请教：Leukemia/Lymphoma转染# Biology - 生物学
G*T
1 楼
每周工作20个小时的那种。
如果是做两份part-time呢，每份20小时/星期呢？
就是想度过那个三个月的unemployment期限。
如果是做两份part-time呢，每份20小时/星期呢？
就是想度过那个三个月的unemployment期限。
j*n
2 楼
梅兰竹菊，最能代表处女座的是哪一个？ 好像都挺沾边^_-
“花中四君子”因其本身习性而被赋予不同的人格魅力。
色淡香清、象征谦谦君子的是兰；
不与群芳争艳，金秋绽放、恬然自处的是菊；
修长挺拔、清雅高格的是竹；
迎寒而开、傲霜斗雪的是梅。
菊，它不仅清丽淡雅、芳香袭人，而且具有傲霜斗雪的特征；它艳于百花凋后，不与群
芳争列，故历来被用来象征恬然自处、傲然不屈的高尚品格。
发信人: jnyn (水冥冲=毒舌), 信区: virgo
标 题: 有一种花，它只在夏去秋来的九月盛开
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Oct 14 15:06:45 2011, 美东)
咏菊(黄巢)
秋来不与百花妍，瘦尽清寒入楚天。
雨润流香茶外饮，霜栽彻骨酒中眠。
何须妩媚争如意，只教孤标任可怜。
一瓣芳心开淡薄，无边旧事上琴弦。
不是花中偏爱菊，此花开后更无花。
九月菊花淡悠然
“花中四君子”因其本身习性而被赋予不同的人格魅力。
色淡香清、象征谦谦君子的是兰；
不与群芳争艳，金秋绽放、恬然自处的是菊；
修长挺拔、清雅高格的是竹；
迎寒而开、傲霜斗雪的是梅。
菊，它不仅清丽淡雅、芳香袭人，而且具有傲霜斗雪的特征；它艳于百花凋后，不与群
芳争列，故历来被用来象征恬然自处、傲然不屈的高尚品格。
发信人: jnyn (水冥冲=毒舌), 信区: virgo
标 题: 有一种花，它只在夏去秋来的九月盛开
发信站: BBS 未名空间站 (Fri Oct 14 15:06:45 2011, 美东)
咏菊(黄巢)
秋来不与百花妍，瘦尽清寒入楚天。
雨润流香茶外饮，霜栽彻骨酒中眠。
何须妩媚争如意，只教孤标任可怜。
一瓣芳心开淡薄，无边旧事上琴弦。
不是花中偏爱菊，此花开后更无花。
九月菊花淡悠然
N*n
3 楼
蛊惑仔好在什么地方
最近在看这个，一到六，听说这个曾经征服香港，风靡大陆。-----------大侠们来
说说，你喜欢这个吗？ 为什么？
最近在看这个，一到六，听说这个曾经征服香港，风靡大陆。-----------大侠们来
说说，你喜欢这个吗？ 为什么？
c*r
4 楼
【 以下文字转载自 PDA 讨论区 】
发信人: catcher (Can I?), 信区: PDA
标 题: 苹果准备量产小屏幕iPad了
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Jul 5 14:18:37 2012, 美东)
教主尸骨未寒呵。。。
看来，压力确实很大
http://online.wsj.com/article/SB1000142405270230414120457750647
Apple Preps for Smaller Tablet
Parts Makers in Asia Gear Up to Produce Device With Smaller Screen Than iPad
发信人: catcher (Can I?), 信区: PDA
标 题: 苹果准备量产小屏幕iPad了
发信站: BBS 未名空间站 (Thu Jul 5 14:18:37 2012, 美东)
教主尸骨未寒呵。。。
看来，压力确实很大
http://online.wsj.com/article/SB1000142405270230414120457750647
Apple Preps for Smaller Tablet
Parts Makers in Asia Gear Up to Produce Device With Smaller Screen Than iPad
f*i
5 楼
http://www.amazon.com/exec/obidos/ASIN/B0057PKXUU/ref=nosim/dea
一开始是 free shipping
然后shipping 变成了$4.69
现在shipping 又变成了$5.99
一开始是 free shipping
然后shipping 变成了$4.69
现在shipping 又变成了$5.99
h*t
6 楼
请教一下高人们：
1. 对于Leukemia stem cell，大家一般用什么细胞系来筛选，能否告知一二，具体的
细胞株名称？
2. 对leukemia/lymphoma cell line，大家觉得哪几个细胞株最容易转染？
由于种种原因，暂无法建小鼠leukemia/lymphoma model；同时也无法使用病毒等进行
感染，只能使用细胞系，同时用最原始的方法操作，望大家不吝赐教。
谢谢！
1. 对于Leukemia stem cell，大家一般用什么细胞系来筛选，能否告知一二，具体的
