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有什么方法可以在s1 level的实验室里包装lentivirus并infect细胞呢?
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有什么方法可以在s1 level的实验室里包装lentivirus并infect细胞呢?# Biology - 生物学
T*t
1
董明珠,1954年出生于江苏南京一个普通人家。毕业于安徽省芜湖干部教育学院统计学
专业,1975年在南京一家化工研究所做行政管理工作。
董明珠的丈夫在儿子2岁时病逝,这一事件成为她人生的转折点。1990年,董明珠孤身
一人来到了珠海并且加入格力;当时格力被称作“海利”,是一家投产不久、年产能约2
万台的国营空调厂,没有核心技术,只能做空调组装。董明珠在格力工作期间基本没有
休过年假。
1992年,董明珠在安徽的销售额突破1600万元,占整个公司的1/8。随后,被调往几乎
没有一丝市场裂缝的南京,并签下了一张200万元的空调单子,一年内,个人销售额上
蹿至3650万元。
1994 年底,在格力电器最困难的时候,董明珠接过了经营部长一职,经历了很多改革
。一年之后,销售收入增长了7 倍,达到28 亿。
1994年,格力内部却出现了一次严重危机,部分骨干业务员突然“集体辞职”,董明珠
经受住了诱惑,坚持留在格力,被全票推选为公司经营部部长。1996年,空调业凉夏血
战,已升为销售经理的董明珠宁可让出市场也不降价,她带领23名营销业务员奋力迎战
国内一些厂家成百上千人的营销队伍。8月31日,她宣布拿出1亿元利润的2%按销售额比
例补贴给每个经销商,促使该年格力销售增长17% ,首次超过春兰。
从那之后,格力连续10年空调产销量、销售收入、市场占有率均居全国首位。2001年,
董明珠出任格力电器的总经理。这时候董明珠除了工资还应该有提成吧。
到2012年,格力已经实现1000亿的销售额。连续8年空调销量排名世界第一,也就是这
一年,董明珠除了担任格力电器董事长及总裁之外,还正式出任格力电器的母公司——
格力集团的董事长。格力正式开启了权力高度集中的“董明珠时代”。2007年,董明珠
年薪首次突破100万元达到133万元,2009年涨至210万元,两年后翻倍达到475万元。
格力1996年上市以来,除2006年每年都有分红,包括18次现金分红,只有1997年未派发
现金。上市以来,格力累计分红309.64亿元,累计实现净利润760.52亿元,分红率40.
71%。
董明珠是业界公认的销售女王,而且,有股不服输的精神,35岁的董明珠一个人在外面
闯荡的时候,安徽市场有个经销商钱款40多万一直不给,董明珠在他办公室里堵了40多
天,这股不服输的精神,不是一般人能够做的到的,把欠货从经销商仓库拉出来后,董
明珠从车窗探出头,她的眼睛里流下了泪水。她冲着对方大喊:“从今往后,再不和你
做生意了!”到珠海后,扣掉格力40万货品后,剩下的货品又让经销商到珠海来拉走。
董明珠说:“把多的货还给他,是我不想占他什么便宜,同时让他来珠海拉走,是对他
不诚信的惩罚。”这漂亮的一仗,也让格力的管理层注意到了董明珠,董明珠称自己的
做法当时令业界不少人刮目相看。
董明珠的做销售成功是靠韧劲,但是升任格力董事长后,管理格力则靠的是责任心,她
说我只对消费者负责,这句话我还是相信的,某天“董小姐”到质检机构去参观,那里
的工作人员跟她说,“董总,您放心,您现在当了格力的董事长,我也会积极支持你。
如果格力产品有什么小问题,我帮你搞定。”董明珠当场就霸气回应这位工作人员:“
你错了!我今天来找你就是跟你说,凡是格力的产品到你这来,你往死里整!”工作人
员当即感慨道:“董总,没想到搞了30年的检测,你是第一个来跟我讲这话的。”
佩服吧
没有无缘无故的成功,董明珠的成功代表了我们这一代企业家的精神,不服输,敢说真
话,小米和美的结合,因为两家都有专利污点,所以她敢说这是两家小偷合作。这种人
有极强的性格魅力和背书,她要造车,股东不同意,王健林问都不问,就投了5亿。这
才是靠谱的企业家,我们希望董明珠能够影响更多的人,影响更多的行业。
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j*q
3
问题有点狗血啊,但是还真存在。
现在的实验条件没有s2 level的,但是这个事情不得不做。
哪位大大有这样的信息啊。听说有个公司可以做的,但是一直没找到。
跪求信息。
或者在target细胞里同时表达receptor,有这样的做法吗?
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M*0
4
其实这个世界离了谁都会继续转。销售的有什么好吹的嘛?
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z*6
6
lenti一定要在p2里面包吗?这些都是假病毒,根本没必要在p2里做啊。。。
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z*6
8
I'm sorry if I didn't get your question...
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j*q
10
难道这个s1到s4的实验室标准不是国际标准啊?
偶在德国的说。。。
就是要在最低安全级别的实验室包装lentivirus和infect target细胞。这个只能在s2
level做。但是现在要到s1里做,有什么办法可以compromise的吗?
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e*G
11
你也有分?

