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求助，好用的细胞荧光标记用来做老鼠in vivo study

求助，好用的细胞荧光标记用来做老鼠in vivo study# Biology - 生物学

s*n2016-06-04 07:06

1 楼

请问大家有哪些荧光分子可以标记细胞，然后把标记的细胞打入老鼠体内，然后可以直
接做whole mouse imaging的？目的是想看清楚细胞进入体内以后的去向和各个组织器
官的分布。
我知道有人用luciferase，但是imaging之前需要再打luciferin之类的底物吗？
除了luciferase还有其他的可以用吗？
在此先谢过大家了！

p*n2016-06-04 07:06

2 楼

我以前用过DS-red标记的细胞，效果还不错。GFP的荧光貌似有点弱，在动物体内不好
用

s*n2016-06-04 07:06

3 楼

ds-red能做 mouse whole body imaging吗？细胞的组织器官分布可以看清楚吗？

【在 p*******n 的大作中提到】

: 我以前用过DS-red标记的细胞，效果还不错。GFP的荧光貌似有点弱，在动物体内不好
: 用

f*d2016-06-04 07:06

4 楼

最好用远红外的标记、这样不会有background

h*e2016-06-04 07:06

5 楼

eGFP和RFP都很强吧，前者似乎更强
不需要荧光标记可以用lacZ，结果也很convincing

【在 s********n 的大作中提到】

: 请问大家有哪些荧光分子可以标记细胞，然后把标记的细胞打入老鼠体内，然后可以直
: 接做whole mouse imaging的？目的是想看清楚细胞进入体内以后的去向和各个组织器
: 官的分布。
: 我知道有人用luciferase，但是imaging之前需要再打luciferin之类的底物吗？
: 除了luciferase还有其他的可以用吗？
: 在此先谢过大家了！

p*n2016-06-04 07:06

6 楼

我以前实验室用这个Dsred做过结肠癌肝转移模型，效果还可以，不过转移到骨头里面
的话就不知道能不能看到了

【在 s********n 的大作中提到】

: ds-red能做 mouse whole body imaging吗？细胞的组织器官分布可以看清楚吗？

s*y2016-06-04 07:06

7 楼

如果我没有搞错的话，你是要对整个老鼠进行活体观察吧？对于这种应用，除非有特殊
需要（比方说需要达到单细胞分辨率），否则用luciferase是最简单也最有效的方法。
在imaging之前的确需要打一针底物，但是这个很容易。一般打到皮下即可，老鼠对此
忍耐度比较高。发出来的光很容易被观察到（因为背景低），在绝大部分组织都没有问
题。但是如果细胞跑进了骨头可能会有点麻烦。
如果用荧光蛋白来做活体标记，普通的绿色和红色荧光蛋白都不合适，因为激发光不能
透入体内，即使用双光子显微镜也不行（一般双光子显微镜最多就一到两个毫米的穿透
深度，不能穿透整个老鼠）。上面有人提到远红荧光蛋白，我对此没有直接经验，但是
我也不觉得对于这个蛋白的激发光可以穿透整个老鼠（即使用双光子应该也不行）。而
且荧光蛋白的观察还有其他各种各样的限制，所以不到万不得已不要用。
如果你是想把老鼠杀了然后把组织切了然后再作荧光的话，那么倒是随便你爱用啥就用
啥。

【在 s********n 的大作中提到】

s*n2016-06-04 07:06

8 楼

谢谢！我也觉得luciferase或者类似的东西比较好。

【在 s******y 的大作中提到】

: 如果我没有搞错的话，你是要对整个老鼠进行活体观察吧？对于这种应用，除非有特殊
: 需要（比方说需要达到单细胞分辨率），否则用luciferase是最简单也最有效的方法。
: 在imaging之前的确需要打一针底物，但是这个很容易。一般打到皮下即可，老鼠对此
: 忍耐度比较高。发出来的光很容易被观察到（因为背景低），在绝大部分组织都没有问
: 题。但是如果细胞跑进了骨头可能会有点麻烦。
: 如果用荧光蛋白来做活体标记，普通的绿色和红色荧光蛋白都不合适，因为激发光不能
: 透入体内，即使用双光子显微镜也不行（一般双光子显微镜最多就一到两个毫米的穿透
: 深度，不能穿透整个老鼠）。上面有人提到远红荧光蛋白，我对此没有直接经验，但是
: 我也不觉得对于这个蛋白的激发光可以穿透整个老鼠（即使用双光子应该也不行）。而
: 且荧光蛋白的观察还有其他各种各样的限制，所以不到万不得已不要用。