细胞株名称？
2. 对leukemia/lymphoma cell line，大家觉得哪几个细胞株最容易转染？
由于种种原因，暂无法建小鼠leukemia/lymphoma model；同时也无法使用病毒等进行
感染，只能使用细胞系，同时用最原始的方法操作，望大家不吝赐教。
谢谢！
J*i
7 楼
专业相关的工作就可以，parttime没关系，不需要2份
每周工作20个小时的那种。
如果是做两份part-time呢，每份20小时/星期呢？
【在 G**T 的大作中提到】
: 每周工作20个小时的那种。
: 如果是做两份part-time呢，每份20小时/星期呢？
: 就是想度过那个三个月的unemployment期限。
每周工作20个小时的那种。
如果是做两份part-time呢，每份20小时/星期呢？
【在 G**T 的大作中提到】
: 每周工作20个小时的那种。
: 如果是做两份part-time呢，每份20小时/星期呢？
: 就是想度过那个三个月的unemployment期限。
j*n
8 楼
送给最傲然不屈的处女座某童鞋
没法说是谁:-P
没法说是谁:-P
s*i
9 楼
够屌，够狠，够淫荡
w*g
10 楼
鬃央粗了修赠组义了.
iPad
【在 c*****r 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 PDA 讨论区 】
: 发信人: catcher (Can I?), 信区: PDA
: 标 题: 苹果准备量产小屏幕iPad了
: 发信站: BBS 未名空间站 (Thu Jul 5 14:18:37 2012, 美东)
: 教主尸骨未寒呵。。。
: 看来，压力确实很大
: http://online.wsj.com/article/SB1000142405270230414120457750647
: Apple Preps for Smaller Tablet
: Parts Makers in Asia Gear Up to Produce Device With Smaller Screen Than iPad
iPad
【在 c*****r 的大作中提到】
: 【 以下文字转载自 PDA 讨论区 】
: 发信人: catcher (Can I?), 信区: PDA
: 标 题: 苹果准备量产小屏幕iPad了
: 发信站: BBS 未名空间站 (Thu Jul 5 14:18:37 2012, 美东)
: 教主尸骨未寒呵。。。
: 看来，压力确实很大
: http://online.wsj.com/article/SB1000142405270230414120457750647
: Apple Preps for Smaller Tablet
: Parts Makers in Asia Gear Up to Produce Device With Smaller Screen Than iPad
s*t
11 楼
1 HPC7
2 NB4 U937 HL60 用amaxa的kit转染
【在 h*****t 的大作中提到】
: 请教一下高人们：
: 1. 对于Leukemia stem cell，大家一般用什么细胞系来筛选，能否告知一二，具体的
: 细胞株名称？
: 2. 对leukemia/lymphoma cell line，大家觉得哪几个细胞株最容易转染？
: 由于种种原因，暂无法建小鼠leukemia/lymphoma model；同时也无法使用病毒等进行
: 感染，只能使用细胞系，同时用最原始的方法操作，望大家不吝赐教。
: 谢谢！
2 NB4 U937 HL60 用amaxa的kit转染
【在 h*****t 的大作中提到】
: 请教一下高人们：
: 1. 对于Leukemia stem cell，大家一般用什么细胞系来筛选，能否告知一二，具体的
: 细胞株名称？
: 2. 对leukemia/lymphoma cell line，大家觉得哪几个细胞株最容易转染？
: 由于种种原因，暂无法建小鼠leukemia/lymphoma model；同时也无法使用病毒等进行
: 感染，只能使用细胞系，同时用最原始的方法操作，望大家不吝赐教。
: 谢谢！
G*T
12 楼
谢谢，包子一个
但是网上找到一个连接：http://ois.njit.edu/docs/opt-faqs.pdf
上面有一句话：For post-completion OPT full-time is the only option.
这个怎么理解啊？
【在 J********i 的大作中提到】
: 专业相关的工作就可以，parttime没关系，不需要2份
:
: 每周工作20个小时的那种。
: 如果是做两份part-time呢，每份20小时/星期呢？
但是网上找到一个连接：http://ois.njit.edu/docs/opt-faqs.pdf
上面有一句话：For post-completion OPT full-time is the only option.
