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请推荐In Vitro Transcription / Translation kits
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请推荐In Vitro Transcription / Translation kits# Biology - 生物学
b*d
1
50万也就是杯水车薪。美国国会太搞了。
NSF is spending 500,000 dollars per year on refreshments at meetings, even
though attendees are already compensated for food and other expenses,
Inspector General Allison Lerner said.
WASHINGTON (AFP) – Hundreds of millions of US taxpayer dollars have been
wasted on everything from doughnuts to rockets, auditors told Congress
Thursday as budget-minded lawmakers prepared to slash science funding.
For example, hundreds of millions of dollars are being spent each month on a
NASA program to return Americans to the moon, even though the US space
agency, Congress and President Barack Obama have agreed not to proceed with
it.
Old, rundown buildings are draining 300 million dollars a year from NASA in
repair costs alone, and at least one space telescope project has run
billions over budget, more than four times initial estimates.
The National Science Foundation, a 6.9 billion dollar federal agency that
disperses grants to researchers, also came under the microscope as the House
of Representatives held hearings on how to get rid of waste and fraud.
NSF is spending 500,000 dollars per year on refreshments at meetings, even
though attendees are already compensated for food and other expenses,
Inspector General Allison Lerner said.
Other problems include the way the agency spends half of its budget for
contracts, or 204 million dollars, on pay-in-advance schemes in which
contractors get paid ahead of time whether the work is finished or not.
"The risk of fraud, waste and abuse by NSF contractors will continue to be
high until NSF implements fully adequate cost surveillance procedures," she
told the House Appropriations Subcommittee on Science, State, Justice and
Commerce.
A recent audit of large construction projects undertaken by NSF revealed
more than 169 million dollars in "unallowable contingency costs," because "
no barriers existed to prevent the funds from being drawn down in advance,"
she said.
"I am beginning to think it is a very sloppy operation out there," said
Congressman Frank Wolf, the Republican chair of the subcommittee.
Republicans, who have a majority in the House but not the Senate, have vowed
to press for the biggest budget cuts in history.
On Wednesday, they unveiled a plan to cut tens of billions dollars from the
budget, as the US national debt runs to 14 trillion dollars with a 1.5
trillion dollar yearly government deficit.
The reductions, including a 379 million dollar cut for NASA and a 139
million dollar cut for NSF, would figure in a House spending bill to fund
the government through the end of the fiscal year, in place of a stopgap
measure approved last year that expires March 4.
According to Inspector General Paul Martin, an independent auditor who
testified about NASA, the space agency's central "conundrum" is due to that
temporary budget extension.
Martin explained it contains old language that "doesn't allow NASA to
terminate the Constellation program," which included the now nixed Ares
