b*r
2 楼
之前约好了18日的签证,莫名其妙被取消了,没任何理由。不得已约了19号的。
请问有人约到18号的吗?如果18号又开放了的话,再约回18号的。
请问有人约到18号的吗?如果18号又开放了的话,再约回18号的。
S*t
3 楼
新晋大菜鸟本着不折腾的精神,吸着版上众高手放的毒,轰轰烈烈地直入胶片了。最近
家附近唯一可以洗35MM胶卷的GIANT也关闭了。其他地方象CVS, RITE AID, WALMART,
TARGET, SAM'S CLUB又贵又远。只好把第一卷试拍完的胶卷寄到SNAPFISH。两周后收到
PRINTS+PHOTO CD。收费0刀。因为没试过其他地方,也不好比较冲印效果。一卷36张,
废片不少。选吧选吧,也就几张能看。
都是用的Pentax MZ-3, FA*24/2, Fujicolor100。原片仅在光影里缩小尺寸和加边框。
家附近唯一可以洗35MM胶卷的GIANT也关闭了。其他地方象CVS, RITE AID, WALMART,
TARGET, SAM'S CLUB又贵又远。只好把第一卷试拍完的胶卷寄到SNAPFISH。两周后收到
PRINTS+PHOTO CD。收费0刀。因为没试过其他地方,也不好比较冲印效果。一卷36张,
废片不少。选吧选吧,也就几张能看。
都是用的Pentax MZ-3, FA*24/2, Fujicolor100。原片仅在光影里缩小尺寸和加边框。
l*x
4 楼
做CO-IP时,Input量对于IP蛋白刚好时,对CO-IP下来的蛋白来说,实在太多了。相反
,对CO-IP蛋白刚好量的Input对IP蛋白来说又太少了。不知道大家怎么控制Input的,
我是转在一张膜上后,按照IP和CO-IP蛋白的分子量大小,剪开膜后各自用相应的抗体
WESTERN的。实验室没有别人做这个实验,自己一个人也不知道怎么样做是对的。先谢
谢大家了。
,对CO-IP蛋白刚好量的Input对IP蛋白来说又太少了。不知道大家怎么控制Input的,
我是转在一张膜上后,按照IP和CO-IP蛋白的分子量大小,剪开膜后各自用相应的抗体
WESTERN的。实验室没有别人做这个实验,自己一个人也不知道怎么样做是对的。先谢
谢大家了。
l*x
7 楼
我估计没有讲清楚,假如A和B相互作用,我用CO-IP检测,用A抗体IP,之后我把IP的样
品,对照和一定量的蛋白当作Input一起点到胶后,转膜,把膜切成两部份,一半检测A
,另一半检测B。所以A和B真正的input量是一样的。因为是用A抗体IP的,所以IP样品
的A特别多,需要比较多的input才能让input的A条带和IP样品的A条带看上去差不多。
但这样的input对于IP样品的B来说过多了,就是说input的B条带比IP样品的B条带看上去
浓很多很多。不知道怎么处理这个问题较好。希望这次能讲的明白些。谢谢
品,对照和一定量的蛋白当作Input一起点到胶后,转膜,把膜切成两部份,一半检测A
,另一半检测B。所以A和B真正的input量是一样的。因为是用A抗体IP的,所以IP样品
的A特别多,需要比较多的input才能让input的A条带和IP样品的A条带看上去差不多。
但这样的input对于IP样品的B来说过多了,就是说input的B条带比IP样品的B条带看上去
浓很多很多。不知道怎么处理这个问题较好。希望这次能讲的明白些。谢谢
w*t
9 楼
I always run two gels, one for IP and one for co-IP. Usually, the IP samples
will be diluted for 10-fold.
will be diluted for 10-fold.
i*k
11 楼
为什么一定要“input的A条带和IP样品的A条带看上去差不多”???
测A
【在 l**x 的大作中提到】
: 我估计没有讲清楚,假如A和B相互作用,我用CO-IP检测,用A抗体IP,之后我把IP的样
: 品,对照和一定量的蛋白当作Input一起点到胶后,转膜,把膜切成两部份,一半检测A
: ,另一半检测B。所以A和B真正的input量是一样的。因为是用A抗体IP的,所以IP样品
: 的A特别多,需要比较多的input才能让input的A条带和IP样品的A条带看上去差不多。
: 但这样的input对于IP样品的B来说过多了,就是说input的B条带比IP样品的B条带看上去
: 浓很多很多。不知道怎么处理这个问题较好。希望这次能讲的明白些。谢谢
测A
【在 l**x 的大作中提到】
: 我估计没有讲清楚,假如A和B相互作用,我用CO-IP检测,用A抗体IP,之后我把IP的样
: 品,对照和一定量的蛋白当作Input一起点到胶后,转膜,把膜切成两部份,一半检测A
: ,另一半检测B。所以A和B真正的input量是一样的。因为是用A抗体IP的,所以IP样品
: 的A特别多,需要比较多的input才能让input的A条带和IP样品的A条带看上去差不多。
: 但这样的input对于IP样品的B来说过多了,就是说input的B条带比IP样品的B条带看上去
: 浓很多很多。不知道怎么处理这个问题较好。希望这次能讲的明白些。谢谢
g*5
12 楼
use licor system, you would say goodby with your film.:)
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