多是努力
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