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请教DTT能打开链间二硫键吗?
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请教DTT能打开链间二硫键吗?# Biology - 生物学
g*y
1
RT.
H1B 10月1号生效。如果回北京签H1B,如何预约?
先填好DS160,然后交签证费,之后用那个收据上的编码上网预约么?》
在哪里能看到现在能预约到几号面签呢?
谢谢,
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s*l
2
From Q'Blog:
knight
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Freshman
Join Date:Aug 2011
Posts:2Hello all,
I've been reading this forum everyday for about a couple of months now, and
finally decided to register. I am a EB2I PWMB with a PD of 04May07. I was
hoping that my PD will get current this September, but like everyone was
disappointed. Anyways, kudos to all the gurus for the great number crunching
that you do and the other members as well. I really appreciate the
camaraderie on this forum.
I have some information that I wanted to share - a lot of people from the
company (in SanDiego) that I work for, have moved to A (in Cupertino). There
was a sudden need for people with experience here and so the company
decided to bring a bunch of people from the branch in India, promising them
that they would file GCs for them in EB1. These are not very senior guys
either and have about the same experience as me. Over the past 3 months, I
have seen several people who came here from the India branch. Our company
filed for them in EB1 and to my surprise almost all of them got FP notices
by now. And I thought to myself - here I am slogging for five years, and
most likely will have to wait for one more.
I have read posts about Kazarian memo and how difficult things are for
filing in EB1, but I guess that only applies for students/researchers who
got their PhD here. I wonder what kind of restrictions exist / how strict
USCIS is about the applications filed for manager positions in EB1.
Apparently, our company lawyers seem to have found a quick way to get around
those! Not very fair IMHO, and I am a victim of this as well!!
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c*k
3
很热闹很欢乐
IMAX 3D飙车的效果也很爽
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m*e
4
看了版上的推荐,现在一直在跟死人经。觉得作者真是不错,写的很用心,情节构思也
都不错,更新的也很准时,比较勤。像这样用心的好作品,写了这么多章了,都写了7
0多万字了,还是全免费的,没搞上VIP,觉得替作者有些惋惜。也希望他不放弃,坚
持下去,是金子总会发光的。
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s*e
5
4 度情况下,
大肠杆菌表达的蛋白,可能形成了蛋白间二硫键, 以至于在柱层析时表现不好,我想
得到均一的蛋白,不想让蛋白变性,求教如果加入DTT的话,可以打开已形成的二硫键
吗?
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e*7
6
现在可以网上预约。申请一个签证申请的账号,里面可以预约面试的时间
所有available的时间都被列出来了,你自己挑一个。
在 gummybeary (gummybeary) 的大作中提到: 】
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H*i
7
APPLE hired a lot of people from other companies?
As a result, other companies hire a lot of people on EB1 from India?
That's why there's a big demand?
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b*d
8
没什么笑料,那低俗的拖车唧唧歪歪个不停,真他妈烦人,好几次我都恨不得掐死他
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l*s
9
写得真心不错。如果他出实体书我一定买一套支持

【在 m******e 的大作中提到】
: 看了版上的推荐,现在一直在跟死人经。觉得作者真是不错,写的很用心,情节构思也
: 都不错,更新的也很准时,比较勤。像这样用心的好作品,写了这么多章了,都写了7
: 0多万字了,还是全免费的,没搞上VIP,觉得替作者有些惋惜。也希望他不放弃,坚
: 持下去,是金子总会发光的。

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O*e
10
从理论上来说,表面的二硫键应该可以被打开,但如果你的蛋白形成了complex,那内
部的还是很难被打开。

【在 s******e 的大作中提到】
: 4 度情况下,
: 大肠杆菌表达的蛋白,可能形成了蛋白间二硫键, 以至于在柱层析时表现不好,我想
: 得到均一的蛋白,不想让蛋白变性,求教如果加入DTT的话,可以打开已形成的二硫键
: 吗?

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A*g
11
they are so creative in cheating

and

【在 s*****l 的大作中提到】
: From Q'Blog:
: knight
: View Profile View Forum Posts Private Message View Blog Entries
: Freshman
: Join Date:Aug 2011
: Posts:2Hello all,
: I've been reading this forum everyday for about a couple of months now, and
: finally decided to register. I am a EB2I PWMB with a PD of 04May07. I was
: hoping that my PD will get current this September, but like everyone was
: disappointed. Anyways, kudos to all the gurus for the great number crunching

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c*k
12
挺搞的啊,FBI CIA triple A
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m*r
13
70万字? 这么肥?

