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Biotin-tagged 的蛋白从beads 上洗不下来咋办?
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Biotin-tagged 的蛋白从beads 上洗不下来咋办?# Biology - 生物学
z*4
1
对于CPA的回复,再再次看了大量前辈们的帖子,觉得还是有疑问,请牛人们多指教,
谢谢!(该CPA为IRS指定的CPA 之一)
背景:LG 06年8月来美就读是F1身份,2013年1月底以F1/OPT身份工作,在2013年10月1
日转成H1B,我来美2年,没有工作,是H4身份。还有宝宝一人。目前是按照resident
married jointly for the whole year来报税
按照前辈们的分析,我LG虽然F1身份大于5年,但目前是按Resident alien,是应该可以
申报 tax exemption $5000 (根据China-US tax treaty: Article 20c)。他只有W2
Form
问题:1 我们找的CPA说不能在他们自己的系统上完成tax exemption $5000,并且回复
说他们已经咨询过IRS,说我们不可以这样操作,因为W2上没有将这 $5000免税,说这
是我LG公司的事情,他们概不负责。在这种情况下,我们自己手填1040 Form去做tax
exemption好不好?会影响到今后绿卡的申请吗?
问题2. 如果手填1040Form,是这样填写的吗?
Line 7: wages showed on W2
Line: 21: exemption income,China, Article 20c, see form 8833 -5000(1040表
上写的是 combine 而不是subtract)
Line 22:Line 7+Line 21
还是写成:
Line 7: wages showed on W2
Line: 21: exemption income,China, Article 20c, see form 8833 5000?
Line 22:Line 7 减去Line 21?
问题3 我是H4,没有SSN,是可以自己填写W-7并提交护照原件申请ITIN的吗?还是一定
要CPA或者agent?
对于W7 表上的6g Name of college/university or company City and state?
Length of stay?应该如何填写?我目前只是在家带宝宝,也需要填写吗?还是就填写
所待的州和时长就好了?
问题4:按照我老公2013年10月1日才由F1变成H1B,H1B是少于183天的,那么还需要File
extention吗?因为我有看到这样的帖子:
if you change from F1 to H1 and you are married
and you have been on H1 for at least 31 days,
you can file as resident married jointly for the whole year,
and enjoy standard deduction and tax treaty.
However if your H1 days < 183, you need to file extension first.See First-
Year Choice in pub 519 for details.
我的问题确实太多了,本想找个CPA一并解决,可惜对方什么都不懂。感觉目前问题越
来越多了。在此,只能求各位牛人们帮帮忙,谢谢!谢谢!非常感谢!
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y*n
2
http://www.traileraddict.com/trailer/due-date/trailer
导演Todd Phillips有广受好评的大作Old School和去年风光无限笑死人不偿命的
Hangover
此君进了NYU电影学院之后辍学,这点跟Woody Allen颇有相似之处(当然Allen是挂科
被开
除)。之后录像店当过店员,也算是比较坎坷。
Due Date找来去年靠Hangover红到发紫的Zach Galifianakis担纲
又有钢铁男,Jamie Foxx出演
还值得一提的是此片是Downey 和 Monaghan继Kiss Kiss Bang Bang之后第二次合作
也是Downey和Foxx在Soloist之后的第二次合作
在Apatow帮喜剧一统天下的近年,去年Hangover的崛起让人惊喜
这一部Due Date还是buddy喜剧的路子,加进公路旅行的元素,Downey扮演一个准爸爸和
Galifianakis,一名演员,一起穿越美国去等待Downey宝宝的诞生。
Trailer看起来算是普通
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p*i
3
已经试了1x, 2x SDS sample loading buffer,都丝毫无效
谢谢了先?
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r*t
4
老公干什么的,自己怎么不报税?
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s*a
5
试一下glycine呢?

【在 p**i 的大作中提到】
: 已经试了1x, 2x SDS sample loading buffer,都丝毫无效
: 谢谢了先?

