有什么办法可以在小鼠体内过表达一个基因?# Biology - 生物学r*y2011-06-06 07:061 楼能有效带动电影院气氛,不管是鼓掌,爆笑或者尖叫的。这次太平洋就是,中间打斗完几个小年轻鼓掌吹口哨但是我听说最传奇的是当年朋友说他们那个小县城,霍元甲电影结束后有人站起来高呼强身健体保卫中华,具体记不清,就是里面的台词
l*e2011-06-06 07:062 楼已经试过了hydrodynamic injection 和用liposome介导的表达系统,但是感觉效率都很低。主要想让基因过表达在小鼠肝脏部位。有什么更好的方法么?
H*92011-06-06 07:063 楼个人喜好不同,本人爱安静【在 r******y 的大作中提到】: 能有效带动电影院气氛,不管是鼓掌,爆笑或者尖叫的。这次太平洋就是,中间打斗完: 几个小年轻鼓掌吹口哨: 但是我听说最传奇的是当年朋友说他们那个小县城,霍元甲电影结束后有人站起来高呼: 强身健体保卫中华,具体记不清,就是里面的台词
l*e2011-06-06 07:065 楼难道就是直接通过尾静脉注射就可以直接到达肝脏么?【在 s*********t 的大作中提到】: 可不可以打病毒进去啊?: lenti-包装你的需要过表达的基因,打进老鼠的肝脏部位。
D*y2011-06-06 07:067 楼adenovirus【在 l*****e 的大作中提到】: 已经试过了hydrodynamic injection 和用liposome介导的表达系统,但是感觉效率都: 很低。主: 要想让基因过表达在小鼠肝脏部位。有什么更好的方法么?
l*u2011-06-06 07:068 楼Alfp-cre 和 loxP-stop-loxP-Gene 交.【在 l*****e 的大作中提到】: 已经试过了hydrodynamic injection 和用liposome介导的表达系统,但是感觉效率都: 很低。主: 要想让基因过表达在小鼠肝脏部位。有什么更好的方法么?
w*n2011-06-06 07:069 楼adenoviral vector,效率很高。【在 l*****e 的大作中提到】: 已经试过了hydrodynamic injection 和用liposome介导的表达系统,但是感觉效率都: 很低。主: 要想让基因过表达在小鼠肝脏部位。有什么更好的方法么?
j*x2011-06-06 07:0610 楼Hydrodynamic Tail Vein的效率应该是非常好的,如果在你这里效率很低,那么很可能要么是手法问题,要么是构建问题,可以先用luciferase reporter construct做对照检查一下手法。一过性表达HTV足够了,想持久表达那就得上病毒载体了,lenti或者AAV都是非常好的选择【在 l*****e 的大作中提到】: 已经试过了hydrodynamic injection 和用liposome介导的表达系统,但是感觉效率都: 很低。主: 要想让基因过表达在小鼠肝脏部位。有什么更好的方法么?
l*e2011-06-06 07:0611 楼我注射的时候应该没什么问题,而且这个载体是hAAT promoter,是一个在肝脏特异表达的。不知道为什么,我每次注射完,做GFP sorting的时候,效率很低很低。有什么好办法?【在 j****x 的大作中提到】: Hydrodynamic Tail Vein的效率应该是非常好的,如果在你这里效率很低,那么很可能: 要么是手法问题,要么是构建问题,可以先用luciferase reporter construct做对照: 检查一下手法。: 一过性表达HTV足够了,想持久表达那就得上病毒载体了,lenti或者AAV都是非常好的: 选择
y*62011-06-06 07:0612 楼use CMV promoter. Large volume (in 1.8-2 ml saline). Inject as fast aspossible (finish in 2-3 seconds).
l*e2011-06-06 07:0613 楼就是这样做的,除了promoter 是 α1-antitrypsin promoter (liver specific)的。【在 y****6 的大作中提到】: use CMV promoter. Large volume (in 1.8-2 ml saline). Inject as fast as: possible (finish in 2-3 seconds).