【在 r*******g 的大作中提到】
: 720度全空翻雪地裸球,删掉吧。
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j*x
12
是你自己要做还是老板提议的?
有必要提醒你,德国对实验室生物安全的管理严格到变态的地步,违规操作会给你个人
和实验室带来极为严重的后果
操作慢病毒载体(活病毒,无论是否三代四代安全性载体),必须在生物安全2级(
BSL2)以上实验室及相关配套设施条件下进行,没有任何余地compromise。

s2

【在 j*****q 的大作中提到】
: 难道这个s1到s4的实验室标准不是国际标准啊?
: 偶在德国的说。。。
: 就是要在最低安全级别的实验室包装lentivirus和infect target细胞。这个只能在s2
: level做。但是现在要到s1里做,有什么办法可以compromise的吗?

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j*q
14
多谢楼上提醒了。偶们是在公司做没有S2但又不得不用lentivirus.
不过德国的研究所没LS说的那么严格的但是公司就是另一回事了。
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m*l
15
这事情有结果了没?
没准是个ws男假装的吧

【在 n******t 的大作中提到】
: 真可怜啊,居然没有人去找那个极品女算账?
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j*x
16
你在搞笑。。。
好吧,如果你(或者你公司)不得不用,那就好自为之吧。身为外国人,建议你注意保
护自己的权益,别一旦出了事被牺牲掉了,这是有先例的。

【在 j*****q 的大作中提到】
: 多谢楼上提醒了。偶们是在公司做没有S2但又不得不用lentivirus.
: 不过德国的研究所没LS说的那么严格的但是公司就是另一回事了。

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j*e
17
我坦白:这个无聊的人就是我,而且现在我只公布了第一批照片,以后会陆续公布其它
的,sex版的同志赶快发我包子啊,我保证不公布你们的照片
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h*n
18
美国用的是 BSL 1-4的标准.
你找同一个学校的实验室合作就行了.

s2

【在 j*****q 的大作中提到】
: 难道这个s1到s4的实验室标准不是国际标准啊?
: 偶在德国的说。。。
: 就是要在最低安全级别的实验室包装lentivirus和infect target细胞。这个只能在s2
: level做。但是现在要到s1里做,有什么办法可以compromise的吗?

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n*t
19
太假了。。。

【在 j****e 的大作中提到】
: 我坦白:这个无聊的人就是我,而且现在我只公布了第一批照片,以后会陆续公布其它
: 的,sex版的同志赶快发我包子啊,我保证不公布你们的照片

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r*e
20
普通的cell culture就是BSL2,他们说的s2不知道是不是一样。
我们是lenti lab,就是普通cell culture的hood。

【在 j****x 的大作中提到】
: 是你自己要做还是老板提议的?
: 有必要提醒你,德国对实验室生物安全的管理严格到变态的地步,违规操作会给你个人
: 和实验室带来极为严重的后果
: 操作慢病毒载体(活病毒,无论是否三代四代安全性载体),必须在生物安全2级(
: BSL2)以上实验室及相关配套设施条件下进行,没有任何余地compromise。
:
: s2