rockets and Orion spacecraft to replace the retiring space shuttles.
Lawmakers should take immediate action to correct this "continuing lack of
clarity caused by conflicting legislative directives," Martin told the
subcommittee.
Otherwise, NASA will keep spending money on rockets to nowhere, for a total
of 215 million dollars by the end of February and 575 million dollars by the
end of the fiscal year, he said.
Another major NASA project, the James Webb Space Telescope, has careened
billions of dollars over budget and needs 500 million dollars more to be
completed by 2015, Martin said.
Initial estimates put the cost of the telescope, designed to help the hunt
for knowledge about early galaxies in the universe, at 1.6 billion dollars,
but now the total price tag has risen to 6.5 billion dollars, he said.
"For some projects, it really is rocket science. The engineering required
for many of NASA's space and engineering projects is complex and visionary
but the agency must do a better job of managing cost and schedule," Martin
said.
Democratic lawmaker Chaka Fattah echoed other members of the subcommittee
when he said the Congress supports NASA's mission to advance knowledge of
space, but is keen to find ways to trim overblown budgets.
"We need to stop spending money on something we do not want to do," Fattah
said. "That is not rocket science."
But when it came to the food treats being offered to scientists, Fattah was
less certain.
"In defense of the coffee and doughnuts, I would say there are probably some
areas you can cut but I am not sure we should be inviting the most
knowledgeable scientists in the world to talk about a cure for cancer and
not offer them coffee," he said.
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j*p
2
在DOS的网站上申请了,也生成了packet assembly。可是觉得statement of reason有
两个地方写的不好,就用网站上的create statement of reason生成了一个新的。可是
这次的邮寄地址写的是washington DC。packet assembly上面不写的事St. Louis, MO
吗?
有人遇到过这种情况吗?该怎么办啊?多谢多谢!
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l*t
3
因为,处处体现出导演想要讨好观众的心情,有很多细节还是处理的不错的,演员的选择,
考虑到了广大7,80年代出生的一代人的感受和喜好.我笑了.
但是最大的败笔是主演的选择,震中鸡,太丑了;孙利,气质长相根本不符合无力头搞笑的
风格.
其实尽量保留香港演员,做成一部原汁原味的港片,不是很好吗.最近很多香港滥片,都是
因为加入太多大陆元素.
大陆人对香港风格,香港人对大陆风格,其实都并不了解和适应,所以硬凑在一起,九成了
四不像的滥篇了.
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t*g
4
最近一直在看凡人修仙传,很喜欢这本书。看着韩老魔从山村娃直到现在升到灵界,一
路走来,多次灭团,多次幸存,然后
就是无休止得修炼,法力提高,然后再出去组团寻宝。
不过最近想了一下,韩老魔的生活是不是也太乏味了。只有一个双休伴侣,结果还在下
界上不来。生活中除了修炼法相,祭
炼法宝,就是出去寻宝,然后遇到更强的人物,大战一场,干掉对方,然后再找个地方
闭关修炼。他是不是过得太无趣了。
好像从修仙开始就没有怎么享受过生活。这个不是心智坚定的事吧,想想总觉得有点变
态。尤其是有些人到了修炼瓶颈,就
把自己关起来闭关好度天劫,度过了,再准备丹药法宝好度下一次,你说他们活着除了
度劫和等待度劫之外好像没有也没时
间干其他事,那他们活着有什么意思。
以上只是看书的一点感想,明白小说与现实无关。就是挺喜欢这本书,随便想想。呵呵
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J*u
5
如何查看:Boot Loader 系数/ 谢谢
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t*y
6
表达一个人体蛋白的突变体。这个蛋白的突变体(pCDNA3质粒上)中有一个点突变在
293T细胞表达量检测不到(其他几个突变体都可以检测到)。所以想用体外表达系统来
表达,不知道有没有人用过这个系统,推荐一下哪个公司的产品比较好。
因为初步判断突变体影响蛋白结构,在293T细胞体内表达时可能被降解了。所以想通过
体外表达,防止降解发生。因为以前没有做个这个实验,所以有几个问题。
1)体外表达是否可以防止突变蛋白降解?
2)选择哪个来源的系统表达我的蛋白?源自human是否比源自wheat的系统或者yeast的
系统更容易降解我的蛋白?
3)打算用质粒DNA直接做,有什么要注意的情况?
4)市场上的kits,哪个比较好?
先谢谢了。
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s*u
7
仍然是St. Louis, MO
如果DOS让你补材料,邮寄地址写的是washington DC