【在 m******e 的大作中提到】
: 看了版上的推荐,现在一直在跟死人经。觉得作者真是不错,写的很用心,情节构思也
: 都不错,更新的也很准时,比较勤。像这样用心的好作品,写了这么多章了,都写了7
: 0多万字了,还是全免费的,没搞上VIP,觉得替作者有些惋惜。也希望他不放弃,坚
: 持下去,是金子总会发光的。

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s*e
14
跑SDS-PAGE时看到了一条大约于蛋白分子量的带,说明是二聚体吗?二聚体是不是会比
较容易打开?DTT的浓度多大为好呢?
谢谢!
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A*g
15
those sob consumes 10K quota?

and

【在 s*****l 的大作中提到】
: From Q'Blog:
: knight
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: Posts:2Hello all,
: I've been reading this forum everyday for about a couple of months now, and
: finally decided to register. I am a EB2I PWMB with a PD of 04May07. I was
: hoping that my PD will get current this September, but like everyone was
: disappointed. Anyways, kudos to all the gurus for the great number crunching

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m*e
16
yes, fat enough now.

【在 m*r 的大作中提到】
: 70万字? 这么肥?
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O*e
17
SDS-PAGE不会看到二聚体

【在 s******e 的大作中提到】
: 跑SDS-PAGE时看到了一条大约于蛋白分子量的带,说明是二聚体吗?二聚体是不是会比
: 较容易打开?DTT的浓度多大为好呢?
: 谢谢!

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c*s
18
hai.................
no hope for EB2C
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wy
19
确实是小白文横行啊

【在 m******e 的大作中提到】
: 看了版上的推荐,现在一直在跟死人经。觉得作者真是不错,写的很用心,情节构思也
: 都不错,更新的也很准时,比较勤。像这样用心的好作品,写了这么多章了,都写了7
: 0多万字了,还是全免费的,没搞上VIP,觉得替作者有些惋惜。也希望他不放弃,坚
: 持下去,是金子总会发光的。

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h*t
20
redcuing gel? if so, you will not see dimer, maybe it is just a contaminant

【在 s******e 的大作中提到】
: 跑SDS-PAGE时看到了一条大约于蛋白分子量的带,说明是二聚体吗?二聚体是不是会比
: 较容易打开?DTT的浓度多大为好呢?
: 谢谢!

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c*n
21
谁能把这个发给奥本么?看看他怎么解释?

【在 c**s 的大作中提到】
: hai.................
: no hope for EB2C

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T*c
22
大家可以去打赏啊,投各种花钱的票啊,多了应该会引起起点编辑重视吧。。。
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v*a
23
大约于?是约大于的typo吗?
有时也可能是不同组织细胞中蛋白会有不同的modification,或者isoform,分子量就
会有上下浮动的。

【在 s******e 的大作中提到】
: 跑SDS-PAGE时看到了一条大约于蛋白分子量的带,说明是二聚体吗?二聚体是不是会比
: 较容易打开?DTT的浓度多大为好呢?
: 谢谢!

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H*i
24
give me the link, I'll do it with my explanations

【在 c*********n 的大作中提到】
: 谁能把这个发给奥本么?看看他怎么解释?
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G*s
25
这年头,市场为王,非小白书很难走下去的

【在 T***c 的大作中提到】
: 大家可以去打赏啊,投各种花钱的票啊,多了应该会引起起点编辑重视吧。。。
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g*p
26
这个基本上不太可能是蛋白表达时生成的(如果你真的发现蛋白间有二硫键的话)
E.coli在细胞胞质里有thioredoxin,glutathione等还原系统
除非你的蛋白是membrane protein或者secret 到periplasm才会有DsbG等系统把二硫键
形成
如果是因为aging形成的缘故,加0.1-0.5mM TCEP/1 mM DTT/5-10mM belta
mercaptoethanol
(价格由高到低)就可以了

【在 s******e 的大作中提到】
: 4 度情况下,
: 大肠杆菌表达的蛋白,可能形成了蛋白间二硫键, 以至于在柱层析时表现不好,我想
: 得到均一的蛋白,不想让蛋白变性,求教如果加入DTT的话,可以打开已形成的二硫键
: 吗?

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A*g
27
is it USCIS who approve those EB1?

【在 c*********n 的大作中提到】
: 谁能把这个发给奥本么?看看他怎么解释?
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b*s
28
看到买了20个童男女花了一万两银子,贵了吧
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g*5
29
if you don't add dtt in loading buffer,
you could see dimer.
I AM doing this experiment now...

【在 O******e 的大作中提到】
: SDS-PAGE不会看到二聚体
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a*x
30
跟他没关系

【在 c*********n 的大作中提到】
: 谁能把这个发给奥本么?看看他怎么解释?
avatar
e*r
31
后面这部分有点太拖了,不停的在写侦探小说制造悬疑,已经没有一般情节和高潮的区
别,看上去越来越累,尽管写的还好,但是整体情节几乎没有进展,用妄语的节奏写武
侠,估计也是那种开始人气很好,后面越来越没人捧场的那种.

