E*r
2 楼
献给勤劳的梭影，和派慈上的愤丝
童年-----宠物篇
我小的时候不去托儿所，经常早晨吃完饭就出去玩，中午饭也不吃，直到天黑后才回
家，我爸妈对我一天的所作所为基本上不闻不问。有时候打架了，被人拎去见家长，
我爸就说：“怎么能打架呢？晚上我要教育教育他。”结果晚上平安无事，后来我爸告
诉我，他小时候也喜欢打架，我奶奶为此打过他，己所不欲勿施于人。由此可见，小时
候我有极大的自由度。
我在一个很大的院子里长大，院子里有很多大树，主要有榆树、柳树、槐树、松树和钻
天杨，榆树钱和槐树花都很好吃。还有数十颗品种不良的果树，只有樱桃尚可入口，但
要用心找才能有收获，我们称其为“逮樱桃”。院子里有很多灌木，主要是丁香、迎春
和刺梅，草本植物则数不胜数。我经常整天钻在草木丛中，摘黑天天和毛毛果，挖小根
蒜和鬼子姜，咂串红花蕊的甜味，捏遍指甲花的果荚，或是收集地雷花的种子，等等。
院子里有很多中草药，如马齿笕、曼陀罗、大蓟、桔梗、紫花地丁等，还有攀援植物如
拉拉秧、爬山虎、牵牛子和癞瓜瓢。有花草就生出各种各样的虫子，有虫子就引来众多
捕食者，如鸟啊、蛇啊、青蛙、蝙蝠和黄鼠狼等，据说以前还有过狐狸。
我小时候最着迷的是养鸟，四五岁的时候，有一天我爸的一个董姓同事递给我一个纸
盒，里面有一只刚长针羽的小家雀，这是我的第一只鸟，从此一发不可收了。院子里的
水塔上常住一对喜鹊，还有一对燕子每年返巢，这个巢筑在近十米高的锅炉房的屋檐
下，它们两家对我来说高不可攀，我只能打家雀的主意。院子里家雀窝很多，一般位置
不高，我根据叫声判断家雀的大小，在快出窝时设法将小鸟掏出来，带回家手喂，当时
我能调教出召之即来，挥之即去的家雀，颇值得炫耀。刚出窝的小家雀还不大会飞，不
难捕捉，逢下雨天而运气又好时，一天可以捉两三只，这样的小鸟比我自己喂的壮实，
同样可以调教。有一次我与一个周姓小朋友同时扑住一只小家雀，我扑住头，他扑住身
子，我们僵持了几秒钟，他放手让给我了，他说：“其实我比你早一丁点。”他是对
的，这是我记忆中的第一次惭愧。
我还养过很多候鸟，包括黄雀、苏雀、燕雀子、三道眉、麻料、蜡嘴等，其中一些是我
自己捕到的。我会自己做活夹子，诱饵用玉米螟幼虫，春天时要到大院外找秸秆，剥里
面越冬的虫子，常剥得手指疼，冻得直流清鼻涕，但并不觉得苦。对不吃虫子的鸟，要
用打笼来捕，诱饵是谷穗或苏子，触发机关是爪踏式。每年春秋两季候鸟经过时，我都
会专心致志地捕鸟，捕鸟有一系列技巧，诸如选点、下夹子、遛鸟等。最容易捕的是蓝
背，经常是刚下好夹子，人还没走远，它们就冲下来吃虫了，可惜蓝背养不活，只能放
掉。我最喜欢黄雀和苏雀，它们唱得动听，且没有气性，很容易养熟。我印象最深的是
一只母苏雀，她小巧玲珑，头顶一点朱斑，对人根本不设防，会自己开笼门出来玩，喜
欢洗澡和照镜子，我们全家都喜欢她。后来她在大冬天从气窗逃跑了，估计凶多吉少，
我心痛了很久。
蛐蛐也让我如醉如痴，院子里有成堆的建筑垃圾和废金属，有煤场和炉灰场，有成千上
万的墙缝，这都是蛐蛐藏身的好地方。白天我翻砖瓦石块，对墙缝用草棍探、塑料管
吹、或者水灌。晚上要靠听，我能从鸣叫声辨别蛐蛐体型大小、头顶的花色、以及是否
骁勇善战等，听到好蛐蛐要立即定位，实施抓捕。定位过程一般要走走停停，耗时颇
长，其间蚊虫叮咬，混若不觉，捉蛐蛐与捕鸟、钓鱼和打猎类似，是人类动物本能的回
归。捉到厉害的蛐蛐要先养几天，等它不惊了，再向其他小朋友下战书，挑战方式与职
业拳王赛相似，逐级战胜所有对手的蛐蛐被尊为大王，每个季节能产生几个大王，我的
蛐蛐却一次大王都没当过。有高氏兄弟，比我大二三岁，总能捉到厉害的蛐蛐，总当大
王，不知他们有什么不传之秘。听说粪坑边或坟场里的蛐蛐厉害，能把对手臭走或是吓
走，当时半信半疑。
我还特别喜欢水鳖，后来知道水鳖的学名叫龙虱，我喜欢的是体型最大，身长两寸左
右，背上有黄边，腹部有黑黄斑纹的那种。水鳖有趋光性，在路灯下就能抓到。水鳖身
体呈流线型，有两条强壮的后腿，宛如一双大桨，游泳时盘旋、翻转、俯冲等动作随心
所欲，我盯着看很久也不会厌倦。我的鱼缸不大，一般只养六七个水鳖，它们的尿很多
且味道很大，因此每天都要换水。水鳖是肉食性的，攻击猎物时非常凶猛，我投给它们
一个青蛙，两只水鳖上来各扯一条后腿，一下就撕成两半，其它的闻到血腥一拥而上，
很快就能把一只青蛙吃光。吃得太多时，它们的身体会撑圆，失去上浮力，只能躺在水
底休息。喂食过程是很血腥的，当时似懂非懂，仍然留下无法磨灭的印象，另一方面，
我确实享受它们抢食的场面，根源是养活生命带来的快感，这也是人类的动物本能。
我一直养青蛙，家里青蛙常来常往，印象最深的是一个大青蛙，大到一只手刚能抓住脊
背。我家厨房的一角有水管，水管周围的地上总是湿的，这个青蛙就以那里为家。我捉
拉拉蛄、蚂蚱、油葫芦给它吃，往它身前的地上一丢，它舌头一卷就咬在嘴里，再嘎巴
两下就下肚了，一次能吃十来个拉拉蛄。有两次我逗它玩，扔一颗山里红过去，它照样
舌头一卷吞下肚去，不知是感觉不出差别呢，还是想换换口味？我曾经从蝌蚪养成一批
青蛙，它们晚上在家里到处跳，发出啪啪声，结果都被我爸给放生了，这个大青蛙一声
不响，得以在我家住了两三年，最后是我害死了它。我学到青蛙在冬天要冬眠，于是在
外边挖了一个深洞，将它放进去，上面架了支架和木板，再将土填回去，后来我沉不住
气，挖开查看过两三次，它还活着，再后来……它死了。
再说几个不常养，却比较特别的吧。院子里有一棵高大的怪树，叶子像梧桐，果实像一
把豇豆，我们叫它面条树。树上有一种大青虫，长度是桑蚕的三倍有余，粗如小擀面
杖，叫杖杖虫，我常去捉来玩，它们的皮很厚，扭动时非常有力，双手都握不住，我不
知道它的学名是什么。还有土鳖虫，因为可入药，我很感性趣，我把成虫从土里挖出
来，连土一起放入罐中，隔一段时间倒出来，就有很多小土鳖虫出现，很有成就感。后
来我得知土鳖虫雌雄异形，雄虫有翅膀，而我养的全都没有翅膀，全都是雌的，不禁吃
了一惊！我竟然从未见过雄土鳖虫。我还养过一种叫油蚓的大千足虫，油蚓身体呈圆
形，比筷子粗一些，但没那么长，身上是红棕色和黑色相间的条文，足是黑色的，密密
麻麻，不过好像没有一千只。油蚓喜欢潮湿的环境，以青草和菜叶为食，身上味道很大
很难闻，我也不知道它的学名。
常见的虫子我都养过，常见的水生物我也都养过，我本来列了一个清单，清单里的土名
看着那么的亲切，但有的活物已让我忍无可忍，就不拿出来吓唬人了。上面提的经历都
发生在十岁以前，那期间我还养过鸽子、鸡、小白鼠、金鱼。大院里有个猪圈，平时有
一二十头猪，猪倌是一个胖胖的、很和善的于姓老人，我常去他那玩猪。这些家养的动
物，与本篇的主题不符，就不写了。
童年-----宠物篇
我小的时候不去托儿所，经常早晨吃完饭就出去玩，中午饭也不吃，直到天黑后才回
家，我爸妈对我一天的所作所为基本上不闻不问。有时候打架了，被人拎去见家长，
我爸就说：“怎么能打架呢？晚上我要教育教育他。”结果晚上平安无事，后来我爸告
诉我，他小时候也喜欢打架，我奶奶为此打过他，己所不欲勿施于人。由此可见，小时
候我有极大的自由度。
我在一个很大的院子里长大，院子里有很多大树，主要有榆树、柳树、槐树、松树和钻
天杨，榆树钱和槐树花都很好吃。还有数十颗品种不良的果树，只有樱桃尚可入口，但
要用心找才能有收获，我们称其为“逮樱桃”。院子里有很多灌木，主要是丁香、迎春
和刺梅，草本植物则数不胜数。我经常整天钻在草木丛中，摘黑天天和毛毛果，挖小根
蒜和鬼子姜，咂串红花蕊的甜味，捏遍指甲花的果荚，或是收集地雷花的种子，等等。
院子里有很多中草药，如马齿笕、曼陀罗、大蓟、桔梗、紫花地丁等，还有攀援植物如
拉拉秧、爬山虎、牵牛子和癞瓜瓢。有花草就生出各种各样的虫子，有虫子就引来众多
捕食者，如鸟啊、蛇啊、青蛙、蝙蝠和黄鼠狼等，据说以前还有过狐狸。
我小时候最着迷的是养鸟，四五岁的时候，有一天我爸的一个董姓同事递给我一个纸
盒，里面有一只刚长针羽的小家雀，这是我的第一只鸟，从此一发不可收了。院子里的
水塔上常住一对喜鹊，还有一对燕子每年返巢，这个巢筑在近十米高的锅炉房的屋檐
下，它们两家对我来说高不可攀，我只能打家雀的主意。院子里家雀窝很多，一般位置
不高，我根据叫声判断家雀的大小，在快出窝时设法将小鸟掏出来，带回家手喂，当时
我能调教出召之即来，挥之即去的家雀，颇值得炫耀。刚出窝的小家雀还不大会飞，不
难捕捉，逢下雨天而运气又好时，一天可以捉两三只，这样的小鸟比我自己喂的壮实，
同样可以调教。有一次我与一个周姓小朋友同时扑住一只小家雀，我扑住头，他扑住身
子，我们僵持了几秒钟，他放手让给我了，他说：“其实我比你早一丁点。”他是对
的，这是我记忆中的第一次惭愧。
我还养过很多候鸟，包括黄雀、苏雀、燕雀子、三道眉、麻料、蜡嘴等，其中一些是我
自己捕到的。我会自己做活夹子，诱饵用玉米螟幼虫，春天时要到大院外找秸秆，剥里
面越冬的虫子，常剥得手指疼，冻得直流清鼻涕，但并不觉得苦。对不吃虫子的鸟，要
用打笼来捕，诱饵是谷穗或苏子，触发机关是爪踏式。每年春秋两季候鸟经过时，我都
会专心致志地捕鸟，捕鸟有一系列技巧，诸如选点、下夹子、遛鸟等。最容易捕的是蓝
背，经常是刚下好夹子，人还没走远，它们就冲下来吃虫了，可惜蓝背养不活，只能放
掉。我最喜欢黄雀和苏雀，它们唱得动听，且没有气性，很容易养熟。我印象最深的是
一只母苏雀，她小巧玲珑，头顶一点朱斑，对人根本不设防，会自己开笼门出来玩，喜
欢洗澡和照镜子，我们全家都喜欢她。后来她在大冬天从气窗逃跑了，估计凶多吉少，
我心痛了很久。
蛐蛐也让我如醉如痴，院子里有成堆的建筑垃圾和废金属，有煤场和炉灰场，有成千上