这个怎么理解啊？
【在 J********i 的大作中提到】
: 专业相关的工作就可以，parttime没关系，不需要2份
:
: 每周工作20个小时的那种。
: 如果是做两份part-time呢，每份20小时/星期呢？
s*8
13 楼
那句题菊花的他年我若为青帝，报与桃花一处开也是他写的吧。 这哥们为啥这么爱菊
花？
【在 j**n 的大作中提到】
: 梅兰竹菊，最能代表处女座的是哪一个？ 好像都挺沾边^_-
: “花中四君子”因其本身习性而被赋予不同的人格魅力。
: 色淡香清、象征谦谦君子的是兰；
: 不与群芳争艳，金秋绽放、恬然自处的是菊；
: 修长挺拔、清雅高格的是竹；
: 迎寒而开、傲霜斗雪的是梅。
: 菊，它不仅清丽淡雅、芳香袭人，而且具有傲霜斗雪的特征；它艳于百花凋后，不与群
: 芳争列，故历来被用来象征恬然自处、傲然不屈的高尚品格。
: 发信人: jnyn (水冥冲=毒舌), 信区: virgo
: 标 题: 有一种花，它只在夏去秋来的九月盛开
花？
【在 j**n 的大作中提到】
: 梅兰竹菊，最能代表处女座的是哪一个？ 好像都挺沾边^_-
: “花中四君子”因其本身习性而被赋予不同的人格魅力。
: 色淡香清、象征谦谦君子的是兰；
: 不与群芳争艳，金秋绽放、恬然自处的是菊；
: 修长挺拔、清雅高格的是竹；
: 迎寒而开、傲霜斗雪的是梅。
: 菊，它不仅清丽淡雅、芳香袭人，而且具有傲霜斗雪的特征；它艳于百花凋后，不与群
: 芳争列，故历来被用来象征恬然自处、傲然不屈的高尚品格。
: 发信人: jnyn (水冥冲=毒舌), 信区: virgo
: 标 题: 有一种花，它只在夏去秋来的九月盛开
m*d
14 楼
黑色会自己拍的宣传片
【在 N****n 的大作中提到】
: 蛊惑仔好在什么地方
: 最近在看这个，一到六，听说这个曾经征服香港，风靡大陆。-----------大侠们来
: 说说，你喜欢这个吗？ 为什么？
【在 N****n 的大作中提到】
: 蛊惑仔好在什么地方
: 最近在看这个，一到六，听说这个曾经征服香港，风靡大陆。-----------大侠们来
: 说说，你喜欢这个吗？ 为什么？
z*e
15 楼
跟你们说不会的。
h*t
16 楼
谢谢，非常感谢！
J*i
17 楼
90 days rule只针对失业的时间
我在telnet下不方便贴link，你google OPT 90 days unemployment rule，第一个结果
就解释的很清楚了
谢谢
但是网上找到一个连接：http://ois.njit.edu/docs/opt-faqs.pdf
上面有一句话：For post-completion OPT full-time is the only option.
这个怎么理解啊？
【在 G**T 的大作中提到】
: 谢谢，包子一个
: 但是网上找到一个连接：http://ois.njit.edu/docs/opt-faqs.pdf
: 上面有一句话：For post-completion OPT full-time is the only option.
: 这个怎么理解啊？
我在telnet下不方便贴link，你google OPT 90 days unemployment rule，第一个结果
就解释的很清楚了
谢谢
但是网上找到一个连接：http://ois.njit.edu/docs/opt-faqs.pdf
上面有一句话：For post-completion OPT full-time is the only option.
这个怎么理解啊？
【在 G**T 的大作中提到】
: 谢谢，包子一个
: 但是网上找到一个连接：http://ois.njit.edu/docs/opt-faqs.pdf
: 上面有一句话：For post-completion OPT full-time is the only option.
: 这个怎么理解啊？
j*n
18 楼
品味的问题？
为什么有些人爱桃花，有些人爱樱花，有些人偏偏欣赏的是菊花 ：）
【在 s**********8 的大作中提到】
: 那句题菊花的他年我若为青帝，报与桃花一处开也是他写的吧。 这哥们为啥这么爱菊
: 花？
为什么有些人爱桃花，有些人爱樱花，有些人偏偏欣赏的是菊花 ：）
【在 s**********8 的大作中提到】
: 那句题菊花的他年我若为青帝，报与桃花一处开也是他写的吧。 这哥们为啥这么爱菊
: 花？
N*n
19 楼
陈浩南长的挺阴性的。
s*t
20 楼
1 还有32D cell. 32D cells can differentiate into granulocytes and in my
opinion it would be better to use than NB4, U937 and other transformed
cells lines, because they are not considered to be transformed.
Differentiation can be blocked by oncogenes etc.
