如何在细胞内观察到某个蛋白的磷酸化? - 未名空间MITBBS历史存档

如何在细胞内观察到某个蛋白的磷酸化?# Biology - 生物学

t*e2011-10-07 07:10

1 楼

Question: Insert an element in order into a sorted linked list containing
integer data
Solution:
public Node insertInOrder(Node head, Node insert) {
if (head == null)
return null;
Node previous = head;
Node current = head.next;
if (current == null) {
if (previous.data < insert.data) {
previous.next = insert;
insert.next = null;
return head;
}
else {
insert.next = previous;
return insert;

z*e2011-10-07 07:10

2 楼

刚才和Ben玩太疯了，Ben下来以后突然浑身抽出两分钟余，流了一滩口水，还非常罕见
地叫了几声，把我们都吓傻了。除了试图按摩他的后脖子安抚他之外，也不知道应该怎
么办！还好他终于安定下来了，狂喘的时候难得地在我的怀里待了几秒钟，喘停当一点
后就踉跄地下地自己找地方歇着了。几分钟后就恢复如常了，并没有狂吃的症状，一个
小时后还和Sweet Pea打了一架，现在看上去和另外两只没有任何区别了。。
可是他抽搐喘息的样子，深深地刻在了我们的脑海中。。我们两个人都不约而同地
google了“猫癫痫”，分别看了几段恐怖的发病的视频，现在还觉得毛骨悚然！据说
猫的真性癫痫极为少见，大多数都是症状性癫痫。我现在怀疑我们Ben刚才就是症状性
癫痫，可能是他被摇来摇去，惊吓加上大脑缺氧造成的。。唉。。具体情节我就不说了
，“主犯”现在也已经非常自责，发誓再也不这样reckless play了。。就是希望这个
不要留下什么后遗症啊！否则我们真的遗憾终生啊！
Ben刚刚恢复常态的时候我们都松了一口气，现在却是越想越后怕！看着现在Ben在沙发
上和往常一样熟睡安详的样子，真希望一切都已经真的过去了555～～～

l*k2011-10-07 07:10

3 楼

用了两天，第一是小文件sync速度比dropbox慢得多，第二文件只能回溯5次而db的增量
备份基本上不限制回溯历史长度，第三sugarsync监控程序有严重的内存泄露bug，开机
几天内存占用就上G，完全不能忍。放狗搜了一下，该内存泄露的bug至少已经存在一年
多，官方也发现这个严重bug，却一直没有修好。所以对sugar家的技术和长远发展十分
没有信心...

t*d2011-10-07 07:10

4 楼

请教各位，检测蛋白磷酸化一般都用WB或IP,但我想在活细胞内观察到靶蛋白的磷酸化
，有什么办法呢？先谢过了

t*e2011-10-07 07:10

5 楼

up, 没人知道么？

m*h2011-10-07 07:10

6 楼

好像好好养着避免过分激动就好了

【在 z*****e 的大作中提到】

: 刚才和Ben玩太疯了，Ben下来以后突然浑身抽出两分钟余，流了一滩口水，还非常罕见
: 地叫了几声，把我们都吓傻了。除了试图按摩他的后脖子安抚他之外，也不知道应该怎
: 么办！还好他终于安定下来了，狂喘的时候难得地在我的怀里待了几秒钟，喘停当一点
: 后就踉跄地下地自己找地方歇着了。几分钟后就恢复如常了，并没有狂吃的症状，一个
: 小时后还和Sweet Pea打了一架，现在看上去和另外两只没有任何区别了。。
: 可是他抽搐喘息的样子，深深地刻在了我们的脑海中。。我们两个人都不约而同地
: google了“猫癫痫”，分别看了几段恐怖的发病的视频，现在还觉得毛骨悚然！据说
: 猫的真性癫痫极为少见，大多数都是症状性癫痫。我现在怀疑我们Ben刚才就是症状性
: 癫痫，可能是他被摇来摇去，惊吓加上大脑缺氧造成的。。唉。。具体情节我就不说了
: ，“主犯”现在也已经非常自责，发誓再也不这样reckless play了。。就是希望这个

f*l2011-10-07 07:10

7 楼

sugarsync是不是国人的产品?　好像从Palm时代就听到这个名字了

【在 l********k 的大作中提到】

: 用了两天，第一是小文件sync速度比dropbox慢得多，第二文件只能回溯5次而db的增量
: 备份基本上不限制回溯历史长度，第三sugarsync监控程序有严重的内存泄露bug，开机
: 几天内存占用就上G，完全不能忍。放狗搜了一下，该内存泄露的bug至少已经存在一年
: 多，官方也发现这个严重bug，却一直没有修好。所以对sugar家的技术和长远发展十分
: 没有信心...