万的墙缝，这都是蛐蛐藏身的好地方。白天我翻砖瓦石块，对墙缝用草棍探、塑料管
吹、或者水灌。晚上要靠听，我能从鸣叫声辨别蛐蛐体型大小、头顶的花色、以及是否
骁勇善战等，听到好蛐蛐要立即定位，实施抓捕。定位过程一般要走走停停，耗时颇
长，其间蚊虫叮咬，混若不觉，捉蛐蛐与捕鸟、钓鱼和打猎类似，是人类动物本能的回
归。捉到厉害的蛐蛐要先养几天，等它不惊了，再向其他小朋友下战书，挑战方式与职
业拳王赛相似，逐级战胜所有对手的蛐蛐被尊为大王，每个季节能产生几个大王，我的
蛐蛐却一次大王都没当过。有高氏兄弟，比我大二三岁，总能捉到厉害的蛐蛐，总当大
王，不知他们有什么不传之秘。听说粪坑边或坟场里的蛐蛐厉害，能把对手臭走或是吓
走，当时半信半疑。
我还特别喜欢水鳖，后来知道水鳖的学名叫龙虱，我喜欢的是体型最大，身长两寸左
右，背上有黄边，腹部有黑黄斑纹的那种。水鳖有趋光性，在路灯下就能抓到。水鳖身
体呈流线型，有两条强壮的后腿，宛如一双大桨，游泳时盘旋、翻转、俯冲等动作随心
所欲，我盯着看很久也不会厌倦。我的鱼缸不大，一般只养六七个水鳖，它们的尿很多
且味道很大，因此每天都要换水。水鳖是肉食性的，攻击猎物时非常凶猛，我投给它们
一个青蛙，两只水鳖上来各扯一条后腿，一下就撕成两半，其它的闻到血腥一拥而上，
很快就能把一只青蛙吃光。吃得太多时，它们的身体会撑圆，失去上浮力，只能躺在水
底休息。喂食过程是很血腥的，当时似懂非懂，仍然留下无法磨灭的印象，另一方面，
我确实享受它们抢食的场面，根源是养活生命带来的快感，这也是人类的动物本能。
我一直养青蛙，家里青蛙常来常往，印象最深的是一个大青蛙，大到一只手刚能抓住脊
背。我家厨房的一角有水管，水管周围的地上总是湿的，这个青蛙就以那里为家。我捉
拉拉蛄、蚂蚱、油葫芦给它吃，往它身前的地上一丢，它舌头一卷就咬在嘴里，再嘎巴
两下就下肚了，一次能吃十来个拉拉蛄。有两次我逗它玩，扔一颗山里红过去，它照样
舌头一卷吞下肚去，不知是感觉不出差别呢，还是想换换口味？我曾经从蝌蚪养成一批
青蛙，它们晚上在家里到处跳，发出啪啪声，结果都被我爸给放生了，这个大青蛙一声
不响，得以在我家住了两三年，最后是我害死了它。我学到青蛙在冬天要冬眠，于是在
外边挖了一个深洞，将它放进去，上面架了支架和木板，再将土填回去，后来我沉不住
气，挖开查看过两三次，它还活着，再后来……它死了。
再说几个不常养，却比较特别的吧。院子里有一棵高大的怪树，叶子像梧桐，果实像一
把豇豆，我们叫它面条树。树上有一种大青虫，长度是桑蚕的三倍有余，粗如小擀面
杖，叫杖杖虫，我常去捉来玩，它们的皮很厚，扭动时非常有力，双手都握不住，我不
知道它的学名是什么。还有土鳖虫，因为可入药，我很感性趣，我把成虫从土里挖出
来，连土一起放入罐中，隔一段时间倒出来，就有很多小土鳖虫出现，很有成就感。后
来我得知土鳖虫雌雄异形，雄虫有翅膀，而我养的全都没有翅膀，全都是雌的，不禁吃
了一惊！我竟然从未见过雄土鳖虫。我还养过一种叫油蚓的大千足虫，油蚓身体呈圆
形，比筷子粗一些，但没那么长，身上是红棕色和黑色相间的条文，足是黑色的，密密
麻麻，不过好像没有一千只。油蚓喜欢潮湿的环境，以青草和菜叶为食，身上味道很大
很难闻，我也不知道它的学名。
常见的虫子我都养过，常见的水生物我也都养过，我本来列了一个清单，清单里的土名
看着那么的亲切，但有的活物已让我忍无可忍，就不拿出来吓唬人了。上面提的经历都
发生在十岁以前，那期间我还养过鸽子、鸡、小白鼠、金鱼。大院里有个猪圈，平时有
一二十头猪，猪倌是一个胖胖的、很和善的于姓老人，我常去他那玩猪。这些家养的动
物，与本篇的主题不符，就不写了。
s*k
3 楼
跨膜区大概20个氨基酸左右
c端融合GFP后 发现表达量超级低
荧光也超级弱
大家平时有遇到过吗 不知道如何解决
GFP换在N端？
c端融合GFP后 发现表达量超级低
荧光也超级弱
大家平时有遇到过吗 不知道如何解决
GFP换在N端？
a*c
4 楼
哈哈
P*A
5 楼
SF~
N*e
6 楼
你的问题没有说明白啊。
在哪里表达？真核细胞里表达看显微镜，还是ecoli表达纯化蛋白？
因为我的做的蛋白质是tail anchored。所以我只干过GFP-TMD，表达量超级高。
而且你不能只表达跨膜区的20AA然后就接上了GFP，一般TMD两端边缘都有两性氨基酸，
外围有charge的氨基酸，比如KRDESC这些都要带上点作为缓冲区域，也有可能是引导如
何TMD插入ER的信号。
如果你是为了看confocal检测这段20AA是否为TMD，是否在ER上，那么信号弱就弱吧，
不重要，赶紧做其他的。
如果是在ecoli里表达，我估计会不溶，需要用periplasmic expression。如果不用，
最好接MBP，做成MBP-GFP-TMD。
在哪里表达？真核细胞里表达看显微镜，还是ecoli表达纯化蛋白？
因为我的做的蛋白质是tail anchored。所以我只干过GFP-TMD，表达量超级高。
而且你不能只表达跨膜区的20AA然后就接上了GFP，一般TMD两端边缘都有两性氨基酸，
外围有charge的氨基酸，比如KRDESC这些都要带上点作为缓冲区域，也有可能是引导如
何TMD插入ER的信号。
如果你是为了看confocal检测这段20AA是否为TMD，是否在ER上，那么信号弱就弱吧，
不重要，赶紧做其他的。
如果是在ecoli里表达，我估计会不溶，需要用periplasmic expression。如果不用，
最好接MBP，做成MBP-GFP-TMD。
c*r
7 楼
LOL
y*a
8 楼
小声说，照片
s*k
9 楼
多谢回复
我是真核里慢病毒稳转
蛋白是一次跨膜蛋白
做coIP验证相会作用位点的
胞外和胞内区域都拉不出
后来分别加上跨膜区 就都能拉出来了
所以我想单独做一个跨膜区表达 做coip
想证明是跨膜区相互作用的
看作用强弱 所以表达量应该还是要有的吧
我可能比较傻了 以为跨膜单独拎出来就行
不知道您的建议是如何？
感觉阁下经验很丰富 大谢 期盼建议
【在 N***e 的大作中提到】
: 你的问题没有说明白啊。
: 在哪里表达？真核细胞里表达看显微镜，还是ecoli表达纯化蛋白？
: 因为我的做的蛋白质是tail anchored。所以我只干过GFP-TMD，表达量超级高。
: 而且你不能只表达跨膜区的20AA然后就接上了GFP，一般TMD两端边缘都有两性氨基酸，
: 外围有charge的氨基酸，比如KRDESC这些都要带上点作为缓冲区域，也有可能是引导如
: 何TMD插入ER的信号。
: 如果你是为了看confocal检测这段20AA是否为TMD，是否在ER上，那么信号弱就弱吧，
: 不重要，赶紧做其他的。
: 如果是在ecoli里表达，我估计会不溶，需要用periplasmic expression。如果不用，
: 最好接MBP，做成MBP-GFP-TMD。
我是真核里慢病毒稳转
蛋白是一次跨膜蛋白
做coIP验证相会作用位点的
胞外和胞内区域都拉不出
后来分别加上跨膜区 就都能拉出来了
所以我想单独做一个跨膜区表达 做coip
想证明是跨膜区相互作用的
看作用强弱 所以表达量应该还是要有的吧
我可能比较傻了 以为跨膜单独拎出来就行
不知道您的建议是如何？
感觉阁下经验很丰富 大谢 期盼建议
【在 N***e 的大作中提到】
: 你的问题没有说明白啊。
: 在哪里表达？真核细胞里表达看显微镜，还是ecoli表达纯化蛋白？
: 因为我的做的蛋白质是tail anchored。所以我只干过GFP-TMD，表达量超级高。
: 而且你不能只表达跨膜区的20AA然后就接上了GFP，一般TMD两端边缘都有两性氨基酸，
: 外围有charge的氨基酸，比如KRDESC这些都要带上点作为缓冲区域，也有可能是引导如
: 何TMD插入ER的信号。
: 如果你是为了看confocal检测这段20AA是否为TMD，是否在ER上，那么信号弱就弱吧，
: 不重要，赶紧做其他的。
: 如果是在ecoli里表达，我估计会不溶，需要用periplasmic expression。如果不用，
: 最好接MBP，做成MBP-GFP-TMD。
c*h
10 楼
虽然看过，还是很搞笑
E*r
11 楼
哈哈
【在 P**A 的大作中提到】
: SF~
【在 P**A 的大作中提到】
: SF~
i*l
12 楼
N段或C端加GFP 可能表达效果不同；
基本每个蛋白都不一样，只能试；
只用TM，可能增加非特异性疏水作用，不一定是真信号
【在 s*****k 的大作中提到】
: 多谢回复
: 我是真核里慢病毒稳转
: 蛋白是一次跨膜蛋白
: 做coIP验证相会作用位点的
: 胞外和胞内区域都拉不出
: 后来分别加上跨膜区 就都能拉出来了
: 所以我想单独做一个跨膜区表达 做coip
: 想证明是跨膜区相互作用的
: 看作用强弱 所以表达量应该还是要有的吧
: 我可能比较傻了 以为跨膜单独拎出来就行
基本每个蛋白都不一样，只能试；
只用TM，可能增加非特异性疏水作用，不一定是真信号
【在 s*****k 的大作中提到】
: 多谢回复
: 我是真核里慢病毒稳转
: 蛋白是一次跨膜蛋白
: 做coIP验证相会作用位点的
: 胞外和胞内区域都拉不出
: 后来分别加上跨膜区 就都能拉出来了
: 所以我想单独做一个跨膜区表达 做coip
: 想证明是跨膜区相互作用的
: 看作用强弱 所以表达量应该还是要有的吧
: 我可能比较傻了 以为跨膜单独拎出来就行
p*t
13 楼
每年过年都会有人贴老笑话?