MO

【在 j****p 的大作中提到】
: 在DOS的网站上申请了,也生成了packet assembly。可是觉得statement of reason有
: 两个地方写的不好,就用网站上的create statement of reason生成了一个新的。可是
: 这次的邮寄地址写的是washington DC。packet assembly上面不写的事St. Louis, MO
: 吗?
: 有人遇到过这种情况吗?该怎么办啊?多谢多谢!

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s*t
8
鄭中基在山寨星爺
某些地方我一邊picture星爺的音容笑貌,一邊take in鄭重幾的仿真表演

择,

【在 l********t 的大作中提到】
: 因为,处处体现出导演想要讨好观众的心情,有很多细节还是处理的不错的,演员的选择,
: 考虑到了广大7,80年代出生的一代人的感受和喜好.我笑了.
: 但是最大的败笔是主演的选择,震中鸡,太丑了;孙利,气质长相根本不符合无力头搞笑的
: 风格.
: 其实尽量保留香港演员,做成一部原汁原味的港片,不是很好吗.最近很多香港滥片,都是
: 因为加入太多大陆元素.
: 大陆人对香港风格,香港人对大陆风格,其实都并不了解和适应,所以硬凑在一起,九成了
: 四不像的滥篇了.

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l*r
9
If you try hard on one thing, then you can live forever, you would do it too.
Long life is the ultimate target, everything else is secondary.
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s*y
11
Promega, TnT T7 coupled transcription/translation kit

Depending on what degradation system was responsible. In vitro translation
system also contain ubiquitin and proteasome. However, it does not have
lysosome or golgi (which also contains protein degradation machinery).
You can add 10uM MG132 in the in vitro translation system (or your 293T cell
culture medium) to inhibit the proteasome.
的系统更容易降解我的蛋白?
Yes. If you want, you can try bacterial in vitro expression system. BUT, it
won't contain the

【在 t******y 的大作中提到】
: 表达一个人体蛋白的突变体。这个蛋白的突变体(pCDNA3质粒上)中有一个点突变在
: 293T细胞表达量检测不到(其他几个突变体都可以检测到)。所以想用体外表达系统来
: 表达,不知道有没有人用过这个系统,推荐一下哪个公司的产品比较好。
: 因为初步判断突变体影响蛋白结构,在293T细胞体内表达时可能被降解了。所以想通过
: 体外表达,防止降解发生。因为以前没有做个这个实验,所以有几个问题。
: 1)体外表达是否可以防止突变蛋白降解?
: 2)选择哪个来源的系统表达我的蛋白?源自human是否比源自wheat的系统或者yeast的
: 系统更容易降解我的蛋白?
: 3)打算用质粒DNA直接做,有什么要注意的情况?
: 4)市场上的kits,哪个比较好?

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s*g
12
我当时也是这样。
你就把新生成statment和老的package放一起,寄到St. Louis就好了。还可以加一封信
,说明为何多了一个statment。
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j*5
13
郑中基演喜剧,脸长得非常欠揍
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T*S
14
你也太有带入感了。这是写书挣钱,能写的更好当然会写,但wy的水平就是这样。所以
只能在这样的循环中拖着挣钱。看似不断有什么新坑,其实手法都差不多,目的就是要
拖着挣钱,是很讨巧的做法。
要是飘渺出来的时候有这样的打赏制度,说不定现在还会在写呢。

【在 t**********g 的大作中提到】
: 最近一直在看凡人修仙传,很喜欢这本书。看着韩老魔从山村娃直到现在升到灵界,一
: 路走来,多次灭团,多次幸存,然后
: 就是无休止得修炼,法力提高,然后再出去组团寻宝。
: 不过最近想了一下,韩老魔的生活是不是也太乏味了。只有一个双休伴侣,结果还在下
: 界上不来。生活中除了修炼法相,祭
: 炼法宝,就是出去寻宝,然后遇到更强的人物,大战一场,干掉对方,然后再找个地方
: 闭关修炼。他是不是过得太无趣了。
: 好像从修仙开始就没有怎么享受过生活。这个不是心智坚定的事吧,想想总觉得有点变
: 态。尤其是有些人到了修炼瓶颈,就
: 把自己关起来闭关好度天劫,度过了,再准备丹药法宝好度下一次,你说他们活着除了

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l*n
16
promega, t7, wheat germ

【在 t******y 的大作中提到】
: 表达一个人体蛋白的突变体。这个蛋白的突变体(pCDNA3质粒上)中有一个点突变在
: 293T细胞表达量检测不到(其他几个突变体都可以检测到)。所以想用体外表达系统来
: 表达,不知道有没有人用过这个系统,推荐一下哪个公司的产品比较好。
: 因为初步判断突变体影响蛋白结构,在293T细胞体内表达时可能被降解了。所以想通过
: 体外表达,防止降解发生。因为以前没有做个这个实验,所以有几个问题。
: 1)体外表达是否可以防止突变蛋白降解?
: 2)选择哪个来源的系统表达我的蛋白?源自human是否比源自wheat的系统或者yeast的
: 系统更容易降解我的蛋白?
: 3)打算用质粒DNA直接做,有什么要注意的情况?
: 4)市场上的kits,哪个比较好?