V*n2011-10-07 07:10

8 楼

IF using p-Ab?

f*e2011-10-07 07:10

9 楼

好像是，而且第二行似乎应该返回insert?

【在 t*******e 的大作中提到】

: up, 没人知道么？

c*e2011-10-07 07:10

10 楼

cft,抚摸下，让你压压惊
没事就好，癫痫貌似猫和人一样，只能预防不能根治啊。

【在 z*****e 的大作中提到】

: 刚才和Ben玩太疯了，Ben下来以后突然浑身抽出两分钟余，流了一滩口水，还非常罕见
: 地叫了几声，把我们都吓傻了。除了试图按摩他的后脖子安抚他之外，也不知道应该怎
: 么办！还好他终于安定下来了，狂喘的时候难得地在我的怀里待了几秒钟，喘停当一点
: 后就踉跄地下地自己找地方歇着了。几分钟后就恢复如常了，并没有狂吃的症状，一个
: 小时后还和Sweet Pea打了一架，现在看上去和另外两只没有任何区别了。。
: 可是他抽搐喘息的样子，深深地刻在了我们的脑海中。。我们两个人都不约而同地
: google了“猫癫痫”，分别看了几段恐怖的发病的视频，现在还觉得毛骨悚然！据说
: 猫的真性癫痫极为少见，大多数都是症状性癫痫。我现在怀疑我们Ben刚才就是症状性
: 癫痫，可能是他被摇来摇去，惊吓加上大脑缺氧造成的。。唉。。具体情节我就不说了
: ，“主犯”现在也已经非常自责，发誓再也不这样reckless play了。。就是希望这个

t*d2011-10-07 07:10

11 楼

这种方法可行吗？比如观察p38的磷酸化，用p-P38 Ab做免疫组化？，但我研究的蛋白
的磷酸化抗体都是针对某一磷酸化位点的，例如p-Tyr,通常用来IP的，如果做组化，假
阳性一堆

【在 V********n 的大作中提到】

: IF using p-Ab?

q*u2011-10-07 07:10

12 楼

while里面少了一个和前面if一样的else吧

Question: Insert an element in order into a sorted linked list containing
integer data
Solution:
public Node insertInOrder(Node head, Node insert) {
if (head == null)
return null;
Node previous = head;
Node current = head.next;
if (current == null) {
if (previous.data < insert.data) {
previous.next = insert;
insert.next = null;
return head;
}
else {
insert.next = previous;

【在 t*******e 的大作中提到】

: Question: Insert an element in order into a sorted linked list containing
: integer data
: Solution:
: public Node insertInOrder(Node head, Node insert) {
: if (head == null)
: return null;
: Node previous = head;
: Node current = head.next;
: if (current == null) {
: if (previous.data < insert.data) {

a*82011-10-07 07:10

13 楼

我们家猫曾经吃的太快太急，打了半天的嗝。

l*n2011-10-07 07:10

14 楼

不知道PacBio测序能否检测得到。甲基化是可以检测得到的

t*e2011-10-07 07:10

15 楼

回3楼：的确少了个else,
回2楼：我理解是题目希望如果是个空链表的话就返回错误，我不确定这里该不该用
null来表示

s*r2011-10-07 07:10

16 楼

要紧，需要诊断，它们癫痫的程度有区别

【在 z*****e 的大作中提到】

: 刚才和Ben玩太疯了，Ben下来以后突然浑身抽出两分钟余，流了一滩口水，还非常罕见
: 地叫了几声，把我们都吓傻了。除了试图按摩他的后脖子安抚他之外，也不知道应该怎
: 么办！还好他终于安定下来了，狂喘的时候难得地在我的怀里待了几秒钟，喘停当一点
: 后就踉跄地下地自己找地方歇着了。几分钟后就恢复如常了，并没有狂吃的症状，一个
: 小时后还和Sweet Pea打了一架，现在看上去和另外两只没有任何区别了。。
: 可是他抽搐喘息的样子，深深地刻在了我们的脑海中。。我们两个人都不约而同地
: google了“猫癫痫”，分别看了几段恐怖的发病的视频，现在还觉得毛骨悚然！据说
: 猫的真性癫痫极为少见，大多数都是症状性癫痫。我现在怀疑我们Ben刚才就是症状性
: 癫痫，可能是他被摇来摇去，惊吓加上大脑缺氧造成的。。唉。。具体情节我就不说了
: ，“主犯”现在也已经非常自责，发誓再也不这样reckless play了。。就是希望这个

x*e2011-10-07 07:10

17 楼

有种kit可以做这事儿，大概原理是两种抗体靠的够近就可以发光，可以用pY 和你的
蛋白抗体共染细胞。。。

k*y2011-10-07 07:10

18 楼

應該不用else吧

【在 t*******e 的大作中提到】

: 回3楼：的确少了个else,
: 回2楼：我理解是题目希望如果是个空链表的话就返回错误，我不确定这里该不该用
: null来表示

s*r2011-10-07 07:10

19 楼

patpat...