E*r
14 楼
79楼加了水鳖的照片。
自己去百度吧
【在 y*********a 的大作中提到】
: 小声说，照片
自己去百度吧
【在 y*********a 的大作中提到】
: 小声说，照片
N*e
15 楼
我只是做过很多tail anchored protein，有一些经验。
我觉得你说的已经可以充分证明作用区域在TMD。如果现在设想的单纯用TMD的办法又表
达量很低，那么可以考虑swap TMD。就是找另一个在细胞膜上毫不相干的跨膜蛋白质，
挑它的TMD，就找中间20个非常疏水的AA应该没有问题，swap到你蛋白质里，然后做
CoIP。这个不相干的蛋白质作为negative control。这样可以保证你的蛋白质TMD外围
信号不变。
但是要提醒你，如果蛋白A和蛋白B都是跨膜蛋白，CoIP出来的结果可能是假阳性，特别
是你用的detergent只有NP40，并且negative control是cytoplasmic protein，比如
free GFP。那么AB会CoIP，negative control不会。因为NP40是弱detergent，我怀疑
membrane在buffer里被打成了micelle， 所以AB同在micelle里一起被IP。如果用RIPA
buffer你会发现AB不CoIP了，当然你也可以认为RIPA buffer太强了。所以除了CoIP最
好有其他证据证明AB相互作用，比如ubiquitin yeast2hybrid，或是genetics的证据。
当然，你发文章，reviewer很可能不会跟你纠结CoIP的结果。只是如果这个结果很重要
，会影响到你后面的实验假设，你要自己小心。
【在 s*****k 的大作中提到】
: 多谢回复
: 我是真核里慢病毒稳转
: 蛋白是一次跨膜蛋白
: 做coIP验证相会作用位点的
: 胞外和胞内区域都拉不出
: 后来分别加上跨膜区 就都能拉出来了
: 所以我想单独做一个跨膜区表达 做coip
: 想证明是跨膜区相互作用的
: 看作用强弱 所以表达量应该还是要有的吧
: 我可能比较傻了 以为跨膜单独拎出来就行
我觉得你说的已经可以充分证明作用区域在TMD。如果现在设想的单纯用TMD的办法又表
达量很低，那么可以考虑swap TMD。就是找另一个在细胞膜上毫不相干的跨膜蛋白质，
挑它的TMD，就找中间20个非常疏水的AA应该没有问题，swap到你蛋白质里，然后做
CoIP。这个不相干的蛋白质作为negative control。这样可以保证你的蛋白质TMD外围
信号不变。
但是要提醒你，如果蛋白A和蛋白B都是跨膜蛋白，CoIP出来的结果可能是假阳性，特别
是你用的detergent只有NP40，并且negative control是cytoplasmic protein，比如
free GFP。那么AB会CoIP，negative control不会。因为NP40是弱detergent，我怀疑
membrane在buffer里被打成了micelle， 所以AB同在micelle里一起被IP。如果用RIPA
buffer你会发现AB不CoIP了，当然你也可以认为RIPA buffer太强了。所以除了CoIP最
好有其他证据证明AB相互作用，比如ubiquitin yeast2hybrid，或是genetics的证据。
当然，你发文章，reviewer很可能不会跟你纠结CoIP的结果。只是如果这个结果很重要
，会影响到你后面的实验假设，你要自己小心。
【在 s*****k 的大作中提到】
: 多谢回复
: 我是真核里慢病毒稳转
: 蛋白是一次跨膜蛋白
: 做coIP验证相会作用位点的
: 胞外和胞内区域都拉不出
: 后来分别加上跨膜区 就都能拉出来了
: 所以我想单独做一个跨膜区表达 做coip
: 想证明是跨膜区相互作用的
: 看作用强弱 所以表达量应该还是要有的吧
: 我可能比较傻了 以为跨膜单独拎出来就行
B*u
16 楼
闲得蛋痛，
这个以前发过
【在 c*********2 的大作中提到】
: 这是照片标题
这个以前发过
【在 c*********2 的大作中提到】
: 这是照片标题
S*t
17 楼
鲁迅二代
s*k
18 楼
第一个建议真的很有用 我一定试试
A和B确实都是一次跨膜蛋白
我也非常怀疑是否是false positive
确实用的NP40 buffer 提全蛋白（7号针头抽吸）
但现在结果是A和B的全长和cleavage都作用
而且cleavage要比全长作用强很多 且cleavage在胞内部分
所以我想这样B cleavage是否就不算膜蛋白 也就不行成micelle
为了避免这种可能 所以做截段看作用位点 这样也能抛开膜蛋白特性
不管如何还是希望尽快确定是false还是true
RIPA
【在 N***e 的大作中提到】
: 我只是做过很多tail anchored protein，有一些经验。
: 我觉得你说的已经可以充分证明作用区域在TMD。如果现在设想的单纯用TMD的办法又表
: 达量很低，那么可以考虑swap TMD。就是找另一个在细胞膜上毫不相干的跨膜蛋白质，
: 挑它的TMD，就找中间20个非常疏水的AA应该没有问题，swap到你蛋白质里，然后做
: CoIP。这个不相干的蛋白质作为negative control。这样可以保证你的蛋白质TMD外围
: 信号不变。
: 但是要提醒你，如果蛋白A和蛋白B都是跨膜蛋白，CoIP出来的结果可能是假阳性，特别
: 是你用的detergent只有NP40，并且negative control是cytoplasmic protein，比如
: free GFP。那么AB会CoIP，negative control不会。因为NP40是弱detergent，我怀疑
: membrane在buffer里被打成了micelle， 所以AB同在micelle里一起被IP。如果用RIPA
A和B确实都是一次跨膜蛋白
我也非常怀疑是否是false positive
确实用的NP40 buffer 提全蛋白（7号针头抽吸）
但现在结果是A和B的全长和cleavage都作用
而且cleavage要比全长作用强很多 且cleavage在胞内部分
所以我想这样B cleavage是否就不算膜蛋白 也就不行成micelle
为了避免这种可能 所以做截段看作用位点 这样也能抛开膜蛋白特性
不管如何还是希望尽快确定是false还是true
RIPA
【在 N***e 的大作中提到】
: 我只是做过很多tail anchored protein，有一些经验。
: 我觉得你说的已经可以充分证明作用区域在TMD。如果现在设想的单纯用TMD的办法又表
: 达量很低，那么可以考虑swap TMD。就是找另一个在细胞膜上毫不相干的跨膜蛋白质，
: 挑它的TMD，就找中间20个非常疏水的AA应该没有问题，swap到你蛋白质里，然后做
: CoIP。这个不相干的蛋白质作为negative control。这样可以保证你的蛋白质TMD外围
: 信号不变。
: 但是要提醒你，如果蛋白A和蛋白B都是跨膜蛋白，CoIP出来的结果可能是假阳性，特别
: 是你用的detergent只有NP40，并且negative control是cytoplasmic protein，比如
: free GFP。那么AB会CoIP，negative control不会。因为NP40是弱detergent，我怀疑
: membrane在buffer里被打成了micelle， 所以AB同在micelle里一起被IP。如果用RIPA
f*i
19 楼
haha
p*f
20 楼
水鳖是不是 snap turtle?