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T*C
17
很有诚意地来恶心观众的作品。

择,

【在 l********t 的大作中提到】
: 因为,处处体现出导演想要讨好观众的心情,有很多细节还是处理的不错的,演员的选择,
: 考虑到了广大7,80年代出生的一代人的感受和喜好.我笑了.
: 但是最大的败笔是主演的选择,震中鸡,太丑了;孙利,气质长相根本不符合无力头搞笑的
: 风格.
: 其实尽量保留香港演员,做成一部原汁原味的港片,不是很好吗.最近很多香港滥片,都是
: 因为加入太多大陆元素.
: 大陆人对香港风格,香港人对大陆风格,其实都并不了解和适应,所以硬凑在一起,九成了
: 四不像的滥篇了.

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a*e
18
all work and no play makes laomo a bt

【在 t**********g 的大作中提到】
: 最近一直在看凡人修仙传,很喜欢这本书。看着韩老魔从山村娃直到现在升到灵界,一
: 路走来,多次灭团,多次幸存,然后
: 就是无休止得修炼,法力提高,然后再出去组团寻宝。
: 不过最近想了一下,韩老魔的生活是不是也太乏味了。只有一个双休伴侣,结果还在下
: 界上不来。生活中除了修炼法相,祭
: 炼法宝,就是出去寻宝,然后遇到更强的人物,大战一场,干掉对方,然后再找个地方
: 闭关修炼。他是不是过得太无趣了。
: 好像从修仙开始就没有怎么享受过生活。这个不是心智坚定的事吧,想想总觉得有点变
: 态。尤其是有些人到了修炼瓶颈,就
: 把自己关起来闭关好度天劫,度过了,再准备丹药法宝好度下一次,你说他们活着除了

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a*o
19
Ambion
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r*y
20
说实在的,比东成西就要好。
喜欢东成西就类型的观众,不会被恶心到。

【在 T*C 的大作中提到】
: 很有诚意地来恶心观众的作品。
:
: 择,

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w*0
21
我的一点想法:
这么做的是少数人,而且都是有一线机会可以进一步或者是度劫的人。对大多数人来说
,如果无望,就不会这么做,或者享受,或者给家族做事,或者帮后人留下宝物(比如
符宝)。书里给了很多例子,象刚开始时的金光上人,陈巧倩未能筑基的哥哥,呼延老
魔等等。
其实这个在现实生活中也有很多.如果想继续进步,就会有所顾忌.如果升迁无望,就会精
彩生活了.呵呵!
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p*n
22
thermo scientific刚刚推出了human in vitro protein synthesis system
我大概看了一下,貌似很不错
不过我没用过。
只不过几乎所有in vitro系统表达量都不高(或者说要高表达就要花好多钱)

【在 t******y 的大作中提到】
: 表达一个人体蛋白的突变体。这个蛋白的突变体(pCDNA3质粒上)中有一个点突变在
: 293T细胞表达量检测不到(其他几个突变体都可以检测到)。所以想用体外表达系统来
: 表达,不知道有没有人用过这个系统,推荐一下哪个公司的产品比较好。
: 因为初步判断突变体影响蛋白结构,在293T细胞体内表达时可能被降解了。所以想通过
: 体外表达,防止降解发生。因为以前没有做个这个实验,所以有几个问题。
: 1)体外表达是否可以防止突变蛋白降解?
: 2)选择哪个来源的系统表达我的蛋白?源自human是否比源自wheat的系统或者yeast的
: 系统更容易降解我的蛋白?
: 3)打算用质粒DNA直接做,有什么要注意的情况?
: 4)市场上的kits,哪个比较好?

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p*e
23
同意,大陆演员的确不适合演香港搞笑片。

择,

【在 l********t 的大作中提到】
: 因为,处处体现出导演想要讨好观众的心情,有很多细节还是处理的不错的,演员的选择,
: 考虑到了广大7,80年代出生的一代人的感受和喜好.我笑了.
: 但是最大的败笔是主演的选择,震中鸡,太丑了;孙利,气质长相根本不符合无力头搞笑的
: 风格.
: 其实尽量保留香港演员,做成一部原汁原味的港片,不是很好吗.最近很多香港滥片,都是
: 因为加入太多大陆元素.
: 大陆人对香港风格,香港人对大陆风格,其实都并不了解和适应,所以硬凑在一起,九成了
: 四不像的滥篇了.

