直接把你的AA序列发给公司,像genscript.然后就可以拿到quote,保含cia,gc content
, mRNA二级结构,这一步是free的。
再决定要合成不。
avoid after initiating met: vla, lys, leu, tyr, arg, phe ,trp
best codons in e. coli: ala (gcg), gly (ggc, ggu)
也可以看看老paper:
Expression of Mammalian Cytochromes P450 in Yeast
Expression of Eukaryotic Cytochromes P450 in E. coli
虽然讲的是p450,有些策略还是可以借鉴的。
可以看下新的paper:
Design Parameters to Control Synthetic Gene Expression in Escherichia coli
Kudla, G. et al. Coding-sequence determinants of gene expression in
Escherichia coli. Science 324, 255–258 (2009)
反正paper是很多很多的,表达不出来的基因还是表达不出来。