【在 E*******r 的大作中提到】
: 献给勤劳的梭影，和派慈上的愤丝
: 童年-----宠物篇
: 我小的时候不去托儿所，经常早晨吃完饭就出去玩，中午饭也不吃，直到天黑后才回
: 家，我爸妈对我一天的所作所为基本上不闻不问。有时候打架了，被人拎去见家长，
: 我爸就说：“怎么能打架呢？晚上我要教育教育他。”结果晚上平安无事，后来我爸告
: 诉我，他小时候也喜欢打架，我奶奶为此打过他，己所不欲勿施于人。由此可见，小时
: 候我有极大的自由度。
: 我在一个很大的院子里长大，院子里有很多大树，主要有榆树、柳树、槐树、松树和钻
: 天杨，榆树钱和槐树花都很好吃。还有数十颗品种不良的果树，只有樱桃尚可入口，但
: 要用心找才能有收获，我们称其为“逮樱桃”。院子里有很多灌木，主要是丁香、迎春
【在 E*******r 的大作中提到】
: 献给勤劳的梭影，和派慈上的愤丝
: 童年-----宠物篇
: 我小的时候不去托儿所，经常早晨吃完饭就出去玩，中午饭也不吃，直到天黑后才回
: 家，我爸妈对我一天的所作所为基本上不闻不问。有时候打架了，被人拎去见家长，
: 我爸就说：“怎么能打架呢？晚上我要教育教育他。”结果晚上平安无事，后来我爸告
: 诉我，他小时候也喜欢打架，我奶奶为此打过他，己所不欲勿施于人。由此可见，小时
: 候我有极大的自由度。
: 我在一个很大的院子里长大，院子里有很多大树，主要有榆树、柳树、槐树、松树和钻
: 天杨，榆树钱和槐树花都很好吃。还有数十颗品种不良的果树，只有樱桃尚可入口，但
: 要用心找才能有收获，我们称其为“逮樱桃”。院子里有很多灌木，主要是丁香、迎春
c*p
21 楼
lol
仔细看看居然不是印度人
仔细看看居然不是印度人
E*r
22 楼
论规模，我这是“万草原”也不止。
【在 S********t 的大作中提到】
: 鲁迅二代
【在 S********t 的大作中提到】
: 鲁迅二代
s*9
23 楼
蛋疼
P*2
24 楼
想起了百草园和三味书屋。。。
看来你打小就有养鸟的天赋啊。我记得我小的时候逮了一只小麻雀想自己养，大人说逮
来的鸟都养不活，我不信。给放上水和小米，小东西坚决不吃不喝绝食死了。以后再没
敢养过鸟。。。
【在 E*******r 的大作中提到】
: 献给勤劳的梭影，和派慈上的愤丝
: 童年-----宠物篇
: 我小的时候不去托儿所，经常早晨吃完饭就出去玩，中午饭也不吃，直到天黑后才回
: 家，我爸妈对我一天的所作所为基本上不闻不问。有时候打架了，被人拎去见家长，
: 我爸就说：“怎么能打架呢？晚上我要教育教育他。”结果晚上平安无事，后来我爸告
: 诉我，他小时候也喜欢打架，我奶奶为此打过他，己所不欲勿施于人。由此可见，小时
: 候我有极大的自由度。
: 我在一个很大的院子里长大，院子里有很多大树，主要有榆树、柳树、槐树、松树和钻
: 天杨，榆树钱和槐树花都很好吃。还有数十颗品种不良的果树，只有樱桃尚可入口，但
: 要用心找才能有收获，我们称其为“逮樱桃”。院子里有很多灌木，主要是丁香、迎春
看来你打小就有养鸟的天赋啊。我记得我小的时候逮了一只小麻雀想自己养，大人说逮
来的鸟都养不活，我不信。给放上水和小米，小东西坚决不吃不喝绝食死了。以后再没
敢养过鸟。。。
【在 E*******r 的大作中提到】
: 献给勤劳的梭影，和派慈上的愤丝
: 童年-----宠物篇
: 我小的时候不去托儿所，经常早晨吃完饭就出去玩，中午饭也不吃，直到天黑后才回
: 家，我爸妈对我一天的所作所为基本上不闻不问。有时候打架了，被人拎去见家长，
: 我爸就说：“怎么能打架呢？晚上我要教育教育他。”结果晚上平安无事，后来我爸告
: 诉我，他小时候也喜欢打架，我奶奶为此打过他，己所不欲勿施于人。由此可见，小时
: 候我有极大的自由度。
: 我在一个很大的院子里长大，院子里有很多大树，主要有榆树、柳树、槐树、松树和钻
: 天杨，榆树钱和槐树花都很好吃。还有数十颗品种不良的果树，只有樱桃尚可入口，但
: 要用心找才能有收获，我们称其为“逮樱桃”。院子里有很多灌木，主要是丁香、迎春
E*r
25 楼
水鳖是甲虫，有很多种，我养的是黄边水鳖的一种，百度有图。
【在 p********f 的大作中提到】
: 水鳖是不是 snap turtle?
【在 p********f 的大作中提到】
: 水鳖是不是 snap turtle?
E*r
26 楼
看来我是受鲁迅影响颇深。。。
【在 P******2 的大作中提到】
: 想起了百草园和三味书屋。。。
: 看来你打小就有养鸟的天赋啊。我记得我小的时候逮了一只小麻雀想自己养，大人说逮
: 来的鸟都养不活，我不信。给放上水和小米，小东西坚决不吃不喝绝食死了。以后再没
: 敢养过鸟。。。
【在 P******2 的大作中提到】
: 想起了百草园和三味书屋。。。
: 看来你打小就有养鸟的天赋啊。我记得我小的时候逮了一只小麻雀想自己养，大人说逮
: 来的鸟都养不活，我不信。给放上水和小米，小东西坚决不吃不喝绝食死了。以后再没
: 敢养过鸟。。。
f*y
27 楼
你太牛了！45度角仰望...
这样的童年太有意思了~
【在 E*******r 的大作中提到】
: 献给勤劳的梭影，和派慈上的愤丝
: 童年-----宠物篇
: 我小的时候不去托儿所，经常早晨吃完饭就出去玩，中午饭也不吃，直到天黑后才回
: 家，我爸妈对我一天的所作所为基本上不闻不问。有时候打架了，被人拎去见家长，
: 我爸就说：“怎么能打架呢？晚上我要教育教育他。”结果晚上平安无事，后来我爸告
: 诉我，他小时候也喜欢打架，我奶奶为此打过他，己所不欲勿施于人。由此可见，小时
: 候我有极大的自由度。
: 我在一个很大的院子里长大，院子里有很多大树，主要有榆树、柳树、槐树、松树和钻
: 天杨，榆树钱和槐树花都很好吃。还有数十颗品种不良的果树，只有樱桃尚可入口，但
: 要用心找才能有收获，我们称其为“逮樱桃”。院子里有很多灌木，主要是丁香、迎春
这样的童年太有意思了~
【在 E*******r 的大作中提到】
: 献给勤劳的梭影，和派慈上的愤丝
: 童年-----宠物篇
: 我小的时候不去托儿所，经常早晨吃完饭就出去玩，中午饭也不吃，直到天黑后才回
: 家，我爸妈对我一天的所作所为基本上不闻不问。有时候打架了，被人拎去见家长，
: 我爸就说：“怎么能打架呢？晚上我要教育教育他。”结果晚上平安无事，后来我爸告
: 诉我，他小时候也喜欢打架，我奶奶为此打过他，己所不欲勿施于人。由此可见，小时
: 候我有极大的自由度。
: 我在一个很大的院子里长大，院子里有很多大树，主要有榆树、柳树、槐树、松树和钻
: 天杨，榆树钱和槐树花都很好吃。还有数十颗品种不良的果树，只有樱桃尚可入口，但
: 要用心找才能有收获，我们称其为“逮樱桃”。院子里有很多灌木，主要是丁香、迎春
E*r
28 楼
嘿嘿，这只是养殖童年，我还有种植童年，土游戏童年什么的。
【在 f********y 的大作中提到】
: 你太牛了！45度角仰望...
: 这样的童年太有意思了~
【在 f********y 的大作中提到】
: 你太牛了！45度角仰望...
: 这样的童年太有意思了~
A*R
29 楼
这种文章要静下心来慢慢品才行，像俺们边上班边偷偷灌水不适合读。
楼主要支持Ralph 妈的话该奔了吧？！
楼主要支持Ralph 妈的话该奔了吧？！
E*r
30 楼
这个算强烈支持了，同时强烈要求当选的“四大才子”奔！
【在 A*********R 的大作中提到】
: 这种文章要静下心来慢慢品才行，像俺们边上班边偷偷灌水不适合读。
: 楼主要支持Ralph 妈的话该奔了吧？！
【在 A*********R 的大作中提到】
: 这种文章要静下心来慢慢品才行，像俺们边上班边偷偷灌水不适合读。
: 楼主要支持Ralph 妈的话该奔了吧？！
a*y
31 楼
有意识流风范.
【在 E*******r 的大作中提到】
: 献给勤劳的梭影，和派慈上的愤丝
: 童年-----宠物篇
: 我小的时候不去托儿所，经常早晨吃完饭就出去玩，中午饭也不吃，直到天黑后才回
: 家，我爸妈对我一天的所作所为基本上不闻不问。有时候打架了，被人拎去见家长，
: 我爸就说：“怎么能打架呢？晚上我要教育教育他。”结果晚上平安无事，后来我爸告
: 诉我，他小时候也喜欢打架，我奶奶为此打过他，己所不欲勿施于人。由此可见，小时
: 候我有极大的自由度。
: 我在一个很大的院子里长大，院子里有很多大树，主要有榆树、柳树、槐树、松树和钻
: 天杨，榆树钱和槐树花都很好吃。还有数十颗品种不良的果树，只有樱桃尚可入口，但
: 要用心找才能有收获，我们称其为“逮樱桃”。院子里有很多灌木，主要是丁香、迎春
【在 E*******r 的大作中提到】
: 献给勤劳的梭影，和派慈上的愤丝
: 童年-----宠物篇
: 我小的时候不去托儿所，经常早晨吃完饭就出去玩，中午饭也不吃，直到天黑后才回
: 家，我爸妈对我一天的所作所为基本上不闻不问。有时候打架了，被人拎去见家长，
: 我爸就说：“怎么能打架呢？晚上我要教育教育他。”结果晚上平安无事，后来我爸告
: 诉我，他小时候也喜欢打架，我奶奶为此打过他，己所不欲勿施于人。由此可见，小时
: 候我有极大的自由度。
: 我在一个很大的院子里长大，院子里有很多大树，主要有榆树、柳树、槐树、松树和钻
: 天杨，榆树钱和槐树花都很好吃。还有数十颗品种不良的果树，只有樱桃尚可入口，但
: 要用心找才能有收获，我们称其为“逮樱桃”。院子里有很多灌木，主要是丁香、迎春
A*R
32 楼
你也是当之无愧的才子啊，让你的粉丝光闻其才艺，不能目睹才子容颜于心何忍,于心
何甘！！俺们WS 之人更是贼心不死啊。
还不如趁今天这大奔的好日子一起奔了！！
【在 E*******r 的大作中提到】
: 这个算强烈支持了，同时强烈要求当选的“四大才子”奔！
何甘！！俺们WS 之人更是贼心不死啊。
还不如趁今天这大奔的好日子一起奔了！！
【在 E*******r 的大作中提到】
: 这个算强烈支持了，同时强烈要求当选的“四大才子”奔！
A*R
33 楼
要大声说
【在 y*********a 的大作中提到】
: 小声说，照片
【在 y*********a 的大作中提到】
: 小声说，照片
E*r
34 楼
完蛋了，不知道意识流怎么回事。。。
【在 a***y 的大作中提到】
: 有意识流风范.
【在 a***y 的大作中提到】
: 有意识流风范.