【在 z*****e 的大作中提到】

: 刚才和Ben玩太疯了，Ben下来以后突然浑身抽出两分钟余，流了一滩口水，还非常罕见
: 地叫了几声，把我们都吓傻了。除了试图按摩他的后脖子安抚他之外，也不知道应该怎
: 么办！还好他终于安定下来了，狂喘的时候难得地在我的怀里待了几秒钟，喘停当一点
: 后就踉跄地下地自己找地方歇着了。几分钟后就恢复如常了，并没有狂吃的症状，一个
: 小时后还和Sweet Pea打了一架，现在看上去和另外两只没有任何区别了。。
: 可是他抽搐喘息的样子，深深地刻在了我们的脑海中。。我们两个人都不约而同地
: google了“猫癫痫”，分别看了几段恐怖的发病的视频，现在还觉得毛骨悚然！据说
: 猫的真性癫痫极为少见，大多数都是症状性癫痫。我现在怀疑我们Ben刚才就是症状性
: 癫痫，可能是他被摇来摇去，惊吓加上大脑缺氧造成的。。唉。。具体情节我就不说了
: ，“主犯”现在也已经非常自责，发誓再也不这样reckless play了。。就是希望这个

d*p2011-10-07 07:10

20 楼

FACS

j*j2011-10-07 07:10

21 楼

//...
}
current = insert;
insert.next = null;
return head;
}
最后这句 "current = insert;" 错了；这样并没有把insert插进去。
应该是：
previous.next = insert;
insert.next = NULL;

【在 t*******e 的大作中提到】

: Question: Insert an element in order into a sorted linked list containing
: integer data
: Solution:
: public Node insertInOrder(Node head, Node insert) {
: if (head == null)
: return null;
: Node previous = head;
: Node current = head.next;
: if (current == null) {
: if (previous.data < insert.data) {

p*f2011-10-07 07:10

22 楼

Don't know much about this at all. However, I have read
somewhere that playing with cats shouldn't be rough.
It should be mentally stimulating rather than physically
challenging.

S*s2011-10-07 07:10

23 楼

有好用的drp1磷酸化抗体吗？

【在 d*p 的大作中提到】

: FACS

j*j2011-10-07 07:10

24 楼

给个简单点的version:
public Node insertInOrder(Node head, Node insert) {
if (head == null) {
if (insert != null)
insert.next = null;
return insert;
}
if (insert == null)
return head;
if (insert.data < head.data) {
insert.next = head;
return insert;
}
Node cur = head;
while (cur.next != null)
{
if (cur.next.data > insert.data)
{
Node tmp = cur.next;
cur.next = insert;
insert.ne

【在 t*******e 的大作中提到】

: Question: Insert an element in order into a sorted linked list containing
: integer data
: Solution:
: public Node insertInOrder(Node head, Node insert) {
: if (head == null)
: return null;
: Node previous = head;
: Node current = head.next;
: if (current == null) {
: if (previous.data < insert.data) {

x*u2011-10-07 07:10

25 楼

pat pat

【在 z*****e 的大作中提到】

: 刚才和Ben玩太疯了，Ben下来以后突然浑身抽出两分钟余，流了一滩口水，还非常罕见
: 地叫了几声，把我们都吓傻了。除了试图按摩他的后脖子安抚他之外，也不知道应该怎
: 么办！还好他终于安定下来了，狂喘的时候难得地在我的怀里待了几秒钟，喘停当一点
: 后就踉跄地下地自己找地方歇着了。几分钟后就恢复如常了，并没有狂吃的症状，一个
: 小时后还和Sweet Pea打了一架，现在看上去和另外两只没有任何区别了。。
: 可是他抽搐喘息的样子，深深地刻在了我们的脑海中。。我们两个人都不约而同地
: google了“猫癫痫”，分别看了几段恐怖的发病的视频，现在还觉得毛骨悚然！据说
: 猫的真性癫痫极为少见，大多数都是症状性癫痫。我现在怀疑我们Ben刚才就是症状性
: 癫痫，可能是他被摇来摇去，惊吓加上大脑缺氧造成的。。唉。。具体情节我就不说了
: ，“主犯”现在也已经非常自责，发誓再也不这样reckless play了。。就是希望这个