【在 m******e 的大作中提到】
: 看了版上的推荐,现在一直在跟死人经。觉得作者真是不错,写的很用心,情节构思也
: 都不错,更新的也很准时,比较勤。像这样用心的好作品,写了这么多章了,都写了7
: 0多万字了,还是全免费的,没搞上VIP,觉得替作者有些惋惜。也希望他不放弃,坚
: 持下去,是金子总会发光的。

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O*e
32
You are right. But I'm more comfortable of using native gels to study
oligomers.

【在 g*********5 的大作中提到】
: if you don't add dtt in loading buffer,
: you could see dimer.
: I AM doing this experiment now...

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B*g
33
烙印做法有什么问题?

【在 a***x 的大作中提到】
: 跟他没关系
avatar
d*k
34
2nd

【在 l*******s 的大作中提到】
: 写得真心不错。如果他出实体书我一定买一套支持
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a*e
35
没问题,只要人家能证明自己符合那些要求,你也没辙啊

【在 B*****g 的大作中提到】
: 烙印做法有什么问题?
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b*s
36
看上去快完本了
avatar
s*l
37
Those are junior level people, definite are not qualified for EB1C. This is
a fraud like ICC's apply H1B for no job people.

【在 B*****g 的大作中提到】
: 烙印做法有什么问题?
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l*s
38
还早着呢吧
坑是越挖越大了

【在 b*******s 的大作中提到】
: 看上去快完本了
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B*G
40
欢奴应该是要进中原的

【在 l*******s 的大作中提到】
: 还早着呢吧
: 坑是越挖越大了

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c*s
41
我们中国人啊,就别指望了,绝大部分个个萎缩着,只怕以后EB2C连自己国家名额都
拿不满。
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b*s
42
嗯,大仇家可能是皇帝

【在 B*G 的大作中提到】
: 欢奴应该是要进中原的
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N*m
43
公司内部调动,签L1a签证,然后EB1
没有任何问题呀
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f*e
44
本书尚未开通VIP,不能投月票。
本书尚未签约,不能打赏。

【在 T***c 的大作中提到】
: 大家可以去打赏啊,投各种花钱的票啊,多了应该会引起起点编辑重视吧。。。
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a*e
45
对啊,谁说eb one不能给junior level了。。。。那玩意儿又不是二类,还计较经验。
。。。

【在 N*******m 的大作中提到】
: 公司内部调动,签L1a签证,然后EB1
: 没有任何问题呀

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T*c
46
评价票,200点一张,投吧。。。

【在 f*****e 的大作中提到】
: 本书尚未开通VIP,不能投月票。
: 本书尚未签约,不能打赏。

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S*y
47
嗯,大家都说没问题,继续不出声,然后等到VB出来再骂。
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m*e
48
撑过了开头那点,就觉得这本书好了。
网络武侠能写这么长,没写崩写散,一直还能保持在一个水准之上的还真不多见。
缺月梧桐开头不行,中间也写散了几次。
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p*y
49
都不用人家解释,自己就给找上理由了。这样就什么都不用问了,他们也乐得没有质疑。
坚决支持发信询问
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m*e
50
呵呵,情节进展还是有的,很缓慢21。
基本是以内力被锁/报仇为推进力,在时间轴上龟速移动。

【在 e********r 的大作中提到】
: 后面这部分有点太拖了,不停的在写侦探小说制造悬疑,已经没有一般情节和高潮的区
: 别,看上去越来越累,尽管写的还好,但是整体情节几乎没有进展,用妄语的节奏写武
: 侠,估计也是那种开始人气很好,后面越来越没人捧场的那种.

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s*y
51
If we know more details about this EB1C case, such as company and applicants
' names, and eligibility to apply for EB1c, we'll have a better chance to
inquire into these possible fraudulent cases.
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e*r
52
时间上可以龟速移动,但是哄两个太子哥过家家的那段情节太琐碎了,本来可以更精炼
的,看着实在是无聊,如同在看幼稚园的阿姨在哄小孩子,后面这部分情节推进一下子
又快了起来,可读性恢复了不少.

【在 m*******e 的大作中提到】
: 呵呵,情节进展还是有的,很缓慢21。
: 基本是以内力被锁/报仇为推进力,在时间轴上龟速移动。

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p*e
53
fraud, cheating, kao
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b*s
54
我觉得那段还成啊,宝贵的感情要失去,不过主角太不投入了,太杀手了

【在 e********r 的大作中提到】
: 时间上可以龟速移动,但是哄两个太子哥过家家的那段情节太琐碎了,本来可以更精炼
: 的,看着实在是无聊,如同在看幼稚园的阿姨在哄小孩子,后面这部分情节推进一下子
: 又快了起来,可读性恢复了不少.

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B*g
55
俺就想呀,咱怎么就不能搞这个呢?