See Figuera et al, 2010 Cancer Cell for details.
【在 h*****t 的大作中提到】
: 谢谢，非常感谢！
opinion it would be better to use than NB4, U937 and other transformed
cells lines, because they are not considered to be transformed.
Differentiation can be blocked by oncogenes etc.
See Figuera et al, 2010 Cancer Cell for details.
【在 h*****t 的大作中提到】
: 谢谢，非常感谢！
j*a
21 楼
你那个连接不知道是从哪里找到的。我们学校说国际学生办公室说每周20小时与本专业
相关的工作就可以maintain你的opt。你可以去你们学校的国际学生办公室问问。
相关的工作就可以maintain你的opt。你可以去你们学校的国际学生办公室问问。
s*8
22 楼
口味很独特, 剑走偏锋, 最终没入王道.
【在 j**n 的大作中提到】
: 品味的问题？
: 为什么有些人爱桃花，有些人爱樱花，有些人偏偏欣赏的是菊花 ：）
【在 j**n 的大作中提到】
: 品味的问题？
: 为什么有些人爱桃花，有些人爱樱花，有些人偏偏欣赏的是菊花 ：）
r*y
23 楼
想起了在康熙里扮丑角的陈汉典
当年在艋舺里也是条小硬汉啊
再跟上康熙的赵又廷一比，真是戏内戏外都输，感慨
【在 N****n 的大作中提到】
: 陈浩南长的挺阴性的。
当年在艋舺里也是条小硬汉啊
再跟上康熙的赵又廷一比，真是戏内戏外都输，感慨
【在 N****n 的大作中提到】
: 陈浩南长的挺阴性的。
h*t
24 楼
谢谢，但是有些迷糊了。
因为ATCC上面这样写的：
Description
lymphoblast, established from long-term bone marrow cultures of C3H/HeJ mice
infected with the Friend murine leukemia virus. Morphology: mostly round
cells growing singly or in small clusters in suspension, some cells are
loosely adherent.
但是，另外一个人的paper却写的该细胞为myeloid：
Shi B, Prisco M, Calin G, Liu CG, Russo G, Giordano A, Baserga R. Expression
profiles of micro RNA in proliferating and differentiating 32D murine
myeloid cells. J Cell Physiology 207: 706-10, 2006.
这个怎么办呢，信谁好一些？
因为ATCC上面这样写的：
Description
lymphoblast, established from long-term bone marrow cultures of C3H/HeJ mice
infected with the Friend murine leukemia virus. Morphology: mostly round
cells growing singly or in small clusters in suspension, some cells are
loosely adherent.
但是，另外一个人的paper却写的该细胞为myeloid：
Shi B, Prisco M, Calin G, Liu CG, Russo G, Giordano A, Baserga R. Expression
profiles of micro RNA in proliferating and differentiating 32D murine
myeloid cells. J Cell Physiology 207: 706-10, 2006.
这个怎么办呢，信谁好一些？
s*i
25 楼
的确有这个规定，我的理解那个Fulltime是说，不计算实际工作时间。也就是说，即使
你每周只工作20小时，一年的OPT也不能拆开来用两年。
你每周只工作20小时，一年的OPT也不能拆开来用两年。
j*n
26 楼
那是因为看到了菊的独特之处吧 :)
太尉喜欢什么？ 四月牡丹？
【在 s**********8 的大作中提到】
: 口味很独特, 剑走偏锋, 最终没入王道.
太尉喜欢什么？ 四月牡丹？
【在 s**********8 的大作中提到】
: 口味很独特, 剑走偏锋, 最终没入王道.
d*d
27 楼
其实也没什么特别的，只是初中的时候被老师压抑得太狠，看看古惑仔的VCD很解气。
【在 N****n 的大作中提到】
: 蛊惑仔好在什么地方
: 最近在看这个，一到六，听说这个曾经征服香港，风靡大陆。-----------大侠们来
: 说说，你喜欢这个吗？ 为什么？
【在 N****n 的大作中提到】
: 蛊惑仔好在什么地方
: 最近在看这个，一到六，听说这个曾经征服香港，风靡大陆。-----------大侠们来
: 说说，你喜欢这个吗？ 为什么？
h*t
28 楼
另外，32D来自C3H/HeJ 小鼠，为H-2k，C57/B6老鼠为H-2b，32D打到后者里面是不是应
该会被排斥掉呢？
该会被排斥掉呢？
s*8
29 楼
为啥不时芍药?价格便宜,量又足.
