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请教crispr HDR的模板能直接放在px469载体上吗?
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请教crispr HDR的模板能直接放在px469载体上吗?# Biology - 生物学
x*i
1
有找她办过eb1或者niw的请站内信,多谢
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a*y
2
【 以下文字转载自 Fashion 讨论区 】
发信人: cazqpy (cazqpy), 信区: Fashion
标 题: 中国人在Evolution上的一个需要改进之处
发信站: BBS 未名空间站 (Tue Jul 12 10:14:55 2011, 美东)
大凡看过西方的人,除了大多数身高马大,有没有注意到他们的头型都不错?
长脸,前后脑突出,脸盘较小。。。
我注意到了,研究了一下,当我女儿出生时,我立下规矩,她必须侧睡,就像老美
一样,胸口朝下,头部俩边均匀侧睡。一年以后,头骨硬了,就随便她睡了。
果然,她前后脑突出,脸盘较小,人见人爱。
回想中国人,尤其是南方人,大多数人那圆圆的脸,扁平的正面,不突出的脑勺。
是跟出生时(脑壳软)朝天睡有关的。可以想像,朝天睡时,重力朝下,脸的边缘
下垂,脑门扁平,嵩岳坍塌,眼睛受脸的边缘下垂拉长,变成一线天,后脑勺压扁。
几千年来,落成了中国人这与世不同的脸谱。如遇不负责的父母,那孩子就是一张
大饼脸。赵薇的眼睛在中国变成了希奇,太悲惨了。
从我小孩的身上,我看到了中国人Evolution的希望,千年以后,希望中国人的脸
型能更漂亮。至少跟国际接轨吧。
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r*e
3
就是将修复模板(800bp)放在同一个载体上,比如px459-puro的Not1位点?
我看标准的protocol需要将修复模板线性化,这个重要吗?
先谢谢了!
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l*2
4
co-ask
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K*N
5
这个回的不错:
发信人: yuzu (betterthanyesterday), 信区: Fashion
标 题: Re: 中国人在Evolution上的一个需要改进之处
发信站: BBS 未名空间站 (Wed Jul 13 00:16:53 2011, 美东)
我进化的挺好,你继续。

【在 a****y 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 Fashion 讨论区 】
: 发信人: cazqpy (cazqpy), 信区: Fashion
: 标 题: 中国人在Evolution上的一个需要改进之处
: 发信站: BBS 未名空间站 (Tue Jul 12 10:14:55 2011, 美东)
: 大凡看过西方的人,除了大多数身高马大,有没有注意到他们的头型都不错?
: 长脸,前后脑突出,脸盘较小。。。
: 我注意到了,研究了一下,当我女儿出生时,我立下规矩,她必须侧睡,就像老美
: 一样,胸口朝下,头部俩边均匀侧睡。一年以后,头骨硬了,就随便她睡了。
: 果然,她前后脑突出,脸盘较小,人见人爱。
: 回想中国人,尤其是南方人,大多数人那圆圆的脸,扁平的正面,不突出的脑勺。

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j*n
6
线性片断HR效率高
放在template也可行 至少我们在yeast做是可以的 效率差一些 需要很高的plasmid
copy number才能实现100%敲除

【在 r***e 的大作中提到】
: 就是将修复模板(800bp)放在同一个载体上,比如px459-puro的Not1位点?
: 我看标准的protocol需要将修复模板线性化,这个重要吗?
: 先谢谢了!

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n*e
7
co-ask! thank you for sharing your insights!
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s*l
8
胸口朝下睡,老实说,算她女儿命大。最基本的新生儿知识都不懂。
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r*e
9
谢谢,那就分开算了。
做点突变Knockin,没什么好的筛选方法,只能引入酶切位点做鉴定用,看来得慢慢挑克
隆了。

【在 j****n 的大作中提到】
: 线性片断HR效率高
: 放在template也可行 至少我们在yeast做是可以的 效率差一些 需要很高的plasmid
: copy number才能实现100%敲除

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a*o
10
其实这不是笑话,等你有娃了你就知道了。这事儿不用对新生儿整,小baby会翻身之后
趴着睡就木有问题,趴着睡、侧睡出来的头型是好看些,不会弄个大饼脸。

【在 s****l 的大作中提到】
: 胸口朝下睡,老实说,算她女儿命大。最基本的新生儿知识都不懂。
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