m*2
2 楼
有人用iMac玩过星际么？我的是27寸512M显卡那款。上周买的，考虑如果可以玩的话就
去买个正版的星际号
去买个正版的星际号
s*h
3 楼
转到细胞双链DNA，我知道如果瞬时转染，DNA 将不能整合到基因组去，但是如何会有蛋白产生？ 非常疑惑 。
我不知道这一段DNA是如何进入细胞核的，进去了，一直处于游离状态，人家细胞自己
的DNA开始转录，可外来的DNA自己又没有promoter，怎么开始转录成RNA啊？
另外一个问题，是不是转染到细胞里，双链线性DNA，环状DNA，都可以？ 那单链DNA可以吗？
还有一个问题，我们平时摇菌，扩质粒，这些质粒都自己可以独立复制的吧，都是基本不整合到细菌基因组的吧。我们摇菌用的细菌自己有自己的质粒对不对？
分生非常差，不好意思，谢谢！
我不知道这一段DNA是如何进入细胞核的，进去了，一直处于游离状态，人家细胞自己
的DNA开始转录，可外来的DNA自己又没有promoter，怎么开始转录成RNA啊？
另外一个问题，是不是转染到细胞里，双链线性DNA，环状DNA，都可以？ 那单链DNA可以吗？
还有一个问题，我们平时摇菌，扩质粒，这些质粒都自己可以独立复制的吧，都是基本不整合到细菌基因组的吧。我们摇菌用的细菌自己有自己的质粒对不对？
分生非常差，不好意思，谢谢！
M*9
4 楼
暂时
h*y
5 楼
我用07的mbp都可以玩，呵呵，128m的 ...
【在 m*********2 的大作中提到】
: 有人用iMac玩过星际么？我的是27寸512M显卡那款。上周买的，考虑如果可以玩的话就
: 去买个正版的星际号
【在 m*********2 的大作中提到】
: 有人用iMac玩过星际么？我的是27寸512M显卡那款。上周买的，考虑如果可以玩的话就
: 去买个正版的星际号
s*y
6 楼
有蛋白产生？ 非常疑惑 。
Most plasmid for transient expression will carry their own promoter upstream
of the expression codon.
DNA可以吗？
single strand DNA is degraded easily and practically not ideal for
transfection.
本不整合到细菌基因组的吧。我们摇菌用的细菌自己有自己的质粒对不对？
Yes. Most of them have their own replication origin site.
If you look at the vector map you will notice things like "F1 Ori".
【在 s*****h 的大作中提到】
: 转到细胞双链DNA，我知道如果瞬时转染，DNA 将不能整合到基因组去，但是如何会有蛋白产生？ 非常疑惑 。
: 我不知道这一段DNA是如何进入细胞核的，进去了，一直处于游离状态，人家细胞自己
: 的DNA开始转录，可外来的DNA自己又没有promoter，怎么开始转录成RNA啊？
: 另外一个问题，是不是转染到细胞里，双链线性DNA，环状DNA，都可以？ 那单链DNA可以吗？
: 还有一个问题，我们平时摇菌，扩质粒，这些质粒都自己可以独立复制的吧，都是基本不整合到细菌基因组的吧。我们摇菌用的细菌自己有自己的质粒对不对？
: 分生非常差，不好意思，谢谢！
s*k
7 楼
希望ing能掉下1000
【在 w***i 的大作中提到】
: 才挺了一星期!
【在 w***i 的大作中提到】
: 才挺了一星期!
m*2
8 楼
哦，不卡么？因为我一直听说mac不是很适合玩游戏，而且怕玩多了伤害机器。
mac上用logitech的鼠标和键盘不会有什么不兼容 吧？
【在 h***y 的大作中提到】
: 我用07的mbp都可以玩，呵呵，128m的 ...
mac上用logitech的鼠标和键盘不会有什么不兼容 吧？
【在 h***y 的大作中提到】
: 我用07的mbp都可以玩，呵呵，128m的 ...
s*h
9 楼
谢谢！ 有个问题不明白，如果我转染进细胞的是双链线形DNA 而不是plasmid，也可以
对吧？这样的DNA是如何最后 有蛋白产生的，如果是瞬时转染？ 它没有整合入基因组
的话，不会复制转录翻译成蛋白把。谢谢！！
对吧？这样的DNA是如何最后 有蛋白产生的，如果是瞬时转染？ 它没有整合入基因组
的话，不会复制转录翻译成蛋白把。谢谢！！
w*i
10 楼
你说的是暂时是上涨还是下跌？
u*a
11 楼
除了摔电脑, 泼水, 没什么会伤害机器....
【在 m*********2 的大作中提到】
: 哦，不卡么？因为我一直听说mac不是很适合玩游戏，而且怕玩多了伤害机器。
: mac上用logitech的鼠标和键盘不会有什么不兼容 吧？
【在 m*********2 的大作中提到】
: 哦，不卡么？因为我一直听说mac不是很适合玩游戏，而且怕玩多了伤害机器。
: mac上用logitech的鼠标和键盘不会有什么不兼容 吧？
s*y
12 楼
You need to look at the sequence elements of the double strand DNA you are
using.