【在 j**n 的大作中提到】
: 那是因为看到了菊的独特之处吧 :)
: 太尉喜欢什么？ 四月牡丹？
【在 j**n 的大作中提到】
: 那是因为看到了菊的独特之处吧 :)
: 太尉喜欢什么？ 四月牡丹？
s*t
30 楼
是myeloid
mice
Expression
【在 h*****t 的大作中提到】
: 谢谢，但是有些迷糊了。
: 因为ATCC上面这样写的：
: Description
: lymphoblast, established from long-term bone marrow cultures of C3H/HeJ mice
: infected with the Friend murine leukemia virus. Morphology: mostly round
: cells growing singly or in small clusters in suspension, some cells are
: loosely adherent.
: 但是，另外一个人的paper却写的该细胞为myeloid：
: Shi B, Prisco M, Calin G, Liu CG, Russo G, Giordano A, Baserga R. Expression
: profiles of micro RNA in proliferating and differentiating 32D murine
mice
Expression
【在 h*****t 的大作中提到】
: 谢谢，但是有些迷糊了。
: 因为ATCC上面这样写的：
: Description
: lymphoblast, established from long-term bone marrow cultures of C3H/HeJ mice
: infected with the Friend murine leukemia virus. Morphology: mostly round
: cells growing singly or in small clusters in suspension, some cells are
: loosely adherent.
: 但是，另外一个人的paper却写的该细胞为myeloid：
: Shi B, Prisco M, Calin G, Liu CG, Russo G, Giordano A, Baserga R. Expression
: profiles of micro RNA in proliferating and differentiating 32D murine
c*u
31 楼
菊花泡茶不错，芍药有啥功效？
为啥不时芍药?价格便宜,量又足.
【在 s**********8 的大作中提到】
: 为啥不时芍药?价格便宜,量又足.
为啥不时芍药?价格便宜,量又足.
【在 s**********8 的大作中提到】
: 为啥不时芍药?价格便宜,量又足.
s*g
32 楼
leukemia/lymphoma cell line只有amaxa的kit电转,或病毒转染.
别的LAB用BIO-RAD电转机器,加PBS电转leukemia(当然死了很多,但也有活的),但省钱啊.
别的LAB用BIO-RAD电转机器,加PBS电转leukemia(当然死了很多,但也有活的),但省钱啊.
s*8
33 楼
芍药,药也. 入药可状羊补肾,宜治月经不调, 血气两虚等症.
【在 c***u 的大作中提到】
: 菊花泡茶不错，芍药有啥功效？
:
: 为啥不时芍药?价格便宜,量又足.
【在 c***u 的大作中提到】
: 菊花泡茶不错，芍药有啥功效？
:
: 为啥不时芍药?价格便宜,量又足.
h*t
34 楼
好的，多谢，我再多看点文献。
给形象打分有什么用处呢？
给形象打分有什么用处呢？
s*g
35 楼
友情提醒:如果用BIO-RAD上诉廉价方法,是要大量细胞的.
而AMAXA 和病毒转染就不需要大量细胞.
【在 h*****t 的大作中提到】
: 好的，多谢，我再多看点文献。
: 给形象打分有什么用处呢？
而AMAXA 和病毒转染就不需要大量细胞.
【在 h*****t 的大作中提到】
: 好的，多谢，我再多看点文献。
: 给形象打分有什么用处呢？
h*t
36 楼
现在看来，这些都比较难以实现了，我觉得用neon电转仪可能也是可行的。
但是这些实验室都不具备的，包括病毒。
能考虑到的就是直接转，如果没有办法，只好放弃啦。
谢谢大家！
但是这些实验室都不具备的，包括病毒。
能考虑到的就是直接转，如果没有办法，只好放弃啦。
谢谢大家！
h*u
37 楼
借贵贴问个问题哈。我无意中发现一个很重要的调控铁代谢的基因在K562中表达相当
高。之前大家一直认为此基因只在肝脏表达。我想做一个实验看一下此基因是否在血液
细胞的分化中起作用。
我想找一个比较原始的hematopoietic cell line, 此细胞株能够在不同条件下分化成
leukocyte, lymphcyte, and red cells。完了检测此基因在不同阶段的表达，如果结果感兴趣的话，可以knock down此基因看它的功能。
那种细胞株合适呢？
【在 h*****t 的大作中提到】
: 请教一下高人们：
: 1. 对于Leukemia stem cell，大家一般用什么细胞系来筛选，能否告知一二，具体的
: 细胞株名称？
: 2. 对leukemia/lymphoma cell line，大家觉得哪几个细胞株最容易转染？
: 由于种种原因，暂无法建小鼠leukemia/lymphoma model；同时也无法使用病毒等进行
: 感染，只能使用细胞系，同时用最原始的方法操作，望大家不吝赐教。
: 谢谢！
高。之前大家一直认为此基因只在肝脏表达。我想做一个实验看一下此基因是否在血液
细胞的分化中起作用。
我想找一个比较原始的hematopoietic cell line, 此细胞株能够在不同条件下分化成
leukocyte, lymphcyte, and red cells。完了检测此基因在不同阶段的表达，如果结果感兴趣的话，可以knock down此基因看它的功能。
那种细胞株合适呢？
【在 h*****t 的大作中提到】
: 请教一下高人们：
: 1. 对于Leukemia stem cell，大家一般用什么细胞系来筛选，能否告知一二，具体的
: 细胞株名称？
: 2. 对leukemia/lymphoma cell line，大家觉得哪几个细胞株最容易转染？
: 由于种种原因，暂无法建小鼠leukemia/lymphoma model；同时也无法使用病毒等进行
: 感染，只能使用细胞系，同时用最原始的方法操作，望大家不吝赐教。
: 谢谢！
z*8
38 楼
mark
h*8
39 楼
貌似32d?
