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请教siRNA 转染的问题

请教siRNA 转染的问题# Biology - 生物学

R*12010-05-10 07:05

1 楼

请教一下前辈和有经验的朋友们关于接受博后offer的问题：
最近有一个很有希望的高校博后offer. 教授人挺不错的，跟我的博士老板认识。这个
教授在最近的一封邮件里说愿意给我一份博后的offer。同时邮件里提到了可以提供的
年薪和合同的时间，问我是否愿意接受。我考虑了几天后回复对方，表示愿意接受这个
postdoc offer，如果工资和职位的头衔可以商量的话就更好了。对方很高兴，并回复
我说：工资要跟Dean商量，看看是否可以提高一点，他不能做主。但是头衔可以由他自
己做主。到此为止，一切顺利，双方都很开心。
后来问题来了：过了大概有1个多月，这位教授都没有跟我沟通过工资和头衔的问题，
更没有继续跟我讨论发给我正式offer的时间等细节。
我的问题是：我是否可以继续找其他工作？如果找到了更心仪的工作并接受其他的
offer，这样算不算不professional? 会不会影响将来可能的学术合作关系？因为对方
在学术界口碑不错，人也不错，同时还认识我的博士导师，我不想让对方搞得不开心，
得罪大牛。多谢指教！！！

t*y2010-05-10 07:05

2 楼

暑假课程在奥地利,但美国签证已经过期

z*c2010-05-10 07:05

3 楼

那可怜的孩子。你看了就知道为什么中国传销还那么火，跳进去的九牛不回。找了大
师的录像来看了看，一个多年以前的感慨又油然而生：没会中国去当骗子，真是浪费
了一身的武艺：）