E*r
35 楼
以前解释过了，我有江湖恩怨，仇家要来寻仇的，多一事不如少一事，因此不能奔。
【在 A*********R 的大作中提到】
: 你也是当之无愧的才子啊，让你的粉丝光闻其才艺，不能目睹才子容颜于心何忍,于心
: 何甘！！俺们WS 之人更是贼心不死啊。
: 还不如趁今天这大奔的好日子一起奔了！！
【在 A*********R 的大作中提到】
: 你也是当之无愧的才子啊，让你的粉丝光闻其才艺，不能目睹才子容颜于心何忍,于心
: 何甘！！俺们WS 之人更是贼心不死啊。
: 还不如趁今天这大奔的好日子一起奔了！！
w*w
36 楼
多謝大鑼同學～～～
咳咳，不過你答應過我的事，還是要做的，一篇文章可打發不了我和全體fans哦～～～
咳咳，不過你答應過我的事，還是要做的，一篇文章可打發不了我和全體fans哦～～～
l*o
37 楼
养东西果然也是需要天赋啊。
我小时候养的东东就从来没养活过，残念。。。
我小时候养的东东就从来没养活过，残念。。。
E*r
38 楼
问题是，我答应过吗？我好像什么都没答应啊！
【在 w****w 的大作中提到】
: 多謝大鑼同學～～～
: 咳咳，不過你答應過我的事，還是要做的，一篇文章可打發不了我和全體fans哦～～～
【在 w****w 的大作中提到】
: 多謝大鑼同學～～～
: 咳咳，不過你答應過我的事，還是要做的，一篇文章可打發不了我和全體fans哦～～～
E*r
39 楼
这个。。。只需要激情。经我手的东西，除了逃走和被放走的，没有善终的，咳咳。
【在 l*****o 的大作中提到】
: 养东西果然也是需要天赋啊。
: 我小时候养的东东就从来没养活过，残念。。。
【在 l*****o 的大作中提到】
: 养东西果然也是需要天赋啊。
: 我小时候养的东东就从来没养活过，残念。。。
A*R
40 楼
9494
【在 w****w 的大作中提到】
: 多謝大鑼同學～～～
: 咳咳，不過你答應過我的事，還是要做的，一篇文章可打發不了我和全體fans哦～～～
【在 w****w 的大作中提到】
: 多謝大鑼同學～～～
: 咳咳，不過你答應過我的事，還是要做的，一篇文章可打發不了我和全體fans哦～～～
P*A
41 楼
RE
粉丝来报道
～～
【在 A*********R 的大作中提到】
: 9494
粉丝来报道
～～
【在 A*********R 的大作中提到】
: 9494
A*R
42 楼
俺们是new cop, 不知这买买提还是另一江湖。
那闪奔？那发私人信箱如何？
【在 E*******r 的大作中提到】
: 以前解释过了，我有江湖恩怨，仇家要来寻仇的，多一事不如少一事，因此不能奔。
那闪奔？那发私人信箱如何？
【在 E*******r 的大作中提到】
: 以前解释过了，我有江湖恩怨，仇家要来寻仇的，多一事不如少一事，因此不能奔。
w*w
43 楼
你是要我點明嗎---------
【在 E*******r 的大作中提到】
: 问题是，我答应过吗？我好像什么都没答应啊！
【在 E*******r 的大作中提到】
: 问题是，我答应过吗？我好像什么都没答应啊！
P*A
44 楼
私奔好，我也要看
【在 A*********R 的大作中提到】
: 俺们是new cop, 不知这买买提还是另一江湖。
: 那闪奔？那发私人信箱如何？
【在 A*********R 的大作中提到】
: 俺们是new cop, 不知这买买提还是另一江湖。
: 那闪奔？那发私人信箱如何？
A*R
45 楼
Ralph 妈，那四大奔定了没？不奔把他们的奖励包子拿来讲那些本得如何？
【在 w****w 的大作中提到】
: 多謝大鑼同學～～～
: 咳咳，不過你答應過我的事，還是要做的，一篇文章可打發不了我和全體fans哦～～～
【在 w****w 的大作中提到】
: 多謝大鑼同學～～～
: 咳咳，不過你答應過我的事，還是要做的，一篇文章可打發不了我和全體fans哦～～～
A*R
46 楼
你也私奔个
【在 P**A 的大作中提到】
: 私奔好，我也要看
【在 P**A 的大作中提到】
: 私奔好，我也要看
w*w
47 楼
你居然用活青蛙喂蟲，太殘忍了....
【在 E*******r 的大作中提到】
: 这个。。。只需要激情。经我手的东西，除了逃走和被放走的，没有善终的，咳咳。
【在 E*******r 的大作中提到】
: 这个。。。只需要激情。经我手的东西，除了逃走和被放走的，没有善终的，咳咳。
E*r
48 楼
你的点明是谣言，肯定了。
【在 w****w 的大作中提到】
: 你是要我點明嗎---------
【在 w****w 的大作中提到】
: 你是要我點明嗎---------
w*w
49 楼
辣媽在統計獲獎人數和包子分配呢，今晚應該可以出來了吧
【在 A*********R 的大作中提到】
: Ralph 妈，那四大奔定了没？不奔把他们的奖励包子拿来讲那些本得如何？
【在 A*********R 的大作中提到】
: Ralph 妈，那四大奔定了没？不奔把他们的奖励包子拿来讲那些本得如何？
E*r
50 楼
买卖提是最险恶的江湖，因为与全世界的脑残变态零距离啊！
【在 A*********R 的大作中提到】
: 俺们是new cop, 不知这买买提还是另一江湖。
: 那闪奔？那发私人信箱如何？
【在 A*********R 的大作中提到】
: 俺们是new cop, 不知这买买提还是另一江湖。
: 那闪奔？那发私人信箱如何？
w*w
51 楼
我象是撒網不捉魚的人麼，唉... ...
【在 E*******r 的大作中提到】
: 你的点明是谣言，肯定了。
【在 E*******r 的大作中提到】
: 你的点明是谣言，肯定了。
P*A
52 楼
RE...
【在 E*******r 的大作中提到】
: 买卖提是最险恶的江湖，因为与全世界的脑残变态零距离啊！
【在 E*******r 的大作中提到】
: 买卖提是最险恶的江湖，因为与全世界的脑残变态零距离啊！
E*r
53 楼
初中上生物课，做脊髓反射实验，全年级的实验用品都是我提供的，一人到郊外搞定，
课上亲手剪下。。。不过那之后我没再主动杀过生了。
【在 w****w 的大作中提到】
: 你居然用活青蛙喂蟲，太殘忍了....
课上亲手剪下。。。不过那之后我没再主动杀过生了。
【在 w****w 的大作中提到】
: 你居然用活青蛙喂蟲，太殘忍了....
s*l
54 楼
哇～～～你比我养的东西还多哈
A*R
55 楼
那周末就来盯着啦
【在 w****w 的大作中提到】
: 辣媽在統計獲獎人數和包子分配呢，今晚應該可以出來了吧
【在 w****w 的大作中提到】
: 辣媽在統計獲獎人數和包子分配呢，今晚應該可以出來了吧
E*r
56 楼
写写吧？否则对不起大家
【在 s****l 的大作中提到】
: 哇～～～你比我养的东西还多哈
【在 s****l 的大作中提到】
: 哇～～～你比我养的东西还多哈
A*R
57 楼
买买提垃圾变态是不少，但感觉pets 还是相对的一片净土。
【在 E*******r 的大作中提到】
: 买卖提是最险恶的江湖，因为与全世界的脑残变态零距离啊！
【在 E*******r 的大作中提到】
: 买卖提是最险恶的江湖，因为与全世界的脑残变态零距离啊！
f*y
58 楼
其实我对你的童年——种植篇、土游戏篇也很好奇，可惜这里是宠物版。有没有可能在
别的地儿写啊？
【在 E*******r 的大作中提到】
: 写写吧？否则对不起大家
别的地儿写啊？
【在 E*******r 的大作中提到】
: 写写吧？否则对不起大家
E*r
59 楼
随口说说的，现在没有机缘。
【在 f********y 的大作中提到】
: 其实我对你的童年——种植篇、土游戏篇也很好奇，可惜这里是宠物版。有没有可能在
: 别的地儿写啊？
【在 f********y 的大作中提到】
: 其实我对你的童年——种植篇、土游戏篇也很好奇，可惜这里是宠物版。有没有可能在
: 别的地儿写啊？
w*w
60 楼
我是流著淚讀完永遠寶吉的，皆因想起我養過的最後一隻鳥--一隻會叫我名字也祗會叫
我名字的畫眉。1990年的冬天，牠因為我的貪玩和漠視，在叫了幾百聲我的名字後，饑
寒交迫死在陽台上。愧疚了20年，再沒養過任何雀鳥。如果當時牠不是被困在籠中，一
定不會被我害死。
現在讀你這篇童年回憶，我找回一點平衡，原來你也曾是殺手... ...
【在 E*******r 的大作中提到】
: 献给勤劳的梭影，和派慈上的愤丝
: 童年-----宠物篇
: 我小的时候不去托儿所，经常早晨吃完饭就出去玩，中午饭也不吃，直到天黑后才回
: 家，我爸妈对我一天的所作所为基本上不闻不问。有时候打架了，被人拎去见家长，
: 我爸就说：“怎么能打架呢？晚上我要教育教育他。”结果晚上平安无事，后来我爸告
: 诉我，他小时候也喜欢打架，我奶奶为此打过他，己所不欲勿施于人。由此可见，小时
: 候我有极大的自由度。
: 我在一个很大的院子里长大，院子里有很多大树，主要有榆树、柳树、槐树、松树和钻
: 天杨，榆树钱和槐树花都很好吃。还有数十颗品种不良的果树，只有樱桃尚可入口，但
: 要用心找才能有收获，我们称其为“逮樱桃”。院子里有很多灌木，主要是丁香、迎春
我名字的畫眉。1990年的冬天，牠因為我的貪玩和漠視，在叫了幾百聲我的名字後，饑
寒交迫死在陽台上。愧疚了20年，再沒養過任何雀鳥。如果當時牠不是被困在籠中，一
定不會被我害死。
現在讀你這篇童年回憶，我找回一點平衡，原來你也曾是殺手... ...
【在 E*******r 的大作中提到】
: 献给勤劳的梭影，和派慈上的愤丝
: 童年-----宠物篇
: 我小的时候不去托儿所，经常早晨吃完饭就出去玩，中午饭也不吃，直到天黑后才回
: 家，我爸妈对我一天的所作所为基本上不闻不问。有时候打架了，被人拎去见家长，
: 我爸就说：“怎么能打架呢？晚上我要教育教育他。”结果晚上平安无事，后来我爸告
: 诉我，他小时候也喜欢打架，我奶奶为此打过他，己所不欲勿施于人。由此可见，小时
: 候我有极大的自由度。
: 我在一个很大的院子里长大，院子里有很多大树，主要有榆树、柳树、槐树、松树和钻
: 天杨，榆树钱和槐树花都很好吃。还有数十颗品种不良的果树，只有樱桃尚可入口，但
: 要用心找才能有收获，我们称其为“逮樱桃”。院子里有很多灌木，主要是丁香、迎春
w*w
61 楼
作為生物科代表，我以權謀私選死魚來解剖...
【在 E*******r 的大作中提到】
: 初中上生物课，做脊髓反射实验，全年级的实验用品都是我提供的，一人到郊外搞定，
: 课上亲手剪下。。。不过那之后我没再主动杀过生了。
【在 E*******r 的大作中提到】
: 初中上生物课，做脊髓反射实验，全年级的实验用品都是我提供的，一人到郊外搞定，
: 课上亲手剪下。。。不过那之后我没再主动杀过生了。
E*r
62 楼
画眉也会叫人名？这个没听说过，你水平很好哇。我也养过画眉，养活不难，养好太难
了，我水平差的远了。
【在 w****w 的大作中提到】
: 我是流著淚讀完永遠寶吉的，皆因想起我養過的最後一隻鳥--一隻會叫我名字也祗會叫
: 我名字的畫眉。1990年的冬天，牠因為我的貪玩和漠視，在叫了幾百聲我的名字後，饑
: 寒交迫死在陽台上。愧疚了20年，再沒養過任何雀鳥。如果當時牠不是被困在籠中，一
: 定不會被我害死。
: 現在讀你這篇童年回憶，我找回一點平衡，原來你也曾是殺手... ...