但是只看到诱导这个往neutropil方向分化的文章，
如果想往lymphocyte 方向分化，可能要找更早的祖细胞
呵呵，干脆分离造血干得了，不过你还要分化干啥，直接找几个细胞系得了
k562是red cell 来源的，高表达这个控铁的，不奇怪，也容易往red cell 方向做
还不如直接比较leukemia, monocyte, lymphoma, k562
估计只有k562高表达
结果感兴趣的话，可以knock down此基因看它的功能。
【在 h******u 的大作中提到】
: 借贵贴问个问题哈。我无意中发现一个很重要的调控铁代谢的基因在K562中表达相当
: 高。之前大家一直认为此基因只在肝脏表达。我想做一个实验看一下此基因是否在血液
: 细胞的分化中起作用。
: 我想找一个比较原始的hematopoietic cell line, 此细胞株能够在不同条件下分化成
: leukocyte, lymphcyte, and red cells。完了检测此基因在不同阶段的表达，如果结果感兴趣的话，可以knock down此基因看它的功能。
: 那种细胞株合适呢？
但是只看到诱导这个往neutropil方向分化的文章，
如果想往lymphocyte 方向分化，可能要找更早的祖细胞
呵呵，干脆分离造血干得了，不过你还要分化干啥，直接找几个细胞系得了
k562是red cell 来源的，高表达这个控铁的，不奇怪，也容易往red cell 方向做
还不如直接比较leukemia, monocyte, lymphoma, k562
估计只有k562高表达
结果感兴趣的话，可以knock down此基因看它的功能。
【在 h******u 的大作中提到】
: 借贵贴问个问题哈。我无意中发现一个很重要的调控铁代谢的基因在K562中表达相当
: 高。之前大家一直认为此基因只在肝脏表达。我想做一个实验看一下此基因是否在血液
: 细胞的分化中起作用。
: 我想找一个比较原始的hematopoietic cell line, 此细胞株能够在不同条件下分化成
: leukocyte, lymphcyte, and red cells。完了检测此基因在不同阶段的表达，如果结果感兴趣的话，可以knock down此基因看它的功能。
: 那种细胞株合适呢？
h*8
40 楼
没有一个好转的
amaxa巨贵，不同细胞还得买不同的盒子
我比较过，invitrogen 的neon是最好的
【在 h*****t 的大作中提到】
: 请教一下高人们：
: 1. 对于Leukemia stem cell，大家一般用什么细胞系来筛选，能否告知一二，具体的
: 细胞株名称？
: 2. 对leukemia/lymphoma cell line，大家觉得哪几个细胞株最容易转染？
: 由于种种原因，暂无法建小鼠leukemia/lymphoma model；同时也无法使用病毒等进行
: 感染，只能使用细胞系，同时用最原始的方法操作，望大家不吝赐教。
: 谢谢！
amaxa巨贵，不同细胞还得买不同的盒子
我比较过，invitrogen 的neon是最好的
【在 h*****t 的大作中提到】
: 请教一下高人们：
: 1. 对于Leukemia stem cell，大家一般用什么细胞系来筛选，能否告知一二，具体的
: 细胞株名称？
: 2. 对leukemia/lymphoma cell line，大家觉得哪几个细胞株最容易转染？
: 由于种种原因，暂无法建小鼠leukemia/lymphoma model；同时也无法使用病毒等进行
: 感染，只能使用细胞系，同时用最原始的方法操作，望大家不吝赐教。
: 谢谢！
h*t
41 楼
好的，我试试neon。
多谢！
多谢！
h*u
42 楼
你说的分离造血干细胞，具体如何做？分离后可以用不同的生长因子诱导成下级细胞？
有没有这方面经典的文章让俺拜读一下？对这领域实在是不熟悉。现在在医院工作，
白血病的病人很多，CD34阳性的细胞很容易找到。
如直接比较leukemia, monocyte, lymphoma细胞株的话，可否推荐一下细胞株？
【在 h**********8 的大作中提到】
: 貌似32d?
