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也问gateway vector: 有没有可以同时放shRNA和cDNA的

也问gateway vector: 有没有可以同时放shRNA和cDNA的# Biology - 生物学

p*12011-06-03 07:06

1 楼

一手下国女大妈， 40多，性格及其暴烈，有点能力，但非常自以为是，工作中一遇到
不顺心的事，就暴跳如雷，而且非常爱搬弄是非，搞的组里鸡犬不宁，四处讲组里的坏
话，真不知道这种性格是怎么养成的。一些原因目前没办法把她fire 掉。公司里政治
斗争很厉害，这样下去很不利。
现在有一办法，把她换到其他组，这样至少耳根能清静点，组的凝聚力也强点。潜在的
问题是组间的竞争很激烈，去了也带去了我组的技术，当然也不是大问题。。。
大家觉得我应该留着改造她，还是把她转走？
请指点，谢谢

j*W2011-06-03 07:06

2 楼

还想要用lentiviral表达。是不是要求太多了？多谢！

f*82011-06-03 07:06

3 楼

换，这种人搞得整个组气氛就不对，我以前国内组一男一女都是这种人，还都啥都不会
，就爱到处说人坏话。好在老板自己清楚，所有人都升级了，他们2个最早进组的都没
有升级，因为本来他们就是混。

【在 p*********1 的大作中提到】

: 一手下国女大妈， 40多，性格及其暴烈，有点能力，但非常自以为是，工作中一遇到
: 不顺心的事，就暴跳如雷，而且非常爱搬弄是非，搞的组里鸡犬不宁，四处讲组里的坏
: 话，真不知道这种性格是怎么养成的。一些原因目前没办法把她fire 掉。公司里政治
: 斗争很厉害，这样下去很不利。
: 现在有一办法，把她换到其他组，这样至少耳根能清静点，组的凝聚力也强点。潜在的
: 问题是组间的竞争很激烈，去了也带去了我组的技术，当然也不是大问题。。。
: 大家觉得我应该留着改造她，还是把她转走？
: 请指点，谢谢

z*t2011-06-03 07:06

4 楼

我只知道addgene有个lentiviral tet-on/off的可以这么干，但是没有gateway,不过你
不急的话可以自己把attL从donor vector上PCR下来然后装在这个leniviral载体上

【在 j**W 的大作中提到】

: 还想要用lentiviral表达。是不是要求太多了？多谢！

l*72011-06-03 07:06

5 楼

你觉得能改造过来吗？

j*W2011-06-03 07:06

6 楼

这个addgene的lentiviral tet-on/off可以同时放shRNA和cDNA?有link吗?attL同时要
放在两个地方，怎么弄呢？

【在 z*t 的大作中提到】

: 我只知道addgene有个lentiviral tet-on/off的可以这么干，但是没有gateway,不过你
: 不急的话可以自己把attL从donor vector上PCR下来然后装在这个leniviral载体上

n*y2011-06-03 07:06

7 楼

挟才以为善者，善无不至矣；挟才以为恶者，恶亦无不至矣。

z*t2011-06-03 07:06

8 楼

addgene连接在这儿
http://www.addgene.org/pgvec1?f=c&identifier=PUBMED.16432520&cm
给你两篇文献
http://www.nature.com/nmeth/journal/v3/n2/abs/nmeth846.html
同时表达cDNA与shRNA
上面addgene的link是他们实验室的所有cDNA,shRNA同时表达的vector list
http://www.pnas.org/content/108/9/3665.long
gateway intivrial vector

【在 j**W 的大作中提到】

: 这个addgene的lentiviral tet-on/off可以同时放shRNA和cDNA?有link吗?attL同时要
: 放在两个地方，怎么弄呢？

b*82011-06-03 07:06

9 楼

你这是要祸水东引啊，好计。想想怎么才能做得不显山露水

j*W2011-06-03 07:06

10 楼

太好了。多谢！

【在 z*t 的大作中提到】

: addgene连接在这儿
: http://www.addgene.org/pgvec1?f=c&identifier=PUBMED.16432520&cm
: 给你两篇文献
: http://www.nature.com/nmeth/journal/v3/n2/abs/nmeth846.html
: 同时表达cDNA与shRNA
: 上面addgene的link是他们实验室的所有cDNA,shRNA同时表达的vector list
: http://www.pnas.org/content/108/9/3665.long
: gateway intivrial vector

t*22011-06-03 07:06

11 楼

我也遇到过这样的人，还惹了一身的骚。第一，要控制你自己的，不要对她讲脏话，不
要有任何的对她负面的评价，最好闭嘴闭嘴。对她尽量的保持微笑。第二，安排人手
，去学她的技能。第三，在你跟你主管巡视的时候，询问每一位同事对工作环境是否
满意，有什么地方可以改进？想办法让那女的在那天发飙。
如果，那女的不是像你说的那么泼妇，你要改变自己。不管那女的是鸡蛋还是石头，
聪明人是不会用头来试的。
good luck

x*g2011-06-03 07:06

12 楼

顶你，好帖！

【在 t*******2 的大作中提到】

: 我也遇到过这样的人，还惹了一身的骚。第一，要控制你自己的，不要对她讲脏话，不
: 要有任何的对她负面的评价，最好闭嘴闭嘴。对她尽量的保持微笑。第二，安排人手
: ，去学她的技能。第三，在你跟你主管巡视的时候，询问每一位同事对工作环境是否
: 满意，有什么地方可以改进？想办法让那女的在那天发飙。
: 如果，那女的不是像你说的那么泼妇，你要改变自己。不管那女的是鸡蛋还是石头，
: 聪明人是不会用头来试的。
: good luck

d*12011-06-03 07:06

13 楼

学习下，大妈改造不了，我这里也有一枚奇芭，希望她快点找到下家走人，不是华人

我也遇到过这样的人，还惹了一身的骚。第一，要控制你自己的，不要对她讲脏话，不
要有任何的对她负面的评价，最好闭嘴闭嘴。对她尽量的保持微笑。第二，安排人手
，去学她的技能。第三，........

【在 t*******2 的大作中提到】