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问一个问题:熟悉老鼠cyclin D1 的同学
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问一个问题:熟悉老鼠cyclin D1 的同学# Biology - 生物学
a*3
1
有比较多的opening,求职者也都出来积极行动?3月4月5月或者。。?
谢谢!
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C*t
2
失业很久了没找到工作,父母不放心想来看一下,我银行里没有存款,请教怎么组织材
料才能通过?可否提父母负责开销?
谢谢。
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s*y
3
我们最近在侧cyclin D1 的时候,抗体测出了一个35kD的弱带和一个 50kD 的
强带,而且这两条带在不同的处理里面变化还是不一致的。
想请问一下,那个50kD的是否是已知的磷酸化的cylin D1的形式?
谢谢!
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d*g
4
up
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g*c
5
不懂,帮顶
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O*e
6
老鼠的没做过,但你这个50KD也太大了点吧,磷酸化的也应该是离35不远。
你用的哪家的抗体?

【在 s******y 的大作中提到】
: 我们最近在侧cyclin D1 的时候,抗体测出了一个35kD的弱带和一个 50kD 的
: 强带,而且这两条带在不同的处理里面变化还是不一致的。
: 想请问一下,那个50kD的是否是已知的磷酸化的cylin D1的形式?
: 谢谢!

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m*3
7
我也想知道呢!
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t*y
8
父母自费过来 出具国内的经济证明
绿卡这种的要证明更紧密的纽带才行
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j*d
9
好像不对哦
http://www.cellsignal.com/products/2926.html
CycD1作IHC好使的

【在 s******y 的大作中提到】
: 我们最近在侧cyclin D1 的时候,抗体测出了一个35kD的弱带和一个 50kD 的
: 强带,而且这两条带在不同的处理里面变化还是不一致的。
: 想请问一下,那个50kD的是否是已知的磷酸化的cylin D1的形式?
: 谢谢!

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T*J
10
听说是3月4月5月 和下半年的 9-11月份吧.
现在的经济形势下是不是还有这个规律就不知道了, 呵呵.
俺也在等hire高峰呢, 呼呼

【在 a******3 的大作中提到】
: 有比较多的opening,求职者也都出来积极行动?3月4月5月或者。。?
: 谢谢!

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I*d
11
what is your current status?

【在 C******t 的大作中提到】
: 失业很久了没找到工作,父母不放心想来看一下,我银行里没有存款,请教怎么组织材
: 料才能通过?可否提父母负责开销?
: 谢谢。

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s*y
12
我们也觉得很奇怪。
但是那个50kD的带很强,比35kD的强得多。
抗体是 Santa Cruz (sc717) anti-cyclin D1
不知道cyclinD1 immunoprecipitation 是否好做?
如果好做的话我们拿去做一下Mass Spec

【在 j*****d 的大作中提到】
: 好像不对哦
: http://www.cellsignal.com/products/2926.html
: CycD1作IHC好使的

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b*M
13
邀请人的资金证明不是必须的吧

【在 C******t 的大作中提到】
: 失业很久了没找到工作,父母不放心想来看一下,我银行里没有存款,请教怎么组织材
: 料才能通过?可否提父母负责开销?
: 谢谢。

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s*u
14
有没有其它Posttranslational modification的可能,比方SUMO?

【在 s******y 的大作中提到】
: 我们最近在侧cyclin D1 的时候,抗体测出了一个35kD的弱带和一个 50kD 的
: 强带,而且这两条带在不同的处理里面变化还是不一致的。
: 想请问一下,那个50kD的是否是已知的磷酸化的cylin D1的形式?
: 谢谢!

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s*y
15
不知道啊!所以上来问大家啊。
我是第一次涉及这个蛋白。

【在 s******u 的大作中提到】
: 有没有其它Posttranslational modification的可能,比方SUMO?
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i*l
16
应该是抗体非特异性条带。该公司每个蛋白都有好几种抗体,特异性也不同,换DCS6抗
体试试。

【在 s******y 的大作中提到】
: 我们最近在侧cyclin D1 的时候,抗体测出了一个35kD的弱带和一个 50kD 的
: 强带,而且这两条带在不同的处理里面变化还是不一致的。
: 想请问一下,那个50kD的是否是已知的磷酸化的cylin D1的形式?
: 谢谢!

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s*y
17
嗯,明天我向他们抗议一下,让他们给我换抗体。

【在 i*****l 的大作中提到】
: 应该是抗体非特异性条带。该公司每个蛋白都有好几种抗体,特异性也不同,换DCS6抗
: 体试试。

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h*8
18
SUMO倒是有可能
不过貌似非特异的条带吧?

【在 s******y 的大作中提到】
: 我们最近在侧cyclin D1 的时候,抗体测出了一个35kD的弱带和一个 50kD 的
: 强带,而且这两条带在不同的处理里面变化还是不一致的。
: 想请问一下,那个50kD的是否是已知的磷酸化的cylin D1的形式?
: 谢谢!

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d*7
19
我现在也有类似的情况,可能是抗体的问题,比如我现在用的一个Cell signaling的
FOXO3a抗体,
在大概90kD有条带,在70kD也有条带,70kD那条带的表达量随细胞周期变化,90kD那条
带却很稳定,
而Cell signaling网页上的图却只有恨特异的一条带。呃。。。

【在 s******y 的大作中提到】
: 我们最近在侧cyclin D1 的时候,抗体测出了一个35kD的弱带和一个 50kD 的
: 强带,而且这两条带在不同的处理里面变化还是不一致的。
: 想请问一下,那个50kD的是否是已知的磷酸化的cylin D1的形式?
: 谢谢!

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s*y
20
嗯。他们网页上也是只有35的一条强带,根本就看不到50的带。
而且最让我晕倒的是50的带的变化和我们实验设想的非常吻合,
而35的带根本就和我们的假说南辕北辙。
所以弄不好我们得把50的带IP 下来送去查查看到底是什么东西

【在 d****7 的大作中提到】
: 我现在也有类似的情况,可能是抗体的问题,比如我现在用的一个Cell signaling的
: FOXO3a抗体,
: 在大概90kD有条带,在70kD也有条带,70kD那条带的表达量随细胞周期变化,90kD那条
: 带却很稳定,
: 而Cell signaling网页上的图却只有恨特异的一条带。呃。。。

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k*o
21
个人始终对Santa Cruz的质量不放心。50kDa的蛋白有很多,这个抗体有可能特异性不
好。
如果是post-translational modification的话,似乎只有SUMO能够吻合上两条带分子
量的差异。
公司的图片根本不可信,特别是Santa和Abcam的,为了卖东西什么都做得出来。
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i*n
22
50KD 的带应该是非特异的。 DSC-6 这个Antibody 还可以,但是因为是mouse 来源的,用它做老
鼠的组织,还是会有background. 试了非常多的抗体之后, 我们才发现 SP4 clone(rabbit
monoclonal) 是最好用的。病理医生都用这个做MCL 的检测。 Cyclin D1 磷酸化的形
式离35-36 并不远,非常近。
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