了，我水平差的远了。
【在 w****w 的大作中提到】
: 我是流著淚讀完永遠寶吉的，皆因想起我養過的最後一隻鳥--一隻會叫我名字也祗會叫
: 我名字的畫眉。1990年的冬天，牠因為我的貪玩和漠視，在叫了幾百聲我的名字後，饑
: 寒交迫死在陽台上。愧疚了20年，再沒養過任何雀鳥。如果當時牠不是被困在籠中，一
: 定不會被我害死。
: 現在讀你這篇童年回憶，我找回一點平衡，原來你也曾是殺手... ...
w*w
63 楼
你這個青蛙，讓我想起小學那些頑劣的男生，抓青蛙來剝皮截肢。本人上陣打退這些人
搶過來，但小青蛙最後還是...
【在 E*******r 的大作中提到】
: 初中上生物课，做脊髓反射实验，全年级的实验用品都是我提供的，一人到郊外搞定，
: 课上亲手剪下。。。不过那之后我没再主动杀过生了。
搶過來，但小青蛙最後還是...
【在 E*******r 的大作中提到】
: 初中上生物课，做脊髓反射实验，全年级的实验用品都是我提供的，一人到郊外搞定，
: 课上亲手剪下。。。不过那之后我没再主动杀过生了。
s*l
64 楼
等偶有时间哈，得和你的错开
【在 E*******r 的大作中提到】
: 写写吧？否则对不起大家
【在 E*******r 的大作中提到】
: 写写吧？否则对不起大家
E*r
65 楼
你喜欢生物？哈哈，同好。一次我与一个马姓同学在课堂上打起来了，生物老师用教鞭
打他脑袋，没打我，结果他哭了，主要是委屈。另一个生物老师带我上山采过标本，给
自然博物馆采的。
【在 w****w 的大作中提到】
: 作為生物科代表，我以權謀私選死魚來解剖...
打他脑袋，没打我，结果他哭了，主要是委屈。另一个生物老师带我上山采过标本，给
自然博物馆采的。
【在 w****w 的大作中提到】
: 作為生物科代表，我以權謀私選死魚來解剖...
w*w
66 楼
我養過畫眉，鸚鵡，綠豆雀等等不下10隻吧，只有這隻畫眉會叫我名字，而且是自學的
。牠聽到我媽日日喊我名字後，沒兩個月就學會了，非常聰明的一隻鳥兒，卻偏偏死在
我手下...
K，你又讓我...了，不奔就太對不起我了，更難以平民憤啊
【在 E*******r 的大作中提到】
: 画眉也会叫人名？这个没听说过，你水平很好哇。我也养过画眉，养活不难，养好太难
: 了，我水平差的远了。
。牠聽到我媽日日喊我名字後，沒兩個月就學會了，非常聰明的一隻鳥兒，卻偏偏死在
我手下...
K，你又讓我...了，不奔就太對不起我了，更難以平民憤啊
【在 E*******r 的大作中提到】
: 画眉也会叫人名？这个没听说过，你水平很好哇。我也养过画眉，养活不难，养好太难
: 了，我水平差的远了。
w*w
67 楼
小時候曾經想讀生物讀醫科，日後去做MSF之類的。但在中學上過幾堂解剖課後，發現
自己沒這個勇氣，從此斷了這念頭。
【在 E*******r 的大作中提到】
: 你喜欢生物？哈哈，同好。一次我与一个马姓同学在课堂上打起来了，生物老师用教鞭
: 打他脑袋，没打我，结果他哭了，主要是委屈。另一个生物老师带我上山采过标本，给
: 自然博物馆采的。
自己沒這個勇氣，從此斷了這念頭。
【在 E*******r 的大作中提到】
: 你喜欢生物？哈哈，同好。一次我与一个马姓同学在课堂上打起来了，生物老师用教鞭
: 打他脑袋，没打我，结果他哭了，主要是委屈。另一个生物老师带我上山采过标本，给
: 自然博物馆采的。
E*r
68 楼
我是一直想学生物的，动物和昆虫都行，高考抱志愿时招到老师家长一致反对，只好罢
了。
【在 w****w 的大作中提到】
: 小時候曾經想讀生物讀醫科，日後去做MSF之類的。但在中學上過幾堂解剖課後，發現
: 自己沒這個勇氣，從此斷了這念頭。
了。
【在 w****w 的大作中提到】
: 小時候曾經想讀生物讀醫科，日後去做MSF之類的。但在中學上過幾堂解剖課後，發現
: 自己沒這個勇氣，從此斷了這念頭。
N*E
69 楼
进来膜拜楼主
E*r
70 楼
谢谢！
【在 N*******E 的大作中提到】
: 进来膜拜楼主
【在 N*******E 的大作中提到】
: 进来膜拜楼主
E*r
71 楼
绿豆雀？是绣眼或白眼吗？
我的一只手喂的八哥，只听到别人拍门叫我名字一两次，就会叫我了，早晨天一亮，就
出来拔我头发，同时叫我名字。
我上文力“雀”都发“巧”音，有的还带儿化音，如“三道眉儿”。
【在 w****w 的大作中提到】
: 我養過畫眉，鸚鵡，綠豆雀等等不下10隻吧，只有這隻畫眉會叫我名字，而且是自學的
: 。牠聽到我媽日日喊我名字後，沒兩個月就學會了，非常聰明的一隻鳥兒，卻偏偏死在
: 我手下...
: K，你又讓我...了，不奔就太對不起我了，更難以平民憤啊
我的一只手喂的八哥，只听到别人拍门叫我名字一两次，就会叫我了，早晨天一亮，就
出来拔我头发，同时叫我名字。
我上文力“雀”都发“巧”音，有的还带儿化音，如“三道眉儿”。
【在 w****w 的大作中提到】
: 我養過畫眉，鸚鵡，綠豆雀等等不下10隻吧，只有這隻畫眉會叫我名字，而且是自學的
: 。牠聽到我媽日日喊我名字後，沒兩個月就學會了，非常聰明的一隻鳥兒，卻偏偏死在
: 我手下...
: K，你又讓我...了，不奔就太對不起我了，更難以平民憤啊
N*E
72 楼
请奔照片以答谢众多粉丝长久以来得支持
【在 E*******r 的大作中提到】
: 谢谢！
【在 E*******r 的大作中提到】
: 谢谢！
w*w
73 楼
綉眼，相思，綠豆雀似乎都指向同一種鳥吧
“雀”都发“巧”音 , 哪裡的方言？ 東北？
【在 E*******r 的大作中提到】
: 绿豆雀？是绣眼或白眼吗？
: 我的一只手喂的八哥，只听到别人拍门叫我名字一两次，就会叫我了，早晨天一亮，就
: 出来拔我头发，同时叫我名字。
: 我上文力“雀”都发“巧”音，有的还带儿化音，如“三道眉儿”。
“雀”都发“巧”音 , 哪裡的方言？ 東北？
【在 E*******r 的大作中提到】
: 绿豆雀？是绣眼或白眼吗？
: 我的一只手喂的八哥，只听到别人拍门叫我名字一两次，就会叫我了，早晨天一亮，就
: 出来拔我头发，同时叫我名字。
: 我上文力“雀”都发“巧”音，有的还带儿化音，如“三道眉儿”。
l*e
74 楼
写得真好。
w*w
75 楼
請樓主徇眾要求！！
【在 N*******E 的大作中提到】
: 请奔照片以答谢众多粉丝长久以来得支持
【在 N*******E 的大作中提到】
: 请奔照片以答谢众多粉丝长久以来得支持
m*u
76 楼
我捡到过小麻雀，给米不吃。大人们也说养不活，父母帮忙找个梯子给放回窝里了。结
果它父母不要它了，还是饿死了。
【在 P******2 的大作中提到】
: 想起了百草园和三味书屋。。。
: 看来你打小就有养鸟的天赋啊。我记得我小的时候逮了一只小麻雀想自己养，大人说逮
: 来的鸟都养不活，我不信。给放上水和小米，小东西坚决不吃不喝绝食死了。以后再没
: 敢养过鸟。。。
果它父母不要它了，还是饿死了。
【在 P******2 的大作中提到】
: 想起了百草园和三味书屋。。。
: 看来你打小就有养鸟的天赋啊。我记得我小的时候逮了一只小麻雀想自己养，大人说逮
: 来的鸟都养不活，我不信。给放上水和小米，小东西坚决不吃不喝绝食死了。以后再没
: 敢养过鸟。。。
s*t
77 楼
牛人原来打小就牛！
A*R
78 楼
RE...
【在 N*******E 的大作中提到】
: 请奔照片以答谢众多粉丝长久以来得支持
【在 N*******E 的大作中提到】
: 请奔照片以答谢众多粉丝长久以来得支持
E*r
79 楼
绣眼和相思可不是一种，相思鸟比绣眼大很多，有红黄色，绣眼只有黄绿色。绿豆雀第
一次听说，现在不知是什么了。
自己猜吧。
【在 w****w 的大作中提到】
: 綉眼，相思，綠豆雀似乎都指向同一種鳥吧
: “雀”都发“巧”音 , 哪裡的方言？ 東北？
一次听说，现在不知是什么了。
自己猜吧。
【在 w****w 的大作中提到】
: 綉眼，相思，綠豆雀似乎都指向同一種鳥吧
: “雀”都发“巧”音 , 哪裡的方言？ 東北？
E*r
80 楼
谢了！
【在 l********e 的大作中提到】
: 写得真好。
【在 l********e 的大作中提到】
: 写得真好。
E*r
81 楼
小麻雀都是养得活的，倒是成年麻雀不容易养活，不过我也能养活，开始要放在暗处，
扒开嘴塞食物，然后就可以了。
【在 m**u 的大作中提到】
: 我捡到过小麻雀，给米不吃。大人们也说养不活，父母帮忙找个梯子给放回窝里了。结
: 果它父母不要它了，还是饿死了。
扒开嘴塞食物，然后就可以了。
【在 m**u 的大作中提到】
: 我捡到过小麻雀，给米不吃。大人们也说养不活，父母帮忙找个梯子给放回窝里了。结
: 果它父母不要它了，还是饿死了。
E*r
82 楼
我血债累累啊，还牛？
【在 s*******t 的大作中提到】
: 牛人原来打小就牛！
【在 s*******t 的大作中提到】
: 牛人原来打小就牛！
w*w
83 楼
綠豆雀是泛指相思，秀眼等一類身形小巧的綠色雀鳥，對於我來講是這樣啦
本想偷偷懶，看來還是要放狗...
【在 E*******r 的大作中提到】
: 绣眼和相思可不是一种，相思鸟比绣眼大很多，有红黄色，绣眼只有黄绿色。绿豆雀第
: 一次听说，现在不知是什么了。
: 自己猜吧。
本想偷偷懶，看來還是要放狗...
【在 E*******r 的大作中提到】
: 绣眼和相思可不是一种，相思鸟比绣眼大很多，有红黄色，绣眼只有黄绿色。绿豆雀第
: 一次听说，现在不知是什么了。
: 自己猜吧。
E*r
84 楼
绿豆雀是绣眼，刚百度了一下。相思与画眉是近亲，与绿豆差得挺远的。
【在 w****w 的大作中提到】
: 綠豆雀是泛指相思，秀眼等一類身形小巧的綠色雀鳥，對於我來講是這樣啦
: 本想偷偷懶，看來還是要放狗...
