TLR4-EGFP 不亮# Biology - 生物学
y*a
1 楼
刚在网上买了电话卡，但打电话进去每次输入了密码后就不停提示说让确认电话卡没用
光。。。根本不能跟客服讲话。
求助，不知道为什么啊。。。
谢先了。。。
光。。。根本不能跟客服讲话。
求助，不知道为什么啊。。。
谢先了。。。
p*i
2 楼
我把TLR4 cDNA (2.6kb)从macrophage里PCR出来，加上XhoI和BamHI，接到
pEGFP-N1里，测序结果也是正确的，就是TLR4后面接了个in frame fusion的EGFP
但问题是transfect到293T里不亮，而空载体pEGFP-N1很亮……
我现在怀疑是kozak不够强，准备在ATG前面加一个
GCCACCATGGXX，不知道会不会有帮助……
哪位做过类似的实验，请不吝赐教啊，
在下先谢过了……
pEGFP-N1里，测序结果也是正确的，就是TLR4后面接了个in frame fusion的EGFP
但问题是transfect到293T里不亮，而空载体pEGFP-N1很亮……
我现在怀疑是kozak不够强，准备在ATG前面加一个
GCCACCATGGXX，不知道会不会有帮助……
哪位做过类似的实验，请不吝赐教啊，
在下先谢过了……
y*a
3 楼
【在 y***a 的大作中提到】
: 刚在网上买了电话卡，但打电话进去每次输入了密码后就不停提示说让确认电话卡没用
: 光。。。根本不能跟客服讲话。
: 求助，不知道为什么啊。。。
: 谢先了。。。
i*a
4 楼
stop codon 去掉了吗
c*c
5 楼
是电话卡的问题，用skype就好了
m*c
6 楼
i did a 3kb cdna-GFP fusion protein, signal is very weak, it may hide the
green color
green color
C*e
7 楼
加linker了么？
会不会后面EGFP没折叠好
做了别的实验验证的确有EGFP fusion protein表达么？
会不会后面EGFP没折叠好
做了别的实验验证的确有EGFP fusion protein表达么？
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