S*r2010-05-10 07:05

4 楼

清秀少年一见此景，双目一亮，接着口中一声低喝，身形突然一下暴涨倍许，化为一
只头戴金冠，身穿罗袍的高大鬼王。
此鬼王面容赤红，浑身绿毛，背后更有一排尺许长骨刺蓦然生出，双目黄芒闪动下
，四颗獠牙显露而出。
此鬼大口一张，就喷出一股灰气将那条断臂一卷而入，并一口吞进了大口中，然后
“嘎嘣“直响的咀嚼了起来。
“好，既然吞灬噬了血祭之物，还快快将天鬼令借我一用。”秃头魔族脸色有些发
白，却口中一声厉喝。
“嘿嘿，这两人可不是普通的存在，让本王召想借天鬼对付他们，这点祭品可不太
够的。”鬼王口中紫红长舌一添嘴角血迹，将。中最后一点血肉也一咽而下后，却目露
贪婪之色的说道。
“什么，你别太过分了。不过要对付两名区区的人族修士，你吞灬噬了本尊的一条
手臂，竟然还不满足！”秃头魔族闻言，一下勃然大怒起来。
“哼，你倒说的轻松。这二人能和你以前的对手相比吗，我借你的那些天鬼，还不
知道会损失多少呢。看来你是贵人多忘事，已经忘了的当初通过天鬼门和本座所立契约
的内容了。要不要本王再提醒你一次！”鬼王却一阵怪笑声出口，阴森的说道。
一听厉鬼此言，秃头尊者脸色难看之极，猛然一咬牙下，突手中血刃再次一斩而出
，却是将自己的一条大腿也一削而落，然后恶狠狠的说道：
“这一次，总该够了吧！若是你还敢说个不，字，本座拼着两败俱伤也要解除和你
的契约。”
“再加此物的话，自然足够了。”鬼王一见此幕不禁大喜的连连点头，一张口，也
将掉落的大腿吸了过来，并大口咀嚼起来。
秃头魔族此时却口中念念有词，原本残缺的断臂和断腿处，一股股黑气凭空生出，
一阵翻滚下，就再次恢复如初的生出新的肢体来。
不过如此做法，反让此魔脸色越发的没有血色了。显然肢体虽然重生了但损失的那
些精血却无法一时弥补的。
而当鬼王几口将血食吞灬噬完毕后，当即欢畅的一声长啸，一条袖子一抖，手中蓦
然多出了一只鲜红似血的鬼头令牌，往身前虚空一抛后，自己却化为一股阴风的没入鬼
门之中，转眼间不见了踪影。
秃头魔族一见那鲜红鬼令，神色为之一松，然后望了韩立二人之后
立刻单手冲那令牌一点指。
鬼令顿时滴溜溜的在一阵急转起来，略一模糊下，竟一下化为一股血红旋风，。
风中一阵厉啸声传出，一分之下，竟从中一下跳出四只厉鬼，并迎风一涨之下，就
为了十余丈巨大……
这四只巨鬼浑身血红，通体无毛，但模样有几分酷似放大数十倍的猿猴只是每一只
头生乌黑双角，并留有一各碧绿钩尾，略一甩动下，竟瞬间无法看得清楚，只能听到虚
空中传来阵阵的爆鸣声。
秃头魔族一见，一见这四只血红天鬼，毫不犹豫的单手虚空一抓。
远处的那股血红旋风立刻一卷的重新化为了鬼头令牌并一个闪动下，落到了其手中。
此魔脸上狞色一现，立刻一道法决的打在令牌上同时口中开始念念有词起来。
那四只巨鬼明显受到那鬼头令牌的约束，在秃头魔族一催之下望向银光仙子的眼神
纷纷凶光毕露。
在其中一只天鬼厉啸下，四只天鬼同时背后血光一现竟各自生出一对巨大的紫色蝠
翼来，双翅一扇，竟凶神恶煞的扑向了困住他们的晶莹巨罩。
秃头魔族见此情形，脸土不禁闪过一丝冷笑。
这四只天鬼的可怕之处，经过以前数次的动用天鬼门后，再没有人比他更清楚了。
也许单个一只天鬼的实力，只不过相当于炼虚后期大成的存在，但是四只天鬼联手
之下，就是一般的合体中期修士也多半不是对手的。
纵然这个困住他们的罩子似乎有些古怪，但在四只天鬼出手下自然应该是不堪一击
的。
不过纵然如此，此魔还是一张口，喷出了一枚黑乎乎的小印象，一出口只有数寸大
小，但迎风一涨下，就化为了数丈，并一声轰鸣后，紧随四鬼的狠狠向头顶晶罩一砸而
去。
一个闪动间，四只天鬼就已经到了晶罩附近处，双臂一动，漫天爪影立刻浮现而出
