做RNAi 的时候,能不能把三个shRNA的lentivirus同时感染?# Biology - 生物学K*72010-10-27 07:101 楼我的一表妹在广州领事馆学生签证,已经被拒签7次了,请问是不是出国的希望就很渺茫了?还是可以换其他途径来美国?
T*n2010-10-27 07:105 楼这个生化刚看了一点,是不是就是个改版生化危机阿,连人名都不变,不过是加了几个亚洲人在里面。【在 T***c 的大作中提到】: 一堆人过去打生打死的,结果还是靠天上的飞机来做终端制导,爱丽丝他们过去除了领: 盒饭,完全没意义啊,没他们朱诺的人也打不掉f22
r*e2010-10-27 07:106 楼会。【在 o**4 的大作中提到】: 我也不确定那个比较有效果,所以我想同时加进去,会不会效果更好点?: 同一个细胞会不会同时感染三个不同的lentivirus?: 谢谢
T*c2010-10-27 07:108 楼后面还有I'm legend的威尔史密斯哥【在 T****n 的大作中提到】: 这个生化刚看了一点,是不是就是个改版生化危机阿,连人名都不变,不过是加了几个: 亚洲人在里面。
n*k2010-10-27 07:1012 楼u would have to prove individually first before pool them...or you wouldhave to design ways to control for the off target effects...【在 o**4 的大作中提到】: 我也不确定那个比较有效果,所以我想同时加进去,会不会效果更好点?: 同一个细胞会不会同时感染三个不同的lentivirus?: 谢谢
v*a2010-10-27 07:1015 楼弱弱地问一下,一般大家都用什么方法来说明有没有off target effects?【在 n********k 的大作中提到】: u would have to prove individually first before pool them...or you would: have to design ways to control for the off target effects...
T*c2010-10-27 07:1018 楼那我也去看看,果然是信本版不书荒啊,我刚看完末世传说,累得我。。。【在 S***n 的大作中提到】: 我就是看你们说生化末世然后找到我说的那本,也很好看:)
w*a2010-10-27 07:1019 楼换几种不同的siRNA against同一个target,然后看phenotype是否一致?其实任何siRNA或多或少都有off target effect,特别是siRNA浓度大的时候。【在 v***a 的大作中提到】: 弱弱地问一下,一般大家都用什么方法来说明有没有off target effects?
n*k2010-10-27 07:1021 楼Rescue experiment...【在 w***a 的大作中提到】: 换几种不同的siRNA against同一个target,: 然后看phenotype是否一致?: 其实任何siRNA或多或少都有off target effect,特别是siRNA浓度大的时候。
c*r2010-10-27 07:1022 楼不确定就分开三个试试好了,混一起有几个问题:1. 增加了off target的机会。2. 发paper的时候,如果是critical experiment还是需要证明单独的siRNA起效。3. 混一起,如果virus的效率很高也就罢了。如果效率比较差,那么会有很多cell只感染一个,两个的。你最后的phenotype就会比较moderate,以后的实验就比较麻烦。这个跟pool的siRNA transfection一样。如果只是一个比如说pilot experiment,其实倒是无所谓,混着就混着用好了。【在 o**4 的大作中提到】: 我也不确定那个比较有效果,所以我想同时加进去,会不会效果更好点?: 同一个细胞会不会同时感染三个不同的lentivirus?: 谢谢
o*42010-10-27 07:1023 楼其实都是同一个基因的设计的3哥不同的lentivirus啊,如果哪个基因有表型,我再分开分析就可以了吧?【在 c******r 的大作中提到】: 不确定就分开三个试试好了,混一起有几个问题:: 1. 增加了off target的机会。: 2. 发paper的时候,如果是critical experiment还是需要证明单独的siRNA起效。: 3. 混一起,如果virus的效率很高也就罢了。如果效率比较差,那么会有很多cell只感: 染一个,两个的。你最后的phenotype就会比较moderate,以后的实验就比较麻烦。: 这个跟pool的siRNA transfection一样。如果只是一个比如说pilot experiment,其实: 倒是无所谓,混着就混着用好了。
r*e2010-10-27 07:1025 楼我以前也听说过这个,但是事实证明细胞能被反复感染的。【在 s**********r 的大作中提到】: 难道不是细胞被一个病毒感染后会“关闭”自己,其他病毒不容易再感染了吗?
v*a2010-10-27 07:1026 楼为啥混在一起会增加off target?我以前听说的是(我只做过siRNA)混在一起反而降低了off target effect。【在 c******r 的大作中提到】: 不确定就分开三个试试好了,混一起有几个问题:: 1. 增加了off target的机会。: 2. 发paper的时候,如果是critical experiment还是需要证明单独的siRNA起效。: 3. 混一起,如果virus的效率很高也就罢了。如果效率比较差,那么会有很多cell只感: 染一个,两个的。你最后的phenotype就会比较moderate,以后的实验就比较麻烦。: 这个跟pool的siRNA transfection一样。如果只是一个比如说pilot experiment,其实: 倒是无所谓,混着就混着用好了。