Re: Purify protein from mammalian cells# Biology - 生物学
r*o
1 楼
让我猜一猜，你是想用类似CO-IP的方法把与某个蛋白有相互
作用的其他蛋白找出来把？
一般来说只要你纯化出来的蛋白跑SDS-PAGE后银染之后能看见
条带就行了(至少纳克级)，就可以把胶送去做质谱了。建议你从
最简单的10厘米直径培养皿养细胞开始试起。可以多养几盘，如果你
觉得蛋白量不够。不过不要一下子就想用成升成升的悬浮培养，：-)
会很麻烦的，你又不是想长晶体。
做悬浮培养最常见的是CHO细胞。养这种细胞的技术很成熟了，
还有专门的无血清培养悬浮CHO细胞的培养液卖。随便问一个做tissue
culture的人都会知道的。
前面有人说用bioreactor.其实连这个都不用，用那种有磁转子的
培养瓶(体积大概是一两升)，或者滚瓶都可以。
作用的其他蛋白找出来把？
一般来说只要你纯化出来的蛋白跑SDS-PAGE后银染之后能看见
条带就行了(至少纳克级)，就可以把胶送去做质谱了。建议你从
最简单的10厘米直径培养皿养细胞开始试起。可以多养几盘，如果你
觉得蛋白量不够。不过不要一下子就想用成升成升的悬浮培养，：-)
会很麻烦的，你又不是想长晶体。
做悬浮培养最常见的是CHO细胞。养这种细胞的技术很成熟了，
还有专门的无血清培养悬浮CHO细胞的培养液卖。随便问一个做tissue
culture的人都会知道的。
前面有人说用bioreactor.其实连这个都不用，用那种有磁转子的
培养瓶(体积大概是一两升)，或者滚瓶都可以。