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j*e
21
你要是舍不得包子就要倒霉了

【在 n******t 的大作中提到】
: 太假了。。。
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j*q
22
搞笑不搞笑就不劳操心了。哪都有black box的。
能在S2下做偶就不来同了。偶们最后要用robot,还是进production的。只能S1,不然
fda也过不了。
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e*G
23
这你得去sex版发才行

【在 j****e 的大作中提到】
: 我坦白:这个无聊的人就是我,而且现在我只公布了第一批照片,以后会陆续公布其它
: 的,sex版的同志赶快发我包子啊,我保证不公布你们的照片

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j*x
24
普通Cell culture显然不是BSL2,而是和普通大肠杆菌培养一样的BSL1。(从前的分类
称为P1-4,已经统一换成目前的国际标准即BSL系统)。养普通细胞在普通实验室的超
净工作台下即可,而BSL2则要求生物安全柜。当然很多实验室使用类似BSL2下的生物安
全柜从事细胞培养,但这并不意味着该实验室就符合BSL2的要求可以从事BSL2相关病原
的操作。
BSL所要求的不仅仅是hood,而是整个实验室的配套系统及规章,包含硬件和软件。比
如密闭负压系统,合理安排的独立的空间,符合要求的消毒设备,人员培训和管理,等
等。
当然,BSL2对于操作pathogen而言只是入门级,lentivirus的致病力也微乎其微。即使
你在普通实验室内进行(有很多国内的实验室和公司都是这么干的)造成的潜在危害也
很小。我提醒LZ的意思主要是基于德国这边相关规定和审查的BT性,因为小聪明而吃大
亏的先例是有的。这也是基于对自己负责任的态度。
说到BT的规定和审查,举一个例子。曾经来我们这里审查的时候,直接翻出新发表的一
篇paper,指着其中一个实验,要求看实验原始记录。找到原始实验记录本后查出具体
的实验日期,然后对照实验室独立的生物安全记录,某年某月某日,进行的相关实验,
是否相符合。转化,转染,转导,所有这些操作都必须独立记录备案,从创建日期到销
毁日期,一项都不能少。更变态的是,这种几乎毫无意义的记录,需要文本备案至少12
年。。。这还只是关于记录方面的,其他方面的审查就更BT了,有任何不合标准的地方
,立即停工整改。毫无疑问,LZ说的这种情况一旦查出,整个实验室必然关门。这也是
有先例的。。。
LZ所在的公司不可能不知道这些相关的法规。在公司行为层面上明知而故犯的话,真要
让人替Lz捏把汗了。

【在 r***e 的大作中提到】
: 普通的cell culture就是BSL2,他们说的s2不知道是不是一样。
: 我们是lenti lab,就是普通cell culture的hood。

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n*t
25
你别去逗别人了,人生杯具到这个程度,总要有点同情心的。

【在 j****e 的大作中提到】
: 你要是舍不得包子就要倒霉了
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j*x
26
FDA过不了?看来你是真的不懂。。。机器人也好,中试话制备也罢,该什么要求就什
么要求。否则你产出的东西有谁敢用,你又怎么敢往外摆? 相关材料一公布,这就是
找死的行为。实在对你们公司的专业性不乐观,当然,如果是你自己的个人行我就不说
啥了。
如果你对生物制剂有一定的了解的话,你就应该清楚,相应的GMP厂房对生物安全相关
操作的限制。
anyway,忠言逆耳,你到了一个新地方新公司想积极表现一下的心理可以理解。但是,
请不要拿自己的专业性来开玩笑

【在 j*****q 的大作中提到】
: 搞笑不搞笑就不劳操心了。哪都有black box的。
: 能在S2下做偶就不来同了。偶们最后要用robot,还是进production的。只能S1,不然
: fda也过不了。

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j*q
28
诶, 都说了这些问题不用操心了。偶一直强调在技术层面讨论在S1里包装和infect细胞
。如果Is很权威的说在合法合理的前提下S1里是不可能做lentivirus的,那偶就力马闭
嘴了。如果不合法做,偶问都不用问了。
GMP规定这些记录保存30年。别说实验记录了连参加GMP培训的记录也得30年。
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c*o
29
你要被人肉了,谁想人肉桥西的给我发包子。。。