，同时后钩尾“嗖“的一声，也幻化出无数碧芒的直刺而出。
四鬼联手一击下，攻击果然非同小可。
下一刻，罩壁上爆发出一团团刺目光芒，几乎只支撑了片刻工夫，就光芒一黯起来。
秃头魔族见此，自然大喜，更是猛然一催放出的黑色大印。
顿时此宝一个闪动下，就发出风雷之声的击在了同一处罩壁上，一圈圈的黑色波浪
立刻荡漾而开。
原本就似乎支撑不住的罩壁，顿时一声脆响传出，立刻现出无数纤细白痕来，似乎
马上就要破碎而开。
但就在这时，身处罩壁外的银光仙子，却身形一个闪动，就蓦然出现在了银色美女
头颅一旁，并毫不迟疑的一掌拍在其上。
银色头颅凝望着晶罩的双目，一下异芒大盛起来。
似乎与此相呼应，晶罩上的金色法阵也一下嗡鸣声发出，法阵中一下涌现出无数金
色符文，在闪动之下，飞也似的没入破裂的罩壁处。
诡异的一幕出现了！
原本破裂在即的罩壁，在这些金色符文没入其中的瞬间，就金光一闪的弥合如初了。
银光仙子远远看到此景，嘴角不禁微微一翘。
秃头魔族却为之一呆起来，但马上就清醒过来，当即惊怒交加的一声大喝，再次一
催手中的鬼头令牌和那颗黑色大印起来。
空中的四只天鬼双目血光一阵流转，同样发出暴怒的尖叫之声身形再次一涨大半下
，张口喷出一道道血色光柱来，同时双手爪影和钩尾碧芒也再次浮现而出。
至于那颗黑色巨印，则雷鸣声大响，一道道黑色电光在从中弹shè而出，同时大印
底部也有数以百计的银文纷纷涌现而出。
显然秃头魔族将此宝的威能也催至了极限。
狂风暴雨般的攻击再次落在罩壁上，让其立刻光芒狂闪，当随着巨大黑印狠狠一砸
而上后，一轮黑色骄阳立刻在惊天动地的巨响中浮现而出。
骄阳浮现处罩壁轻易的破碎而开但在金色法阵金光大放下，又瞬间的恢复如初。
这一下，秃头魔族脸色一下难看之极，但手中法决却丝毫不停，继续催动大印和四
只天鬼，往晶罩上狂攻不已
此魔很清楚，这晶罩纵然玄妙之极，但绝不可能无限制的保持这种可怕的恢复速度
，只要持续攻击不断不用多长时间就可真互破困而出的。
但关键是另外一名人族修士可是击杀了力尊者的存在，他那位同伴不会在此期间出
什么意外吧。
秃头魔族一边狂攻晶罩不停，一边略有些不安的扫向了另一边的战团处，结果脸色
为之大变。
只见在那边，漫天金色剑丝正组成一张巨大剑网，将数十条蓝色飞蛇困在一处。那
些蓝色飞shè纵然身体坚硬逾金，并口吐玄冰之气，但是在那金丝纵横交错，却纷纷的
化为碎尸而落。
不远处，那是十三具骸骨所化魔女此刻又现出了原形。
它们又化为两丈的白森森骸骨浑身黑色魔焰缭绕，口喷灰蒙蒙毒气，双目更是不时
喷一道道琉璃般的异芒，但这般神通尽出模样的子母真魔，此刻却被十几只金光灿灿的
紫纹怪虫，追的到处乱窜。
这些大名鼎鼎的子母真魔，竟似乎对这些怪虫畏惧非常竟不敢让它们近身分毫。这
些魔头的魔焰毒气等一切攻击，也都对这些灵虫无效似的。
至于那位蓝尊者本身此刻却更加的狼狈！
那名人族修士竟幻化成一只百丈高的巨大金猿，两条手臂舞动一青一黑两座小山以
威不可挡之势将蓝纹魔族逼得节节后退。
纵然蓝纹魔族又惊又怒，手中法决变幻不停身前更是有六七件不同宝物盘旋狂舞但
无论哪种宝物一接两座山峰的狂击，都必定光芒乱闪要立刻撤回的换上其他宝物。否则
只要接连硬接三四击下，就必定宝物被毁的样子。
这位堂堂的魔族尊者，不过片刻工夫就全面大处下风的样子。
秃头魔族神色接连变动数下，倒吸了一口凉气。这十三具子母真魔的威能，可不下
于他召唤来的四只天鬼，竟然被对方肉区区几只灵虫就逼成了这般模样。
看来他先前虽然知道那名人族男修非同小可，但仍有些低估了对方。
此人如此棘手的样子，恐怕也只有族中的那三四位合体后期大成的魔尊，才能有把
握对付的。
秃头魔族心中如此思量着，心中不禁一片骇然。
不过他马上眼珠一转下，蓦然嘴唇微动的向自己同伴传音了过去。