【在 w****w 的大作中提到】
: 綠豆雀是泛指相思，秀眼等一類身形小巧的綠色雀鳥，對於我來講是這樣啦
: 本想偷偷懶，看來還是要放狗...
f*y
85 楼
好奇怪呀，这边好多英文网页上关于幼鸟的，都说鸟的嗅觉没进化到那个程度，被人摸
过的幼鸟，大鸟是分不出来的，还是会喂的。让看见幼鸟掉出来的，最好还是放回窝里
去，不要自己养。
【在 m**u 的大作中提到】
: 我捡到过小麻雀，给米不吃。大人们也说养不活，父母帮忙找个梯子给放回窝里了。结
: 果它父母不要它了，还是饿死了。
过的幼鸟，大鸟是分不出来的，还是会喂的。让看见幼鸟掉出来的，最好还是放回窝里
去，不要自己养。
【在 m**u 的大作中提到】
: 我捡到过小麻雀，给米不吃。大人们也说养不活，父母帮忙找个梯子给放回窝里了。结
: 果它父母不要它了，还是饿死了。
w*w
86 楼
肥貓，我們昨晚的討論還未結束呢，你別逃啊
【在 S********t 的大作中提到】
: 鲁迅二代
【在 S********t 的大作中提到】
: 鲁迅二代
w*w
87 楼
不是啊，相思雀也是很小的，黃綠色的，華南一帶很多
【在 E*******r 的大作中提到】
: 绿豆雀是绣眼，刚百度了一下。相思与画眉是近亲，与绿豆差得挺远的。
【在 E*******r 的大作中提到】
: 绿豆雀是绣眼，刚百度了一下。相思与画眉是近亲，与绿豆差得挺远的。
E*r
88 楼
鸟父母是能分辨出自己孩子的，有人将捉的小鸟放笼中，放在窗外，鸟父母会找来，每
天都喂食直到会自己吃。
如果是鸟父母自己抛弃的小鸟，它们有原因，不会再要了。
【在 f********y 的大作中提到】
: 好奇怪呀，这边好多英文网页上关于幼鸟的，都说鸟的嗅觉没进化到那个程度，被人摸
: 过的幼鸟，大鸟是分不出来的，还是会喂的。让看见幼鸟掉出来的，最好还是放回窝里
: 去，不要自己养。
天都喂食直到会自己吃。
如果是鸟父母自己抛弃的小鸟，它们有原因，不会再要了。
【在 f********y 的大作中提到】
: 好奇怪呀，这边好多英文网页上关于幼鸟的，都说鸟的嗅觉没进化到那个程度，被人摸
: 过的幼鸟，大鸟是分不出来的，还是会喂的。让看见幼鸟掉出来的，最好还是放回窝里
: 去，不要自己养。
w*w
89 楼
我以前曾經將跌下來的小燕子放回窩，但隔天又跌下來了。。。
【在 f********y 的大作中提到】
: 好奇怪呀，这边好多英文网页上关于幼鸟的，都说鸟的嗅觉没进化到那个程度，被人摸
: 过的幼鸟，大鸟是分不出来的，还是会喂的。让看见幼鸟掉出来的，最好还是放回窝里
: 去，不要自己养。
【在 f********y 的大作中提到】
: 好奇怪呀，这边好多英文网页上关于幼鸟的，都说鸟的嗅觉没进化到那个程度，被人摸
: 过的幼鸟，大鸟是分不出来的，还是会喂的。让看见幼鸟掉出来的，最好还是放回窝里
: 去，不要自己养。
K*t
90 楼
mark~
【在 E*******r 的大作中提到】
: 献给勤劳的梭影，和派慈上的愤丝
: 童年-----宠物篇
: 我小的时候不去托儿所，经常早晨吃完饭就出去玩，中午饭也不吃，直到天黑后才回
: 家，我爸妈对我一天的所作所为基本上不闻不问。有时候打架了，被人拎去见家长，
: 我爸就说：“怎么能打架呢？晚上我要教育教育他。”结果晚上平安无事，后来我爸告
: 诉我，他小时候也喜欢打架，我奶奶为此打过他，己所不欲勿施于人。由此可见，小时
: 候我有极大的自由度。
: 我在一个很大的院子里长大，院子里有很多大树，主要有榆树、柳树、槐树、松树和钻
: 天杨，榆树钱和槐树花都很好吃。还有数十颗品种不良的果树，只有樱桃尚可入口，但
: 要用心找才能有收获，我们称其为“逮樱桃”。院子里有很多灌木，主要是丁香、迎春
【在 E*******r 的大作中提到】
: 献给勤劳的梭影，和派慈上的愤丝
: 童年-----宠物篇
: 我小的时候不去托儿所，经常早晨吃完饭就出去玩，中午饭也不吃，直到天黑后才回
: 家，我爸妈对我一天的所作所为基本上不闻不问。有时候打架了，被人拎去见家长，
: 我爸就说：“怎么能打架呢？晚上我要教育教育他。”结果晚上平安无事，后来我爸告
: 诉我，他小时候也喜欢打架，我奶奶为此打过他，己所不欲勿施于人。由此可见，小时
: 候我有极大的自由度。
: 我在一个很大的院子里长大，院子里有很多大树，主要有榆树、柳树、槐树、松树和钻
: 天杨，榆树钱和槐树花都很好吃。还有数十颗品种不良的果树，只有樱桃尚可入口，但
: 要用心找才能有收获，我们称其为“逮樱桃”。院子里有很多灌木，主要是丁香、迎春
f*y
91 楼
问问专家，放在笼中的小鸟，一直由父母或者人类喂食，没有自已找食的训练，它长大
了放出去会自己吃、飞吗？还是这种找食、飞翔能力是种本能，长到一定程度就自然而
然会了？
【在 E*******r 的大作中提到】
: 鸟父母是能分辨出自己孩子的，有人将捉的小鸟放笼中，放在窗外，鸟父母会找来，每
: 天都喂食直到会自己吃。
: 如果是鸟父母自己抛弃的小鸟，它们有原因，不会再要了。
了放出去会自己吃、飞吗？还是这种找食、飞翔能力是种本能，长到一定程度就自然而
然会了？
【在 E*******r 的大作中提到】
: 鸟父母是能分辨出自己孩子的，有人将捉的小鸟放笼中，放在窗外，鸟父母会找来，每
: 天都喂食直到会自己吃。
: 如果是鸟父母自己抛弃的小鸟，它们有原因，不会再要了。
E*r
92 楼
到时候它们自己会学，鸟父母或人要给它们创造机会，给软食物让它们吃，同时减少喂
食，一般至少要两三个星期吧，对人工喂养来说，不同的鸟差别挺大。
【在 f********y 的大作中提到】
: 问问专家，放在笼中的小鸟，一直由父母或者人类喂食，没有自已找食的训练，它长大
: 了放出去会自己吃、飞吗？还是这种找食、飞翔能力是种本能，长到一定程度就自然而
: 然会了？
食，一般至少要两三个星期吧，对人工喂养来说，不同的鸟差别挺大。
【在 f********y 的大作中提到】
: 问问专家，放在笼中的小鸟，一直由父母或者人类喂食，没有自已找食的训练，它长大
: 了放出去会自己吃、飞吗？还是这种找食、飞翔能力是种本能，长到一定程度就自然而
: 然会了？
f*y
93 楼
那关笼子里没机会呀。是不是得放出来放到草地上什么的？那会不会就这样一下飞走了
。。。
【在 E*******r 的大作中提到】
: 到时候它们自己会学，鸟父母或人要给它们创造机会，给软食物让它们吃，同时减少喂
: 食，一般至少要两三个星期吧，对人工喂养来说，不同的鸟差别挺大。
。。。
【在 E*******r 的大作中提到】
: 到时候它们自己会学，鸟父母或人要给它们创造机会，给软食物让它们吃，同时减少喂
: 食，一般至少要两三个星期吧，对人工喂养来说，不同的鸟差别挺大。
E*r
94 楼
英文学名Dytiscidae，俗名diving beetle, true water beetle.
中文学名龙虱，俗名水龟子，尿龟子等等。
中文学名龙虱，俗名水龟子，尿龟子等等。
b*x
95 楼
汗，吃完饭呢。。。
【在 E*******r 的大作中提到】
: 英文学名Dytiscidae，俗名diving beetle, true water beetle.
: 中文学名龙虱，俗名水龟子，尿龟子等等。
【在 E*******r 的大作中提到】
: 英文学名Dytiscidae，俗名diving beetle, true water beetle.
: 中文学名龙虱，俗名水龟子，尿龟子等等。
f*y
96 楼
不好意思呀，问题可能有点白有点多。主要之前捡到一只小鸟没照顾好，最后还是送
wildlife rescue了，但是感觉很伤心很遗憾。所以想多了解点，如果下次再发生这种
事，希望能更加好地照顾小鸟。
【在 f********y 的大作中提到】
: 那关笼子里没机会呀。是不是得放出来放到草地上什么的？那会不会就这样一下飞走了
: 。。。
wildlife rescue了，但是感觉很伤心很遗憾。所以想多了解点，如果下次再发生这种
事，希望能更加好地照顾小鸟。
【在 f********y 的大作中提到】
: 那关笼子里没机会呀。是不是得放出来放到草地上什么的？那会不会就这样一下飞走了
: 。。。
f*y
97 楼
哇啊，对这种东东实在没爱啊。。。
【在 E*******r 的大作中提到】
: 英文学名Dytiscidae，俗名diving beetle, true water beetle.
: 中文学名龙虱，俗名水龟子，尿龟子等等。
【在 E*******r 的大作中提到】
: 英文学名Dytiscidae，俗名diving beetle, true water beetle.
