30kb的大质粒，应该如何转染？# Biology - 生物学
v*a
1 楼
两个问题请教：
1、30kb的大质粒，应该如何转染，才能达到最高的转染效率？
2、这个质粒携带的是mouse gene，但是cmv启动子来自于pEGFP-N1质粒，可以转染人细
胞株么？
谢谢！
1、30kb的大质粒，应该如何转染，才能达到最高的转染效率？
2、这个质粒携带的是mouse gene，但是cmv启动子来自于pEGFP-N1质粒，可以转染人细
胞株么？
谢谢！
m*y
2 楼
1.可以电转吗？
2.没问题
2.没问题
j*9
3 楼
应该取决于你用的是什么细胞，比如293， COS-7这样的很容易就转进去了
b*e
4 楼
1.对于30kb的质粒，不管是电转还是liposome效率都很难达到很高，即便是293这种好
转的细胞，虽然电转的效率高一点儿，但是这么大的size,在电转的时候会kill掉很大
比例的细胞。所以对于这么大的Size,要想高转染效率，估计只有包成Helper
Dependent Adenoviral Vector.
2.要看你转的是哪种细胞，mouse gene没有问题，但CMV在一些细胞里会表达很差，或
不表达。
转的细胞，虽然电转的效率高一点儿，但是这么大的size,在电转的时候会kill掉很大
比例的细胞。所以对于这么大的Size,要想高转染效率，估计只有包成Helper
Dependent Adenoviral Vector.
2.要看你转的是哪种细胞，mouse gene没有问题，但CMV在一些细胞里会表达很差，或
不表达。
v*a
5 楼
非常感谢各位答复。
v*a
6 楼
两个问题请教：
1、30kb的大质粒，应该如何转染，才能达到最高的转染效率？
2、这个质粒携带的是mouse gene，但是cmv启动子来自于pEGFP-N1质粒，可以转染人细
胞株么？
谢谢！
1、30kb的大质粒，应该如何转染，才能达到最高的转染效率？
2、这个质粒携带的是mouse gene，但是cmv启动子来自于pEGFP-N1质粒，可以转染人细
胞株么？
谢谢！
m*y
7 楼
1.可以电转吗？
2.没问题
2.没问题
j*9
8 楼
应该取决于你用的是什么细胞，比如293， COS-7这样的很容易就转进去了
b*e
9 楼
1.对于30kb的质粒，不管是电转还是liposome效率都很难达到很高，即便是293这种好
转的细胞，虽然电转的效率高一点儿，但是这么大的size,在电转的时候会kill掉很大
比例的细胞。所以对于这么大的Size,要想高转染效率，估计只有包成Helper
Dependent Adenoviral Vector.
2.要看你转的是哪种细胞，mouse gene没有问题，但CMV在一些细胞里会表达很差，或
不表达。
转的细胞，虽然电转的效率高一点儿，但是这么大的size,在电转的时候会kill掉很大
比例的细胞。所以对于这么大的Size,要想高转染效率，估计只有包成Helper
Dependent Adenoviral Vector.
2.要看你转的是哪种细胞，mouse gene没有问题，但CMV在一些细胞里会表达很差，或
不表达。
v*a
10 楼
非常感谢各位答复。
n*y
11 楼
试试PEI吧
http://www.polysciences.com/default/transporter-5-transfection-
不怕麻烦就定25kDa 的
http://www.polysciences.com/default/transporter-5-transfection-
不怕麻烦就定25kDa 的
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