p*d2010-05-10 07:05

5 楼

实验要用siRNA 瞬时knockdown贴壁细胞系老鼠的Notch1和Notch4。有没有人推荐哪个
公司的哪个
产品效率比较好的？
我初步看了一下ambion的产品，不知道买多少比较合适？怎么稀释？有没有前辈有转染
的protocol可
以参考一下。我打算是要做T25的小flask，因为要比较多的细胞跑流式的。

i*t2010-05-10 07:05

6 楼

工资和头衔商量一下？
然后没有结果啦。薄厚到底看的是工资头衔，还是研究呢？

【在 R******1 的大作中提到】

: 请教一下前辈和有经验的朋友们关于接受博后offer的问题：
: 最近有一个很有希望的高校博后offer. 教授人挺不错的，跟我的博士老板认识。这个
: 教授在最近的一封邮件里说愿意给我一份博后的offer。同时邮件里提到了可以提供的
: 年薪和合同的时间，问我是否愿意接受。我考虑了几天后回复对方，表示愿意接受这个
: postdoc offer，如果工资和职位的头衔可以商量的话就更好了。对方很高兴，并回复
: 我说：工资要跟Dean商量，看看是否可以提高一点，他不能做主。但是头衔可以由他自
: 己做主。到此为止，一切顺利，双方都很开心。
: 后来问题来了：过了大概有1个多月，这位教授都没有跟我沟通过工资和头衔的问题，
: 更没有继续跟我讨论发给我正式offer的时间等细节。
: 我的问题是：我是否可以继续找其他工作？如果找到了更心仪的工作并接受其他的

t*s2010-05-10 07:05

7 楼

最近刚在悉尼的美领馆renew过，没啥问题。

z*c2010-05-10 07:05

8 楼

本来很轻松幽默的非你莫属，也开始玩矫情那种烂套路。老人倒了都没人扶，整那些
没用的干吗？

f*x2010-05-10 07:05

9 楼

老魔对上真魔，打得越来越磨叽了。灭同阶都要费这么多周折

【在 S*********r 的大作中提到】

: 清秀少年一见此景，双目一亮，接着口中一声低喝，身形突然一下暴涨倍许，化为一
: 只头戴金冠，身穿罗袍的高大鬼王。
: 此鬼王面容赤红，浑身绿毛，背后更有一排尺许长骨刺蓦然生出，双目黄芒闪动下
: ，四颗獠牙显露而出。
: 此鬼大口一张，就喷出一股灰气将那条断臂一卷而入，并一口吞进了大口中，然后
: “嘎嘣“直响的咀嚼了起来。
: “好，既然吞灬噬了血祭之物，还快快将天鬼令借我一用。”秃头魔族脸色有些发
: 白，却口中一声厉喝。
: “嘿嘿，这两人可不是普通的存在，让本王召想借天鬼对付他们，这点祭品可不太
: 够的。”鬼王口中紫红长舌一添嘴角血迹，将。中最后一点血肉也一咽而下后，却目露

p*d2010-05-10 07:05

10 楼

怎么连个看的人都没有啊。唉，自己顶一下吧。

R*12010-05-10 07:05

11 楼

当然博后是为了增长研究经历和拓展方向，我想问问总是可以的吧。。。我本来也不在
乎头衔和工资，如果对方说没有商量余地，我就等着签合同。

【在 i*****t 的大作中提到】

: 工资和头衔商量一下？
: 然后没有结果啦。薄厚到底看的是工资头衔，还是研究呢？

L*l2010-05-10 07:05

12 楼

偶也是，要去奥地利一整个月，实在不想先回国renew好再去
或者能去加拿大弄么？

【在 t*******y 的大作中提到】

: 暑假课程在奥地利,但美国签证已经过期

s*m2010-05-10 07:05

13 楼

这个节目很欢闹，我也喜欢看
那个成功学看来害了不少人。那个什么一秒大师，一脸骗子样，竟然有人信
看过天津那个小伙子面试司机吗？比相声都搞笑

【在 z**c 的大作中提到】

: 那可怜的孩子。你看了就知道为什么中国传销还那么火，跳进去的九牛不回。找了大
: 师的录像来看了看，一个多年以前的感慨又油然而生：没会中国去当骗子，真是浪费
: 了一身的武艺：）

r*k2010-05-10 07:05

14 楼

既然剩下二人并不厉害，还有必要写这么多么，赶紧解决了算了。

O*e2010-05-10 07:05

15 楼

看看别人的PAPER，看有没有已经被人用过的顺讯，然后自几找个公司合成就是了。
如果非要买别人预制的，哪家都差不多了。他们会给你MANUAL，照着做就是了。
5nmol/each oligo is more than enough for you to try their efficiency.