: 但是只看到诱导这个往neutropil方向分化的文章，
: 如果想往lymphocyte 方向分化，可能要找更早的祖细胞
: 呵呵，干脆分离造血干得了，不过你还要分化干啥，直接找几个细胞系得了
: k562是red cell 来源的，高表达这个控铁的，不奇怪，也容易往red cell 方向做
: 还不如直接比较leukemia, monocyte, lymphoma, k562
: 估计只有k562高表达
:
: 结果感兴趣的话，可以knock down此基因看它的功能。
有没有这方面经典的文章让俺拜读一下？对这领域实在是不熟悉。现在在医院工作，
白血病的病人很多，CD34阳性的细胞很容易找到。
如直接比较leukemia, monocyte, lymphoma细胞株的话，可否推荐一下细胞株？
【在 h**********8 的大作中提到】
: 貌似32d?
: 但是只看到诱导这个往neutropil方向分化的文章，
: 如果想往lymphocyte 方向分化，可能要找更早的祖细胞
: 呵呵，干脆分离造血干得了，不过你还要分化干啥，直接找几个细胞系得了
: k562是red cell 来源的，高表达这个控铁的，不奇怪，也容易往red cell 方向做
: 还不如直接比较leukemia, monocyte, lymphoma, k562
: 估计只有k562高表达
:
: 结果感兴趣的话，可以knock down此基因看它的功能。
h*8
43 楼
造血干我没有分离过，不好意思，帮不了你。貌似有一种磁珠挂了cd34抗体，可以直接
把细胞拉出来。版上有没有高手？现身说一说吧。
造血干的分化不是像文献里说的那么容易，如果你可以把造血干高效分化成这几种细胞
，就可以直接发表了。
leukemia 细胞系比如hl-60
mono-leukemia u937
lymphoma 比如raji，
此外的还有plb, kg1, thp1, nb4也都用的很多
【在 h******u 的大作中提到】
: 你说的分离造血干细胞，具体如何做？分离后可以用不同的生长因子诱导成下级细胞？
: 有没有这方面经典的文章让俺拜读一下？对这领域实在是不熟悉。现在在医院工作，
: 白血病的病人很多，CD34阳性的细胞很容易找到。
: 如直接比较leukemia, monocyte, lymphoma细胞株的话，可否推荐一下细胞株？
把细胞拉出来。版上有没有高手？现身说一说吧。
造血干的分化不是像文献里说的那么容易，如果你可以把造血干高效分化成这几种细胞
，就可以直接发表了。
leukemia 细胞系比如hl-60
mono-leukemia u937
lymphoma 比如raji，
此外的还有plb, kg1, thp1, nb4也都用的很多
【在 h******u 的大作中提到】
: 你说的分离造血干细胞，具体如何做？分离后可以用不同的生长因子诱导成下级细胞？
: 有没有这方面经典的文章让俺拜读一下？对这领域实在是不熟悉。现在在医院工作，
: 白血病的病人很多，CD34阳性的细胞很容易找到。
: 如直接比较leukemia, monocyte, lymphoma细胞株的话，可否推荐一下细胞株？
s*g
44 楼
不一定要病毒.
我就用质粒直接电转的.
电转仪去其他实验室借用一下就可以啊.主要是自己买ＫＩＴ。
网上查查就大致知道该用什么ＫＩＴ了。Ａｍａｘａ都有的。买了ｋｉｔ 还会有个免
费盘，盘上有他们机器使用的细胞系和程序几试剂（ｋｉｔ）.
我们用Ｌ较多。
如果没有，可以根据相关类似细胞系选ｋｉｔ和程序号就行。转完再筛选啊。筛选要比其他细胞系（神经／肾的要长时间些。要有耐心。）别的可能转天就上抗生素了。我往往多等些时间。因为死细胞多。活的就缓的慢。
另外还可以用ＧＦＰ Ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ选啊。
【在 h*****t 的大作中提到】
: 现在看来，这些都比较难以实现了，我觉得用neon电转仪可能也是可行的。
: 但是这些实验室都不具备的，包括病毒。
: 能考虑到的就是直接转，如果没有办法，只好放弃啦。
: 谢谢大家！
我就用质粒直接电转的.
