关于做agar plate的问题 - 未名空间MITBBS历史存档

x*o2010-12-28 08:12

1 楼

新手,有点问题请教大家.
做agar plate,没有那种灭菌工作台,就是在自己的bench上,点一个煤气灯. LB agar倒
上去后,盖上盖子,盖子一会就有很多蒸汽形成的水.我看有人是在灭菌工作台里面,开盖
子晾一会.在自己的bench上就不可能了.这个大家是怎么解决的?
还有就是含有抗生素的plate,加抗生素时候溶液不能太烫,不过也不能太凉,是不是还有
点烫手的时候加?大家是怎么掌握的?
问了很多问题. :-)

h*y2010-12-28 08:12

2 楼

flame下不用盖子
等温度在60度左右就可以加antibiotics；不然温度再低一点就容易凝固了。

【在 x*****o 的大作中提到】

: 新手,有点问题请教大家.
: 做agar plate,没有那种灭菌工作台,就是在自己的bench上,点一个煤气灯. LB agar倒
: 上去后,盖上盖子,盖子一会就有很多蒸汽形成的水.我看有人是在灭菌工作台里面,开盖
: 子晾一会.在自己的bench上就不可能了.这个大家是怎么解决的?
: 还有就是含有抗生素的plate,加抗生素时候溶液不能太烫,不过也不能太凉,是不是还有
: 点烫手的时候加?大家是怎么掌握的?
: 问了很多问题. :-)

s*y2010-12-28 08:12

3 楼

等凝固之后倒过来在bench上放一个晚上（一定要倒扣，否则水蒸气全凝
在盖子上了）
55度左右的时候加，就是有点烫手但是还可以拿的时候。要是不放心的话，
弄一缸子55度的热水，把热的琼脂放里面10分钟。

【在 x*****o 的大作中提到】

: 新手,有点问题请教大家.
: 做agar plate,没有那种灭菌工作台,就是在自己的bench上,点一个煤气灯. LB agar倒
: 上去后,盖上盖子,盖子一会就有很多蒸汽形成的水.我看有人是在灭菌工作台里面,开盖
: 子晾一会.在自己的bench上就不可能了.这个大家是怎么解决的?
: 还有就是含有抗生素的plate,加抗生素时候溶液不能太烫,不过也不能太凉,是不是还有
: 点烫手的时候加?大家是怎么掌握的?
: 问了很多问题. :-)

j*p2010-12-28 08:12

4 楼

可以自己做一个盒子，在盒子里面开盖放plate. 最简单的就是用一个装1mL pipet tip
的盒子或者盒盖倒扣在plate上。

【在 x*****o 的大作中提到】

: 新手,有点问题请教大家.
: 做agar plate,没有那种灭菌工作台,就是在自己的bench上,点一个煤气灯. LB agar倒
: 上去后,盖上盖子,盖子一会就有很多蒸汽形成的水.我看有人是在灭菌工作台里面,开盖
: 子晾一会.在自己的bench上就不可能了.这个大家是怎么解决的?
: 还有就是含有抗生素的plate,加抗生素时候溶液不能太烫,不过也不能太凉,是不是还有
: 点烫手的时候加?大家是怎么掌握的?
: 问了很多问题. :-)

h*r2010-12-28 08:12

5 楼

可以凉点儿再倒板子，这样水汽少。
另外就是艳阳MM说的，倒扣着。你也可以丢在培养箱里放一晚上。

w*t2010-12-28 08:12

6 楼

我都是凝固后倒置放在bench上两三天直到冷凝水干为止，只要不是见光死的抗生素都
没问题。

s*s2010-12-28 08:12

7 楼

有点水气没关系，接种的时候还可以快速降温接种环/涂布棒，
只有更加方便。实在不爽的话，全部倒扣放一两天就行了。

【在 x*****o 的大作中提到】

: 新手,有点问题请教大家.
: 做agar plate,没有那种灭菌工作台,就是在自己的bench上,点一个煤气灯. LB agar倒
: 上去后,盖上盖子,盖子一会就有很多蒸汽形成的水.我看有人是在灭菌工作台里面,开盖
: 子晾一会.在自己的bench上就不可能了.这个大家是怎么解决的?
: 还有就是含有抗生素的plate,加抗生素时候溶液不能太烫,不过也不能太凉,是不是还有
: 点烫手的时候加?大家是怎么掌握的?
: 问了很多问题. :-)

n*t2010-12-28 08:12

8 楼

我都是在自己的bench上半开盖子晾一会儿，极少污染

【在 x*****o 的大作中提到】

: 新手,有点问题请教大家.
: 做agar plate,没有那种灭菌工作台,就是在自己的bench上,点一个煤气灯. LB agar倒
: 上去后,盖上盖子,盖子一会就有很多蒸汽形成的水.我看有人是在灭菌工作台里面,开盖
: 子晾一会.在自己的bench上就不可能了.这个大家是怎么解决的?
: 还有就是含有抗生素的plate,加抗生素时候溶液不能太烫,不过也不能太凉,是不是还有
: 点烫手的时候加?大家是怎么掌握的?
: 问了很多问题. :-)

s*y2010-12-28 08:12

9 楼

我们实验室空气极糟糕（跟国内实验室有得一拼），要是开个小盖，一准污染

【在 n******t 的大作中提到】

: 我都是在自己的bench上半开盖子晾一会儿，极少污染

T*t2010-12-28 08:12

10 楼

我一般是手握瓶底温度能够耐受的时候就加抗生素，这个时候的温度比55度肯定要高，
估计得有65度了，但是一直也没有问题。但是我加抗生素都是加倍的，一般AMP的用量
是50mg/ml，我都是加100mg/ml。而且没有灭菌工作台，抗生素加倍也比较放心。
盖子上有水汽凝结没什么大问题。我一般用之前把板子放在培养箱里预热一两个小时，
这样盖子上的水汽会少一点。还有就是涂板子的时候，把盖子打开就顺手甩一下。。。
嗯，总之就是很粗放就是了。

s*n2010-12-28 08:12

11 楼

Re这个，我也是如此，一般放1-2天就都没有水汽了，但我们实验室的人都是一般用煤
气灯烤一烤，我一般得很急用才这么干。

【在 w**t 的大作中提到】

: 我都是凝固后倒置放在bench上两三天直到冷凝水干为止，只要不是见光死的抗生素都
: 没问题。

x*o2010-12-28 08:12

12 楼

谢谢大家!

【在 x*****o 的大作中提到】

: 新手,有点问题请教大家.
: 做agar plate,没有那种灭菌工作台,就是在自己的bench上,点一个煤气灯. LB agar倒
: 上去后,盖上盖子,盖子一会就有很多蒸汽形成的水.我看有人是在灭菌工作台里面,开盖
: 子晾一会.在自己的bench上就不可能了.这个大家是怎么解决的?
: 还有就是含有抗生素的plate,加抗生素时候溶液不能太烫,不过也不能太凉,是不是还有
: 点烫手的时候加?大家是怎么掌握的?
: 问了很多问题. :-)