b*r
2 楼
之前约好了18日的签证，莫名其妙被取消了，没任何理由。不得已约了19号的。
请问有人约到18号的吗？如果18号又开放了的话，再约回18号的。
请问有人约到18号的吗？如果18号又开放了的话，再约回18号的。
S*t
3 楼
新晋大菜鸟本着不折腾的精神，吸着版上众高手放的毒，轰轰烈烈地直入胶片了。最近
家附近唯一可以洗35MM胶卷的GIANT也关闭了。其他地方象CVS, RITE AID, WALMART,
TARGET, SAM'S CLUB又贵又远。只好把第一卷试拍完的胶卷寄到SNAPFISH。两周后收到
PRINTS+PHOTO CD。收费0刀。因为没试过其他地方，也不好比较冲印效果。一卷36张，
废片不少。选吧选吧，也就几张能看。
都是用的Pentax MZ-3, FA*24/2, Fujicolor100。原片仅在光影里缩小尺寸和加边框。
家附近唯一可以洗35MM胶卷的GIANT也关闭了。其他地方象CVS, RITE AID, WALMART,
TARGET, SAM'S CLUB又贵又远。只好把第一卷试拍完的胶卷寄到SNAPFISH。两周后收到
PRINTS+PHOTO CD。收费0刀。因为没试过其他地方，也不好比较冲印效果。一卷36张，
废片不少。选吧选吧，也就几张能看。
都是用的Pentax MZ-3, FA*24/2, Fujicolor100。原片仅在光影里缩小尺寸和加边框。
l*x
4 楼
做CO-IP时，Input量对于IP蛋白刚好时，对CO-IP下来的蛋白来说，实在太多了。相反
，对CO-IP蛋白刚好量的Input对IP蛋白来说又太少了。不知道大家怎么控制Input的，
我是转在一张膜上后，按照IP和CO-IP蛋白的分子量大小，剪开膜后各自用相应的抗体
WESTERN的。实验室没有别人做这个实验，自己一个人也不知道怎么样做是对的。先谢
谢大家了。
，对CO-IP蛋白刚好量的Input对IP蛋白来说又太少了。不知道大家怎么控制Input的，
我是转在一张膜上后，按照IP和CO-IP蛋白的分子量大小，剪开膜后各自用相应的抗体
WESTERN的。实验室没有别人做这个实验，自己一个人也不知道怎么样做是对的。先谢
谢大家了。
G*O
5 楼
CO-IP尤其是共转细胞上的CO-IP与其说是做科学不如说是做艺术.
试试调整一抗浓度,曝光时间,最重要的是X光胶片一定要准备充足.
【在 l**x 的大作中提到】
: 做CO-IP时，Input量对于IP蛋白刚好时，对CO-IP下来的蛋白来说，实在太多了。相反
: ，对CO-IP蛋白刚好量的Input对IP蛋白来说又太少了。不知道大家怎么控制Input的，
: 我是转在一张膜上后，按照IP和CO-IP蛋白的分子量大小，剪开膜后各自用相应的抗体
: WESTERN的。实验室没有别人做这个实验，自己一个人也不知道怎么样做是对的。先谢
: 谢大家了。
试试调整一抗浓度,曝光时间,最重要的是X光胶片一定要准备充足.