电转仪去其他实验室借用一下就可以啊.主要是自己买ＫＩＴ。
网上查查就大致知道该用什么ＫＩＴ了。Ａｍａｘａ都有的。买了ｋｉｔ 还会有个免
费盘，盘上有他们机器使用的细胞系和程序几试剂（ｋｉｔ）.
我们用Ｌ较多。
如果没有，可以根据相关类似细胞系选ｋｉｔ和程序号就行。转完再筛选啊。筛选要比其他细胞系（神经／肾的要长时间些。要有耐心。）别的可能转天就上抗生素了。我往往多等些时间。因为死细胞多。活的就缓的慢。
另外还可以用ＧＦＰ Ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ选啊。
【在 h*****t 的大作中提到】
: 现在看来，这些都比较难以实现了，我觉得用neon电转仪可能也是可行的。
: 但是这些实验室都不具备的，包括病毒。
: 能考虑到的就是直接转，如果没有办法，只好放弃啦。
: 谢谢大家！
h*t
45 楼
好，多谢！
h*u
46 楼
Thanks!!!
【在 h**********8 的大作中提到】
: 造血干我没有分离过，不好意思，帮不了你。貌似有一种磁珠挂了cd34抗体，可以直接
: 把细胞拉出来。版上有没有高手？现身说一说吧。
: 造血干的分化不是像文献里说的那么容易，如果你可以把造血干高效分化成这几种细胞
: ，就可以直接发表了。
: leukemia 细胞系比如hl-60
: mono-leukemia u937
: lymphoma 比如raji，
: 此外的还有plb, kg1, thp1, nb4也都用的很多
【在 h**********8 的大作中提到】
: 造血干我没有分离过，不好意思，帮不了你。貌似有一种磁珠挂了cd34抗体，可以直接
: 把细胞拉出来。版上有没有高手？现身说一说吧。
: 造血干的分化不是像文献里说的那么容易，如果你可以把造血干高效分化成这几种细胞
: ，就可以直接发表了。
: leukemia 细胞系比如hl-60
: mono-leukemia u937
: lymphoma 比如raji，
: 此外的还有plb, kg1, thp1, nb4也都用的很多
g*5
47 楼
TfR2 or hepcidin?
结果感兴趣的话，可以knock down此基因看它的功能。
【在 h******u 的大作中提到】
: 借贵贴问个问题哈。我无意中发现一个很重要的调控铁代谢的基因在K562中表达相当
: 高。之前大家一直认为此基因只在肝脏表达。我想做一个实验看一下此基因是否在血液
: 细胞的分化中起作用。
: 我想找一个比较原始的hematopoietic cell line, 此细胞株能够在不同条件下分化成
: leukocyte, lymphcyte, and red cells。完了检测此基因在不同阶段的表达，如果结果感兴趣的话，可以knock down此基因看它的功能。
: 那种细胞株合适呢？
结果感兴趣的话，可以knock down此基因看它的功能。
【在 h******u 的大作中提到】
: 借贵贴问个问题哈。我无意中发现一个很重要的调控铁代谢的基因在K562中表达相当
: 高。之前大家一直认为此基因只在肝脏表达。我想做一个实验看一下此基因是否在血液
: 细胞的分化中起作用。
: 我想找一个比较原始的hematopoietic cell line, 此细胞株能够在不同条件下分化成
: leukocyte, lymphcyte, and red cells。完了检测此基因在不同阶段的表达，如果结果感兴趣的话，可以knock down此基因看它的功能。
: 那种细胞株合适呢？
h*8
48 楼
hehe, I am 山东人 too
【在 h******u 的大作中提到】
: Thanks!!!
【在 h******u 的大作中提到】
: Thanks!!!
f*e
49 楼
amaxa buffer自己配好了 也就买个杯子的钱 反正是建系 能有活的就OK了
【在 h**********8 的大作中提到】
: 没有一个好转的
: amaxa巨贵，不同细胞还得买不同的盒子
: 我比较过，invitrogen 的neon是最好的
【在 h**********8 的大作中提到】
: 没有一个好转的
: amaxa巨贵，不同细胞还得买不同的盒子
: 我比较过，invitrogen 的neon是最好的
g*5
50 楼
【在 h**********8 的大作中提到】
: 没有一个好转的
: amaxa巨贵，不同细胞还得买不同的盒子
: 我比较过，invitrogen 的neon是最好的
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