【在 p******d 的大作中提到】

: 实验要用siRNA 瞬时knockdown贴壁细胞系老鼠的Notch1和Notch4。有没有人推荐哪个
: 公司的哪个
: 产品效率比较好的？
: 我初步看了一下ambion的产品，不知道买多少比较合适？怎么稀释？有没有前辈有转染
: 的protocol可
: 以参考一下。我打算是要做T25的小flask，因为要比较多的细胞跑流式的。

R*12010-05-10 07:05

16 楼

m*r2010-05-10 07:05

17 楼

奥地利的美国领馆貌似很不友好，去年的时候我也是这种情况，
写信去美国领馆问能不能在那边renew美国签证，答曰只有EU Citizen可以再那边renew
不知道现在是不是有所改进
后来是去完奥地利，回程机票买到温哥华，在温哥华renew美国签证以后，再回美国的
当然之前要弄好加拿大签证

T*i2010-05-10 07:05

18 楼

难道在美国就不火了？一样火

【在 z**c 的大作中提到】

a*a2010-05-10 07:05

19 楼

不知道是要逃跑还是召唤圣祖救命

p*d2010-05-10 07:05

20 楼

谢谢啊！

i*t2010-05-10 07:05

21 楼

工资和头衔商量一下？
然后没有结果啦。薄厚到底看的是工资头衔，还是研究呢？

【在 R******1 的大作中提到】

z*c2010-05-10 07:05

22 楼

中国特色的成功学是中国传销的理论基础。这样的精神垃圾的核心就是为达目的不择
手段。
天津小伙的那个段子我看了，网上有未删节完整版。

【在 s******m 的大作中提到】

: 这个节目很欢闹，我也喜欢看
: 那个成功学看来害了不少人。那个什么一秒大师，一脸骗子样，竟然有人信
: 看过天津那个小伙子面试司机吗？比相声都搞笑

D*o2010-05-10 07:05

23 楼

他们不是布置了一个大阵么

【在 a*****a 的大作中提到】

: 不知道是要逃跑还是召唤圣祖救命

d*u2010-05-10 07:05

24 楼

我们实验室用的是qiagen的siRNA，invitrogen的RNAiMAX

R*12010-05-10 07:05

25 楼

: 工资和头衔商量一下？
: 然后没有结果啦。薄厚到底看的是工资头衔，还是研究呢？

m*e2010-05-10 07:05

26 楼

老魔现在不变应万变啊，总之就是搞大力水手那一套。

d*g2010-05-10 07:05

27 楼

多个offer或面试，有时也是烦恼。

y*d2010-05-10 07:05

28 楼

雷声大雨点小

【在 S*********r 的大作中提到】

a*y2010-05-10 07:05

29 楼

我觉得你先跟那个教授联系一下问问吧，看他怎么说，要是正给你办着就等一下，要是
有啥阻碍了你就找新的

k*L2010-05-10 07:05

30 楼

靠。劳模不是还有第二元婴么？弄出来不就搞定了？

h*82010-05-10 07:05

31 楼

全秒了作者赚不到稿费啦

y*n2010-05-10 07:05

32 楼

高潮之前总得多搞几招花样。

r*o2010-05-10 07:05

33 楼

现在凡人只剩打斗了，这不再多写点就真的没啥可看的了

【在 r***k 的大作中提到】

: 既然剩下二人并不厉害，还有必要写这么多么，赶紧解决了算了。

b*e2010-05-10 07:05

34 楼

猴子在的时候，这都是废材，随便吃啊

【在 f**x 的大作中提到】

: 老魔对上真魔，打得越来越磨叽了。灭同阶都要费这么多周折

T*s2010-05-10 07:05

35 楼

所以猴子必须送走啊

【在 b*********e 的大作中提到】

: 猴子在的时候，这都是废材，随便吃啊

b*m2010-05-10 07:05

36 楼

run-run actually never killed any joined-body level enemy easily, which I
think make sense.
For lower level fights, there could be outstanding player, however for
higher level fights, the gap between senior players are not that big. Also,
to totally killed a joined-body is much much harder than just defeat one.
And I fully understand that WY is exchanging word-counts for money, just
hoping his words worth the money, although I am not paying anything.