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P*1
6
1. 大多数美国人不懂中美treaty,报税软件也不支持。但如果你LG以前一直可以用
treaty,OPT期间可以继续用treaty。
2. 是第一种填法
3. 可以自己填写w7申请,但必须要跟包含你的1040税表一起提交,不能e-file
4. 因为F1已经是第六年,F1期间已经是R,所以不用延期
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a*e
7
how do you know your proteins are on the beads?
how about biotin competitive elution?

【在 p**i 的大作中提到】
: 已经试了1x, 2x SDS sample loading buffer,都丝毫无效
: 谢谢了先?

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x*y
8
我的理解他的收入是公司里拿的,这样的话这个$5000 免税估计不能用,或者即使能用
,也会很麻烦,因为以前是学校里,自动在w2表格里加了说明,自动弄好了,报税时比
较好弄。
忘了这个5000免税有没有5年限制,or 是不是必须按照NR 报税的? 这个记不清了。

【在 P****1 的大作中提到】
: 1. 大多数美国人不懂中美treaty,报税软件也不支持。但如果你LG以前一直可以用
: treaty,OPT期间可以继续用treaty。
: 2. 是第一种填法
: 3. 可以自己填写w7申请,但必须要跟包含你的1040税表一起提交,不能e-file
: 4. 因为F1已经是第六年,F1期间已经是R,所以不用延期

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s*a
9
Purification of biotinylated proteins on streptavidin resin: A protocol for
quantitative elution。
For elution of biotinylated proteins, 500 mL
release solution (2% SDS, 30 mM biotin, 50 mM phosphate,
100 mM NaCl, 6 M urea, 2 M thiourea, pH ,12)
were added to the resin and incubated for 15 min at RT,
followed by incubation for 15 min at 96C. Afterwards, the
resin was pelleted by centrifugation for 5 min at 16 100g

【在 p**i 的大作中提到】
: 已经试了1x, 2x SDS sample loading buffer,都丝毫无效
: 谢谢了先?

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i*t
10
不管你R或NR多少年都可以5000treaty,很多所谓的会计师都不懂

【在 x**y 的大作中提到】
: 我的理解他的收入是公司里拿的,这样的话这个$5000 免税估计不能用,或者即使能用
: ,也会很麻烦,因为以前是学校里,自动在w2表格里加了说明,自动弄好了,报税时比
: 较好弄。
: 忘了这个5000免税有没有5年限制,or 是不是必须按照NR 报税的? 这个记不清了。

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n*d
11
我有答案,绝对管用,但需要包子。你有多少?
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z*4
12
谢谢回复!
我已经手填了,免去了这5000元。
那明年再报今年的税时还可以继续免5000?

【在 i*****t 的大作中提到】
: 不管你R或NR多少年都可以5000treaty,很多所谓的会计师都不懂
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p*i
13
1

【在 n******d 的大作中提到】
: 我有答案,绝对管用,但需要包子。你有多少?
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P*1
14
5000的treaty可以一直用到学生身份结束为止。你LG去年10月已经转为H1b了,所以只
能apply到去年9月之前的收入。去年10月起的收入就不能用了

【在 z*******4 的大作中提到】
: 谢谢回复!
: 我已经手填了,免去了这5000元。
: 那明年再报今年的税时还可以继续免5000?

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s*y
15
This is the correct protocol to be used.

for

【在 s****a 的大作中提到】
: Purification of biotinylated proteins on streptavidin resin: A protocol for
: quantitative elution。
: For elution of biotinylated proteins, 500 mL
: release solution (2% SDS, 30 mM biotin, 50 mM phosphate,
: 100 mM NaCl, 6 M urea, 2 M thiourea, pH ,12)
: were added to the resin and incubated for 15 min at RT,
: followed by incubation for 15 min at 96C. Afterwards, the
: resin was pelleted by centrifugation for 5 min at 16 100g

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