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k*n
24
唉。。不还有好多坑都没填上呢。。
wy不愁写。
对与修仙的,修炼时获得的刺激比XXOO来劲多了。。
就好比海洛因与大麻的区别。。
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t*y
25
我只要能表达就行了。
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wy
26
how do you know?

【在 k**n 的大作中提到】
: 唉。。不还有好多坑都没填上呢。。
: wy不愁写。
: 对与修仙的,修炼时获得的刺激比XXOO来劲多了。。
: 就好比海洛因与大麻的区别。。

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t*g
27
是啊,坑挖的那么多,好久才填上一个,就好比那个小瓶子,除了最开始提到是从其他
星球来的外,到现在都不知道到底是个什么东西,除了培植花花草草之外还有没有其他
更逆天的神通。期待wy挖点有创意的新坑出来。而且最近的更新速度好像也慢下来了,
原来还能一天两更,现在也就一更,有时还更慢
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wy
28
什么地方提到了“最开始提到是从其他星球来的”?

【在 t**********g 的大作中提到】
: 是啊,坑挖的那么多,好久才填上一个,就好比那个小瓶子,除了最开始提到是从其他
: 星球来的外,到现在都不知道到底是个什么东西,除了培植花花草草之外还有没有其他
: 更逆天的神通。期待wy挖点有创意的新坑出来。而且最近的更新速度好像也慢下来了,
: 原来还能一天两更,现在也就一更,有时还更慢

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t*g
29
如果没记错的话 开始好像说什么小瓶来自什么精灵还是社呢没其他的国度 非常受重视
不确定是不是其他星球 也可能是其他空间什么的
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wy
30
reference?

【在 t**********g 的大作中提到】
: 如果没记错的话 开始好像说什么小瓶来自什么精灵还是社呢没其他的国度 非常受重视
: 不确定是不是其他星球 也可能是其他空间什么的

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l*a
31
没这个印象啊。。。你不会是和别的搞混了?

【在 t**********g 的大作中提到】
: 如果没记错的话 开始好像说什么小瓶来自什么精灵还是社呢没其他的国度 非常受重视
: 不确定是不是其他星球 也可能是其他空间什么的

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S*r
32
lol, 我觉得这哥们自己穿越了,可能他在另一个空间看过类似的小说吧。

【在 l***a 的大作中提到】
: 没这个印象啊。。。你不会是和别的搞混了?
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w*w
33
凡人开始是这样写的。后来给WY删掉了。
我看到过没删前的版本。
在这个版向前找也可能找到。

【在 t**********g 的大作中提到】
: 如果没记错的话 开始好像说什么小瓶来自什么精灵还是社呢没其他的国度 非常受重视
: 不确定是不是其他星球 也可能是其他空间什么的

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w*0
34
没错.我也有印象.

【在 w***w 的大作中提到】
: 凡人开始是这样写的。后来给WY删掉了。
: 我看到过没删前的版本。
: 在这个版向前找也可能找到。

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s*y
35
介不就是典型的打游戏的状态么

【在 t**********g 的大作中提到】
: 最近一直在看凡人修仙传,很喜欢这本书。看着韩老魔从山村娃直到现在升到灵界,一
: 路走来,多次灭团,多次幸存,然后
: 就是无休止得修炼,法力提高,然后再出去组团寻宝。
: 不过最近想了一下,韩老魔的生活是不是也太乏味了。只有一个双休伴侣,结果还在下
: 界上不来。生活中除了修炼法相,祭
: 炼法宝,就是出去寻宝,然后遇到更强的人物,大战一场,干掉对方,然后再找个地方
: 闭关修炼。他是不是过得太无趣了。
: 好像从修仙开始就没有怎么享受过生活。这个不是心智坚定的事吧,想想总觉得有点变
: 态。尤其是有些人到了修炼瓶颈,就
: 把自己关起来闭关好度天劫,度过了,再准备丹药法宝好度下一次,你说他们活着除了

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wy
36
记起来了

【在 w***w 的大作中提到】
: 凡人开始是这样写的。后来给WY删掉了。
: 我看到过没删前的版本。
: 在这个版向前找也可能找到。

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n*m
37
wy这是在高速大家这不是机器人写的

【在 w***w 的大作中提到】
: 凡人开始是这样写的。后来给WY删掉了。
: 我看到过没删前的版本。
: 在这个版向前找也可能找到。

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