【在 S******y 的大作中提到】
: 嗯,大家都说没问题,继续不出声,然后等到VB出来再骂。
avatar
d*k
56
这段情节不错,杀手终于开荤了,还是第一美女
avatar
c*s
57
LOL

【在 S******y 的大作中提到】
: 嗯,大家都说没问题,继续不出声,然后等到VB出来再骂。
avatar
wy
58
老把这种当成好看就没意思了。那还不如看yy小说

【在 d***k 的大作中提到】
: 这段情节不错,杀手终于开荤了,还是第一美女
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a*d
59
是的,老中的EB就是这样,看到别人种种不合理,先体贴的为别人设身处地的想一下。
遇到自己人的不合理,上来就骂,这是怎样一种精神啊。
坚决支持发信询问。

疑。

【在 p********y 的大作中提到】
: 都不用人家解释,自己就给找上理由了。这样就什么都不用问了,他们也乐得没有质疑。
: 坚决支持发信询问

avatar
l*f
60
杀手又受骗了。
avatar
e*r
62
两个小主人都是13岁吧,感情有那么复杂吗,真把小孩子当成老奸巨猾的家伙了,本来
只要几件小事就可以过渡的情节写成了比取悦顶级谋主还难的事哈.

【在 b*******s 的大作中提到】
: 我觉得那段还成啊,宝贵的感情要失去,不过主角太不投入了,太杀手了
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w*a
63
这个可要问个清楚!

and

【在 s*****l 的大作中提到】
: From Q'Blog:
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: Join Date:Aug 2011
: Posts:2Hello all,
: I've been reading this forum everyday for about a couple of months now, and
: finally decided to register. I am a EB2I PWMB with a PD of 04May07. I was
: hoping that my PD will get current this September, but like everyone was
: disappointed. Anyways, kudos to all the gurus for the great number crunching

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b*s
64
马上要练舞蹈书了
avatar
E*5
65
现在让公司派回国待一年,明年派回来是不是就可以申请EB1C,好奇中。。。Title这
东西要作假太容易了。我一同学,在PWC干了3年就申请L1签证。
avatar
J*n
66
觉得这作者还有进步余地,最近很多地方感觉有些虎头蛇尾,比如八少奶奶的秘密,前
边铺垫了不少,最后一笔带过了。。。

【在 l*f 的大作中提到】
: 杀手又受骗了。
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h*e
67
这个L1到底是什么东西?为什么能随便给?
avatar
l*s
68
这显然不是真正的秘密,后面还要变化

【在 J**********n 的大作中提到】
: 觉得这作者还有进步余地,最近很多地方感觉有些虎头蛇尾,比如八少奶奶的秘密,前
: 边铺垫了不少,最后一笔带过了。。。

avatar
a*d
69
得L1A才行,只有L1A可以走EB1,L1B还是走EB2/3的。

【在 E*****5 的大作中提到】
: 现在让公司派回国待一年,明年派回来是不是就可以申请EB1C,好奇中。。。Title这
: 东西要作假太容易了。我一同学,在PWC干了3年就申请L1签证。

avatar
a*n
70
同感,觉得很多细节需要雕琢。
不过框架和故事都很好。

【在 J**********n 的大作中提到】
: 觉得这作者还有进步余地,最近很多地方感觉有些虎头蛇尾,比如八少奶奶的秘密,前
: 边铺垫了不少,最后一笔带过了。。。

avatar
c*s
71
熊孬啊
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h*r
72
我觉得八少奶奶怀孕了,别人都以为是上官伐的,其实是顾慎为的。
我一直以为她就是杀手在似梦非梦中见到的那个女人,不是,但也应该有关系,也跟晓
月堂有关系。不过她是装傻还是真傻,我到现在也没搞清楚。
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a*d
73
很显然,这个link在我贴到这里之后就死掉了,有人向我要screenshot. Here we go.
我把整个讨论都截图了,一个文件太大了,分成两个贴上来。

【在 a*******d 的大作中提到】
: Another one:
: http://www.trackitt.com/usa-discussion-forums/i485-eb/596933803
: "People from Indian IT companies in L1A are getting green cards in 4/5
: months time. They are just project leads or test leads..."

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c*s
75
hai........

【在 a*******d 的大作中提到】
: 第二张截图
avatar
p*b
76
我们公司有个中国人也是这么办的绿卡。他在国内的时候本科毕业,在我们公司中国分
部工作三年,提成了一个小组长吧,翻译过来就是technical lead。然后办了那个L1签
证过来美国总公司,做business manager,不管人的,就是管客户关系。公司移民律师
一看,就说可以办EB1C,然后就办成了。
他还跟我说,可以要求派回国做个first level manager一两年,回来以后再搞个合适
的title就可以办EB1C了,没必要等EB2等的这么惨。
唉,这个EB1C标准也太低了吧。
avatar
b*n
77
阿三就该灭族啊
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