【在 j****e 的大作中提到】
: 我坦白:这个无聊的人就是我,而且现在我只公布了第一批照片,以后会陆续公布其它
: 的,sex版的同志赶快发我包子啊,我保证不公布你们的照片

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j*q
30
诶, 都说了这些问题不用操心了。偶一直强调在技术层面讨论在S1里包装和infect细胞
。如果Is很权威的说在合法合理的前提下S1里是不可能做lentivirus的,那偶就力马闭
嘴了。如果不合法做,偶问都不用问了。
GMP规定这些记录保存30年。别说实验记录了连参加GMP培训的记录也得30年。
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j*e
31
Don't worry, I will posst your picture first

【在 c*******o 的大作中提到】
: 你要被人肉了,谁想人肉桥西的给我发包子。。。
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j*x
32
事实上在第一个帖子里就已经明确说了,lentivector眼下没有任何可能合法的在BSL1
条件下制备及感染靶细胞,这个信息在任何一本实验室安全指南中都能找的到,这个是
lentivirus的性质决定的。研究所/公司这方面都会有专业的顾问可以咨询,一个简单
的电话而已。
不知道是谁一直在强调什么要求不严格啊blackbox啊。。。不觉得自相矛盾吗?
多说无益,到此为止

【在 j*****q 的大作中提到】
: 诶, 都说了这些问题不用操心了。偶一直强调在技术层面讨论在S1里包装和infect细胞
: 。如果Is很权威的说在合法合理的前提下S1里是不可能做lentivirus的,那偶就力马闭
: 嘴了。如果不合法做,偶问都不用问了。
: GMP规定这些记录保存30年。别说实验记录了连参加GMP培训的记录也得30年。

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c*o
33
呵呵,猫吃鱼,狗吃肉,奥德曼打小怪兽。谁叫他们是小怪兽。。。

你别去逗别人了,人生杯具到这个程度,总要有点同情心的。

【在 n******t 的大作中提到】
: 你别去逗别人了,人生杯具到这个程度,总要有点同情心的。
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j*q
34
原来ls的已经权威的表达过了还是从实验室安全手册里采来的信息,受教了。
说black box是让LS的不要太愚腐。偶在德国快10年了德国人到底怎么样还算知道一二
。就这种技术问题拿实验室安全手册来做判段,可见ls的已经学到德国人的精髓了。
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c*o
35
哦?哪一张呀?

【在 j****e 的大作中提到】
: Don't worry, I will posst your picture first
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j*e
36
The one in which 2 people, you and Sister Luo are eating together

【在 c*******o 的大作中提到】
: 哦?哪一张呀?
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c*o
37
who is Sister Luo?

【在 j****e 的大作中提到】
: The one in which 2 people, you and Sister Luo are eating together
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j*e
38
Luo Yufeng

【在 c*******o 的大作中提到】
: who is Sister Luo?
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c*o
39
直接说凤姐不就好了,还搞个Sister Luo弄的我还以为是哪个宗教人士呢。
哎,你露馅了,我根本不符合凤姐的条件,凤姐不可能跟我吃饭的。

【在 j****e 的大作中提到】
: Luo Yufeng
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m*d
40
那个女的违背了一夜情道德
要被追杀的
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e*G
41
那女的应该啥特没漏,想追杀也没们

【在 m**d 的大作中提到】
: 那个女的违背了一夜情道德
: 要被追杀的

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e*G
42
从德国杀过来刚注册的id

【在 c*******o 的大作中提到】
: 这几个不会站内发信?
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f*r
43
一夜情也有道德?

【在 m**d 的大作中提到】
: 那个女的违背了一夜情道德
: 要被追杀的

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N*C
44
盗亦有道

【在 f******r 的大作中提到】
: 一夜情也有道德?
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c*o
45
一夜情的道德是什么?

【在 m**d 的大作中提到】
: 那个女的违背了一夜情道德
: 要被追杀的

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k*e
46
什么强奸不如嫖娼,嫖娼不如上香,上香不如搓麻,搓麻不如会娘。

【在 c*******o 的大作中提到】
: 一夜情的道德是什么?
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c*o
47
那他们这样一个一个华人论坛杀过去要累死的。。。

【在 e*****G 的大作中提到】
: 从德国杀过来刚注册的id
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