Most of them should carry a promoter. If not, then they won't get expression
in transient transfection. However, if they got integrated into chromosome,
they will.
I don't know how you get these questions, because they are not "real
questions".
It all depends on how you design the DNA for transfection therefore there is
NO real answers to it.
【在 s*****h 的大作中提到】
: 谢谢！ 有个问题不明白，如果我转染进细胞的是双链线形DNA 而不是plasmid，也可以
: 对吧？这样的DNA是如何最后 有蛋白产生的，如果是瞬时转染？ 它没有整合入基因组
: 的话，不会复制转录翻译成蛋白把。谢谢！！
using.
Most of them should carry a promoter. If not, then they won't get expression
in transient transfection. However, if they got integrated into chromosome,
they will.
I don't know how you get these questions, because they are not "real
questions".
It all depends on how you design the DNA for transfection therefore there is
NO real answers to it.
【在 s*****h 的大作中提到】
: 谢谢！ 有个问题不明白，如果我转染进细胞的是双链线形DNA 而不是plasmid，也可以
: 对吧？这样的DNA是如何最后 有蛋白产生的，如果是瞬时转染？ 它没有整合入基因组
: 的话，不会复制转录翻译成蛋白把。谢谢！！
M*9
13 楼
下跌
N*9
14 楼
完全没有问题，可以玩
【在 m*********2 的大作中提到】
: 有人用iMac玩过星际么？我的是27寸512M显卡那款。上周买的，考虑如果可以玩的话就
: 去买个正版的星际号
【在 m*********2 的大作中提到】
: 有人用iMac玩过星际么？我的是27寸512M显卡那款。上周买的，考虑如果可以玩的话就
: 去买个正版的星际号
X*n
15 楼
双链线形DNA，最大的可能是被细胞内的外切酶降解掉，也可能整合到基因组里。
【在 s*****h 的大作中提到】
: 谢谢！ 有个问题不明白，如果我转染进细胞的是双链线形DNA 而不是plasmid，也可以
: 对吧？这样的DNA是如何最后 有蛋白产生的，如果是瞬时转染？ 它没有整合入基因组
: 的话，不会复制转录翻译成蛋白把。谢谢！！
【在 s*****h 的大作中提到】
: 谢谢！ 有个问题不明白，如果我转染进细胞的是双链线形DNA 而不是plasmid，也可以
: 对吧？这样的DNA是如何最后 有蛋白产生的，如果是瞬时转染？ 它没有整合入基因组
: 的话，不会复制转录翻译成蛋白把。谢谢！！
h*w
16 楼
主要是奥八太面，派军队直接去乌克兰大概得上2000去了
s*h
17 楼
sorry,我从来都没做过这块，上课的东西也听不太懂。 谢谢楼上两位大侠！
w*i
18 楼
大家赶紧进货。
q*n
19 楼
Plasmid DNA does not replicate in mammalian cells.
The only thing they do is to provide a template for RNA transcription
because they all contain strong promoter such as CMV.
Becaue they don't replicate, their level will decrease and dispear after a
few days, that's why they are called "transient expression".
At low frequency, they may intergrate into genome, then they can replicate
along with the genome. You can use antibobitic to select this low frequent
clones, that is called "stable clone se
The only thing they do is to provide a template for RNA transcription
because they all contain strong promoter such as CMV.
Becaue they don't replicate, their level will decrease and dispear after a
few days, that's why they are called "transient expression".
At low frequency, they may intergrate into genome, then they can replicate
along with the genome. You can use antibobitic to select this low frequent
clones, that is called "stable clone se
A*t
20 楼
有新动向.
【在 w***i 的大作中提到】
: 大家赶紧进货。
【在 w***i 的大作中提到】
: 大家赶紧进货。
m*M
21 楼
I transfected cells with linearized CMV promoter driven GFP, and GFP was
expressed at high level for over one weeks (until I tossed them). They are
pretty stable in cells, is not that easy to be degraded (DNA or protein). It
's easy to test that, just cut off the ORF and transfect it.
expressed at high level for over one weeks (until I tossed them). They are
pretty stable in cells, is not that easy to be degraded (DNA or protein). It
's easy to test that, just cut off the ORF and transfect it.
b*r
22 楼
金子不会跌太多了。
l*e
23 楼
借他个胆子。
【在 h*****w 的大作中提到】
: 主要是奥八太面，派军队直接去乌克兰大概得上2000去了
【在 h*****w 的大作中提到】
: 主要是奥八太面，派军队直接去乌克兰大概得上2000去了
s*y
24 楼
个人观点：
一些国家的中央银行，要给投资者造成一个黄金价值及其动荡，不能作为保值工具的表
象，用来稳固纸币。
个人严重怀疑市场上的纸黄金有没有真正的实物支撑。
一些国家的中央银行，要给投资者造成一个黄金价值及其动荡，不能作为保值工具的表
象，用来稳固纸币。
个人严重怀疑市场上的纸黄金有没有真正的实物支撑。
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