Re: 硫氰酸胍－酚法抽提植物RNA# Biology - 生物学
l*n
1 楼
哦，还是这个提RNA的问题。
br />
1，蛋白并不会完全分配到酚相中去。酚使蛋白变性，暴露出一部分憎水基团；变性的蛋白
质不再溶于水相而从水相中分离出来。或许蛋白上还有一部分亲水基团，使蛋白象表面活
性剂一样滞留在酚和水的界面？不懂，搞化学的人应该更明白一点。
br />
2，我只用酸性酚而不加氯仿去抽提样品RNA时，发现整个体系不分相。在抽提质粒时只加
Tris酚不加氯仿体系也能分成清晰的两相 。酸性时，酚的羟基不能电离；碱性时，酚的羟
基才能电离。所以碱性时应该不能分相才对。想不明白。涉及到氢鍵我就更糊涂了，氢鍵
和PH是什么关系
3，前面提到在用酸性酚而不加氯仿抽提RNA时体系并不分相，这时即使只加入1/5 体积
的氯仿，酚就可以立刻跑到氯仿中去。是否可以认为在酸性条件下，酚的羟基不能解离
从而不带电荷，于是更容易和氯仿结合。这个我能想通。
4，不管是DNA还是RNA，都是酸性，也就是说等电点<7.pH大于等电点时，核酸带负电，溶
于水相； pH等于等电点时，核酸不带电荷；pH<7时，磷酸骨架和核糖的羟基应该怎样电
离？想不明白。我想他们应该都是不带电的，因此应该不在水相。但
br />
1，蛋白并不会完全分配到酚相中去。酚使蛋白变性，暴露出一部分憎水基团；变性的蛋白
质不再溶于水相而从水相中分离出来。或许蛋白上还有一部分亲水基团，使蛋白象表面活
性剂一样滞留在酚和水的界面？不懂，搞化学的人应该更明白一点。
br />
2，我只用酸性酚而不加氯仿去抽提样品RNA时，发现整个体系不分相。在抽提质粒时只加
Tris酚不加氯仿体系也能分成清晰的两相 。酸性时，酚的羟基不能电离；碱性时，酚的羟
基才能电离。所以碱性时应该不能分相才对。想不明白。涉及到氢鍵我就更糊涂了，氢鍵
和PH是什么关系
3，前面提到在用酸性酚而不加氯仿抽提RNA时体系并不分相，这时即使只加入1/5 体积
的氯仿，酚就可以立刻跑到氯仿中去。是否可以认为在酸性条件下，酚的羟基不能解离
从而不带电荷，于是更容易和氯仿结合。这个我能想通。
4，不管是DNA还是RNA，都是酸性，也就是说等电点<7.pH大于等电点时，核酸带负电，溶
于水相； pH等于等电点时，核酸不带电荷；pH<7时，磷酸骨架和核糖的羟基应该怎样电
离？想不明白。我想他们应该都是不带电的，因此应该不在水相。但