: 中文学名龙虱，俗名水龟子，尿龟子等等。
E*r
98 楼
这个还好吧，那个杖杖虫我现在不敢玩了。
【在 b**x 的大作中提到】
: 汗，吃完饭呢。。。
【在 b**x 的大作中提到】
: 汗，吃完饭呢。。。
w*w
99 楼
怪不知你和pala這麼有共同語言。。。
【在 E*******r 的大作中提到】
: 这个还好吧，那个杖杖虫我现在不敢玩了。
【在 E*******r 的大作中提到】
: 这个还好吧，那个杖杖虫我现在不敢玩了。
g*x
100 楼
我也在想呢，怎么跟百草堂一样
【在 S********t 的大作中提到】
: 鲁迅二代
【在 S********t 的大作中提到】
: 鲁迅二代
E*r
101 楼
得，被你变中药房了。
【在 g****x 的大作中提到】
: 我也在想呢，怎么跟百草堂一样
【在 g****x 的大作中提到】
: 我也在想呢，怎么跟百草堂一样
g*x
102 楼
haha , 被文豪二代指正，真是惭愧。
【在 E*******r 的大作中提到】
: 得，被你变中药房了。
【在 E*******r 的大作中提到】
: 得，被你变中药房了。
s*a
103 楼
越写越想看奔
【在 E*******r 的大作中提到】
: 得，被你变中药房了。
【在 E*******r 的大作中提到】
: 得，被你变中药房了。
w*w
104 楼
大家一定要齊心協力，嗯
【在 s*******a 的大作中提到】
: 越写越想看奔
【在 s*******a 的大作中提到】
: 越写越想看奔
s*a
105 楼
夜深人静 你就奔吧 我给你奔点黄石动物做陪衬
【在 E*******r 的大作中提到】
: 得，被你变中药房了。
【在 E*******r 的大作中提到】
: 得，被你变中药房了。
E*r
106 楼
哈，你也来了。不奔。
黄石动物我想看，我不奔，你也会发的，也不急死你了。
【在 s*******a 的大作中提到】
: 夜深人静 你就奔吧 我给你奔点黄石动物做陪衬
黄石动物我想看，我不奔，你也会发的，也不急死你了。
【在 s*******a 的大作中提到】
: 夜深人静 你就奔吧 我给你奔点黄石动物做陪衬
w*w
107 楼
不如吧，pala陪你一起奔，幫你壯膽好了
【在 E*******r 的大作中提到】
: 哈，你也来了。不奔。
: 黄石动物我想看，我不奔，你也会发的，也不急死你了。
【在 E*******r 的大作中提到】
: 哈，你也来了。不奔。
: 黄石动物我想看，我不奔，你也会发的，也不急死你了。
s*a
108 楼
黄石动物和你多搭啊 一起奔才有效果
【在 E*******r 的大作中提到】
: 哈，你也来了。不奔。
: 黄石动物我想看，我不奔，你也会发的，也不急死你了。
【在 E*******r 的大作中提到】
: 哈，你也来了。不奔。
: 黄石动物我想看，我不奔，你也会发的，也不急死你了。
s*a
109 楼
话说这次很多trail不开 动物倒是没少遇到 连狼都看到了 可惜太远拍不出来
【在 E*******r 的大作中提到】
: 哈，你也来了。不奔。
: 黄石动物我想看，我不奔，你也会发的，也不急死你了。
【在 E*******r 的大作中提到】
: 哈，你也来了。不奔。
: 黄石动物我想看，我不奔，你也会发的，也不急死你了。
E*r
110 楼
狼要冬天坐snowcat才能接近，这时候要600mm镜头。
【在 s*******a 的大作中提到】
: 话说这次很多trail不开 动物倒是没少遇到 连狼都看到了 可惜太远拍不出来
【在 s*******a 的大作中提到】
: 话说这次很多trail不开 动物倒是没少遇到 连狼都看到了 可惜太远拍不出来
s*a
111 楼
我就一傻瓜相机照到两个黑点 我还有棕熊吃鹿照哦
【在 E*******r 的大作中提到】
: 狼要冬天坐snowcat才能接近，这时候要600mm镜头。
【在 E*******r 的大作中提到】
: 狼要冬天坐snowcat才能接近，这时候要600mm镜头。
s*a
112 楼
哇 十大了
【在 s*******a 的大作中提到】
: 我就一傻瓜相机照到两个黑点 我还有棕熊吃鹿照哦
【在 s*******a 的大作中提到】
: 我就一傻瓜相机照到两个黑点 我还有棕熊吃鹿照哦
w*w
113 楼
沒有啊
西部的同學，你們繼續努力，我閃人了...
【在 s*******a 的大作中提到】
: 哇 十大了
西部的同學，你們繼續努力，我閃人了...
【在 s*******a 的大作中提到】
: 哇 十大了
E*r
114 楼
啊，漏了这个问题。
要将给它们学习的食物放到笼子里， 它们自己会吃，开始时多数浪费了，后来越吃越
多。食物开始要软一些，一点一点给硬食。种类还有多变，小鸟给什么吃什么，大了有
些不碰没吃过的东西，容易挑食。一般不难，不过我听说过有学吃很难的鸟。
【在 f********y 的大作中提到】
: 不好意思呀，问题可能有点白有点多。主要之前捡到一只小鸟没照顾好，最后还是送
: wildlife rescue了，但是感觉很伤心很遗憾。所以想多了解点，如果下次再发生这种
: 事，希望能更加好地照顾小鸟。
要将给它们学习的食物放到笼子里， 它们自己会吃，开始时多数浪费了，后来越吃越
多。食物开始要软一些，一点一点给硬食。种类还有多变，小鸟给什么吃什么，大了有
些不碰没吃过的东西，容易挑食。一般不难，不过我听说过有学吃很难的鸟。
【在 f********y 的大作中提到】
: 不好意思呀，问题可能有点白有点多。主要之前捡到一只小鸟没照顾好，最后还是送
: wildlife rescue了，但是感觉很伤心很遗憾。所以想多了解点，如果下次再发生这种
: 事，希望能更加好地照顾小鸟。
E*r
115 楼
熊吃鹿奔一下吧，随便把你自己也奔了。
【在 s*******a 的大作中提到】
: 我就一傻瓜相机照到两个黑点 我还有棕熊吃鹿照哦
【在 s*******a 的大作中提到】
: 我就一傻瓜相机照到两个黑点 我还有棕熊吃鹿照哦
s*a
116 楼
熊说他要和你奔
【在 E*******r 的大作中提到】
: 熊吃鹿奔一下吧，随便把你自己也奔了。
【在 E*******r 的大作中提到】
: 熊吃鹿奔一下吧，随便把你自己也奔了。
f*y
117 楼
非常感谢！
【在 E*******r 的大作中提到】
: 啊，漏了这个问题。
: 要将给它们学习的食物放到笼子里， 它们自己会吃，开始时多数浪费了，后来越吃越
: 多。食物开始要软一些，一点一点给硬食。种类还有多变，小鸟给什么吃什么，大了有
: 些不碰没吃过的东西，容易挑食。一般不难，不过我听说过有学吃很难的鸟。
【在 E*******r 的大作中提到】
: 啊，漏了这个问题。
: 要将给它们学习的食物放到笼子里， 它们自己会吃，开始时多数浪费了，后来越吃越
: 多。食物开始要软一些，一点一点给硬食。种类还有多变，小鸟给什么吃什么，大了有
: 些不碰没吃过的东西，容易挑食。一般不难，不过我听说过有学吃很难的鸟。
a*a
118 楼
愤丝来拜了!
【在 E*******r 的大作中提到】
: 献给勤劳的梭影，和派慈上的愤丝
: 童年-----宠物篇
: 我小的时候不去托儿所，经常早晨吃完饭就出去玩，中午饭也不吃，直到天黑后才回
: 家，我爸妈对我一天的所作所为基本上不闻不问。有时候打架了，被人拎去见家长，
: 我爸就说：“怎么能打架呢？晚上我要教育教育他。”结果晚上平安无事，后来我爸告
: 诉我，他小时候也喜欢打架，我奶奶为此打过他，己所不欲勿施于人。由此可见，小时
: 候我有极大的自由度。
: 我在一个很大的院子里长大，院子里有很多大树，主要有榆树、柳树、槐树、松树和钻
: 天杨，榆树钱和槐树花都很好吃。还有数十颗品种不良的果树，只有樱桃尚可入口，但
: 要用心找才能有收获，我们称其为“逮樱桃”。院子里有很多灌木，主要是丁香、迎春
【在 E*******r 的大作中提到】
: 献给勤劳的梭影，和派慈上的愤丝
: 童年-----宠物篇
: 我小的时候不去托儿所，经常早晨吃完饭就出去玩，中午饭也不吃，直到天黑后才回
: 家，我爸妈对我一天的所作所为基本上不闻不问。有时候打架了，被人拎去见家长，
: 我爸就说：“怎么能打架呢？晚上我要教育教育他。”结果晚上平安无事，后来我爸告
: 诉我，他小时候也喜欢打架，我奶奶为此打过他，己所不欲勿施于人。由此可见，小时
: 候我有极大的自由度。
: 我在一个很大的院子里长大，院子里有很多大树，主要有榆树、柳树、槐树、松树和钻
: 天杨，榆树钱和槐树花都很好吃。还有数十颗品种不良的果树，只有樱桃尚可入口，但
: 要用心找才能有收获，我们称其为“逮樱桃”。院子里有很多灌木，主要是丁香、迎春
l*t
119 楼
非常好。应该收入小学生语文课本。
现在的孩子可怜啊。
现在的孩子可怜啊。
l*t
120 楼
既然活吃青蛙的凶猛食肉昆虫，那你抓捕的时候不咬人么？
【在 E*******r 的大作中提到】
: 英文学名Dytiscidae，俗名diving beetle, true water beetle.
: 中文学名龙虱，俗名水龟子，尿龟子等等。
【在 E*******r 的大作中提到】
: 英文学名Dytiscidae，俗名diving beetle, true water beetle.
: 中文学名龙虱，俗名水龟子，尿龟子等等。
E*r
121 楼
哦，也不夸我两句？
【在 a********a 的大作中提到】
: 愤丝来拜了!
【在 a********a 的大作中提到】
: 愤丝来拜了!
E*r
122 楼
是啊，我知道的小孩，都是每天上各种课，无孩幸免。
【在 l****t 的大作中提到】
: 非常好。应该收入小学生语文课本。
: 现在的孩子可怜啊。
【在 l****t 的大作中提到】
: 非常好。应该收入小学生语文课本。
: 现在的孩子可怜啊。
E*r
123 楼
它们从不咬人，但抓的时候要小心，因为它们的腿很锋利，能把手刺破。一般用拇指食
指掐着。
【在 l****t 的大作中提到】
: 既然活吃青蛙的凶猛食肉昆虫，那你抓捕的时候不咬人么？
指掐着。
【在 l****t 的大作中提到】
: 既然活吃青蛙的凶猛食肉昆虫，那你抓捕的时候不咬人么？
w*j
124 楼
不顶不行
P*0
125 楼
这怎么会是意识流呢？行文流畅清楚，毫无生涩难懂处。
【在 a***y 的大作中提到】
: 有意识流风范.
【在 a***y 的大作中提到】
: 有意识流风范.
E*r
126 楼
谢谢！
【在 w***j 的大作中提到】
: 不顶不行
【在 w***j 的大作中提到】
: 不顶不行
E*r
127 楼
我也觉得不像，没敢说。。。
【在 P******0 的大作中提到】
: 这怎么会是意识流呢？行文流畅清楚，毫无生涩难懂处。
【在 P******0 的大作中提到】
: 这怎么会是意识流呢？行文流畅清楚，毫无生涩难懂处。
z*0
128 楼
赞楼主，太牛了，佩服佩服！
a*a
129 楼
You are at such a level that I'm in no position to comment. Admire and beg
for more.
【在 E*******r 的大作中提到】
: 哦，也不夸我两句？
for more.
【在 E*******r 的大作中提到】
: 哦，也不夸我两句？
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