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为啥我trypsin细胞以后，细胞经常成团？

为啥我trypsin细胞以后，细胞经常成团？# Biology - 生物学

n*72015-10-09 07:10

1 楼

谢谢！

B*v2015-10-09 07:10

2 楼

很影响试验心情，是不是trypsin时间太长，还是trypsin浓度太高（0.25%）？
我摸索了一下还是经常成团。
哪位同学有经验？

f*s2015-10-09 07:10

3 楼

你这个485是对应现在降级的eb3的140，你填eb2干嘛，填了后，估计移民官都会搞糊涂
，直接锯掉你的485申请，原因就是你的eb2没current，我建议是不填，不过你还是问
问律师最保险把

s*y2015-10-09 07:10

4 楼

我一般是trypsin把细胞消化好，就马上用血清中和。这样细胞就不会成团。

n*72015-10-09 07:10

5 楼

我也这么想，可是律师坚决说要填怎么办？
律师还说不要听外面论坛，想问问大家的律师怎么说的。

r*k2015-10-09 07:10

6 楼

吹打的时候用培养基

【在 B***v 的大作中提到】

: 很影响试验心情，是不是trypsin时间太长，还是trypsin浓度太高（0.25%）？
: 我摸索了一下还是经常成团。
: 哪位同学有经验？

f*u2015-10-09 07:10

7 楼

应该填。一个人理论上只有一个 A-file，除非他们自己弄错了。即使你不填，USCIS
也能找到和你有关的所有申请，不过是给他们增添点麻烦而已。

【在 n*****7 的大作中提到】

: 谢谢！

D*a2015-10-09 07:10

8 楼

我怎么觉得是没吹打开

h*k2015-10-09 07:10

9 楼

你律师是对的。应该填EB2 140 A#，这样可以relink你EB2的PD。

T*e2015-10-09 07:10

10 楼

没吹打开吧缓慢的多次的吹打

n*72015-10-09 07:10

11 楼

谢谢，这下放心了。

a*r2015-10-09 07:10

12 楼

没吹开

l*u2015-10-09 07:10

13 楼

反正你要附上原来的140批件，不用担心他们找不到你的PD

m*D2015-10-09 07:10

14 楼

我的感觉是你over-treated.细胞成团往往是DNA出来的缘故。我看了我们的trypsin/
EDTA,我们用的是0。05%，比你的低五倍。
我一般的程序是：PBS洗一次后，T75加1-1。5 mltrypsin，用手转动flask,让trypsin
cover所有的细胞表面，然后把trypsin suck away。把flask放iincubator 3-5分钟就
可以了。不晃动，在microscope下改看到的都市单细胞。如果下不来，往往是PBS没洗
好，可以多洗一次。
肝细胞会例外。它们本来就抱团。这个只能靠needle来处理。