【在 l**x 的大作中提到】
: 做CO-IP时，Input量对于IP蛋白刚好时，对CO-IP下来的蛋白来说，实在太多了。相反
: ，对CO-IP蛋白刚好量的Input对IP蛋白来说又太少了。不知道大家怎么控制Input的，
: 我是转在一张膜上后，按照IP和CO-IP蛋白的分子量大小，剪开膜后各自用相应的抗体
: WESTERN的。实验室没有别人做这个实验，自己一个人也不知道怎么样做是对的。先谢
: 谢大家了。
w*a
6 楼
这个实验不就是定个性嘛，最后western band大小控制曝光就完了嘛。
反正你两个band剪开了又不在一张膜上。
【在 l**x 的大作中提到】
: 做CO-IP时，Input量对于IP蛋白刚好时，对CO-IP下来的蛋白来说，实在太多了。相反
: ，对CO-IP蛋白刚好量的Input对IP蛋白来说又太少了。不知道大家怎么控制Input的，
: 我是转在一张膜上后，按照IP和CO-IP蛋白的分子量大小，剪开膜后各自用相应的抗体
: WESTERN的。实验室没有别人做这个实验，自己一个人也不知道怎么样做是对的。先谢
: 谢大家了。
反正你两个band剪开了又不在一张膜上。
【在 l**x 的大作中提到】
: 做CO-IP时，Input量对于IP蛋白刚好时，对CO-IP下来的蛋白来说，实在太多了。相反
: ，对CO-IP蛋白刚好量的Input对IP蛋白来说又太少了。不知道大家怎么控制Input的，
: 我是转在一张膜上后，按照IP和CO-IP蛋白的分子量大小，剪开膜后各自用相应的抗体
: WESTERN的。实验室没有别人做这个实验，自己一个人也不知道怎么样做是对的。先谢
: 谢大家了。
l*x
7 楼
我估计没有讲清楚，假如A和B相互作用，我用CO-IP检测，用A抗体IP，之后我把IP的样
品，对照和一定量的蛋白当作Input一起点到胶后，转膜，把膜切成两部份，一半检测A
，另一半检测B。所以A和B真正的input量是一样的。因为是用A抗体IP的，所以IP样品
的A特别多，需要比较多的input才能让input的A条带和IP样品的A条带看上去差不多。
但这样的input对于IP样品的B来说过多了,就是说input的B条带比IP样品的B条带看上去
浓很多很多。不知道怎么处理这个问题较好。希望这次能讲的明白些。谢谢
品，对照和一定量的蛋白当作Input一起点到胶后，转膜，把膜切成两部份，一半检测A
，另一半检测B。所以A和B真正的input量是一样的。因为是用A抗体IP的，所以IP样品
的A特别多，需要比较多的input才能让input的A条带和IP样品的A条带看上去差不多。
但这样的input对于IP样品的B来说过多了,就是说input的B条带比IP样品的B条带看上去
浓很多很多。不知道怎么处理这个问题较好。希望这次能讲的明白些。谢谢
l*x
8 楼
但是input和IP的样品是在同一半膜上的。
【在 w***a 的大作中提到】
: 这个实验不就是定个性嘛，最后western band大小控制曝光就完了嘛。
: 反正你两个band剪开了又不在一张膜上。
【在 w***a 的大作中提到】
: 这个实验不就是定个性嘛，最后western band大小控制曝光就完了嘛。
: 反正你两个band剪开了又不在一张膜上。
w*t
9 楼
I always run two gels, one for IP and one for co-IP. Usually, the IP samples
will be diluted for 10-fold.
will be diluted for 10-fold.
l*x
10 楼
Thanks much.
samples
【在 w**t 的大作中提到】
: I always run two gels, one for IP and one for co-IP. Usually, the IP samples
: will be diluted for 10-fold.
samples
【在 w**t 的大作中提到】
: I always run two gels, one for IP and one for co-IP. Usually, the IP samples
: will be diluted for 10-fold.
i*k
11 楼
为什么一定要“input的A条带和IP样品的A条带看上去差不多”？？？
测A
【在 l**x 的大作中提到】
: 我估计没有讲清楚，假如A和B相互作用，我用CO-IP检测，用A抗体IP，之后我把IP的样
: 品，对照和一定量的蛋白当作Input一起点到胶后，转膜，把膜切成两部份，一半检测A
: ，另一半检测B。所以A和B真正的input量是一样的。因为是用A抗体IP的，所以IP样品
: 的A特别多，需要比较多的input才能让input的A条带和IP样品的A条带看上去差不多。
: 但这样的input对于IP样品的B来说过多了,就是说input的B条带比IP样品的B条带看上去
: 浓很多很多。不知道怎么处理这个问题较好。希望这次能讲的明白些。谢谢
测A
【在 l**x 的大作中提到】
: 我估计没有讲清楚，假如A和B相互作用，我用CO-IP检测，用A抗体IP，之后我把IP的样
: 品，对照和一定量的蛋白当作Input一起点到胶后，转膜，把膜切成两部份，一半检测A
: ，另一半检测B。所以A和B真正的input量是一样的。因为是用A抗体IP的，所以IP样品
: 的A特别多，需要比较多的input才能让input的A条带和IP样品的A条带看上去差不多。
: 但这样的input对于IP样品的B来说过多了,就是说input的B条带比IP样品的B条带看上去
: 浓很多很多。不知道怎么处理这个问题较好。希望这次能讲的明白些。谢谢
g*5
12 楼
use licor system, you would say goodby with your film.:)
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