d*p2011-10-07 07:10

26 楼

只看过很多文章用FACS，具体到抗体不记得，你可以去GOOGLE查啊，很多抗体都会注明
是否可用于fc

f*42011-10-07 07:10

27 楼

更简单的版本
Node* insertInOrder(Node *head, int value){
Node *curr,*prev=NULL,*temp,
*newNode=static_cast( malloc(sizeof(Node)));
newNode->data=value;newNode->next=NULL;
if(head==NULL)
return newNode;

curr=head;
while(curr!=NULL&&curr->dataprev=curr;
curr=curr->next;
}

if(prev==NULL){
newNode->next=head;
return newNode;
}
else
if(curr==NULL)
prev->next=newNode;
el

h*o2011-10-07 07:10

28 楼

不懂，但是祝福！！

z*y2011-10-07 07:10

29 楼

BD Biosciences 有一些专门用于做细胞内磷酸化蛋白标记的抗体。如果你以前没做过
的话，最好同时买他们的用于细胞内染色（intracellular staining) 的试剂。

y*c2011-10-07 07:10

30 楼

I use pre and cur to check the special cases too :)

【在 f****4 的大作中提到】

: 更简单的版本
: Node* insertInOrder(Node *head, int value){
: Node *curr,*prev=NULL,*temp,
: *newNode=static_cast( malloc(sizeof(Node)));
: newNode->data=value;newNode->next=NULL;
: if(head==NULL)
: return newNode;
:
: curr=head;
: while(curr!=NULL&&curr->data

c*w2011-10-07 07:10

31 楼

bless ben

g*52011-10-07 07:10

32 楼

用olink.com
duolink
http://www.youtube.com/embed/f_ZTI_A3FtI?rel=0&wmode=transparen
两种抗体，一种是你这个蛋白的单抗，
另外是你这个蛋白磷酸化抗体多抗。
两种抗体可以同时识别你的蛋白，
距离近，二抗靠在一起，这个kit就扩增，原理自己看视频。

【在 t**d 的大作中提到】

: 请教各位，检测蛋白磷酸化一般都用WB或IP,但我想在活细胞内观察到靶蛋白的磷酸化
: ，有什么办法呢？先谢过了

d*n2011-10-07 07:10

33 楼

Even simpler one:
Node* insertInOrder(Node *head, int value)
{
Node *newHead = newNode(value, head);

Node *tNode = newHead;
while(tNode && tNode ->next && tNode ->value < tNode->next->value)
{
tNode->value ^= tNode->next->value;
tNode->next->value ^= tNode->value;
tNode->value ^= tNode->next->value;
tNode = tNode->next;
}
return newHead;
}

【在 f****4 的大作中提到】

: 更简单的版本
: Node* insertInOrder(Node *head, int value){
: Node *curr,*prev=NULL,*temp,
: *newNode=static_cast( malloc(sizeof(Node)));
: newNode->data=value;newNode->next=NULL;
: if(head==NULL)
: return newNode;
:
: curr=head;
: while(curr!=NULL&&curr->data

c*t2011-10-07 07:10

34 楼

pat pat
实在不懂,bless Ben~

【在 z*****e 的大作中提到】

: 刚才和Ben玩太疯了，Ben下来以后突然浑身抽出两分钟余，流了一滩口水，还非常罕见
: 地叫了几声，把我们都吓傻了。除了试图按摩他的后脖子安抚他之外，也不知道应该怎
: 么办！还好他终于安定下来了，狂喘的时候难得地在我的怀里待了几秒钟，喘停当一点
: 后就踉跄地下地自己找地方歇着了。几分钟后就恢复如常了，并没有狂吃的症状，一个
: 小时后还和Sweet Pea打了一架，现在看上去和另外两只没有任何区别了。。
: 可是他抽搐喘息的样子，深深地刻在了我们的脑海中。。我们两个人都不约而同地
: google了“猫癫痫”，分别看了几段恐怖的发病的视频，现在还觉得毛骨悚然！据说
: 猫的真性癫痫极为少见，大多数都是症状性癫痫。我现在怀疑我们Ben刚才就是症状性
: 癫痫，可能是他被摇来摇去，惊吓加上大脑缺氧造成的。。唉。。具体情节我就不说了
: ，“主犯”现在也已经非常自责，发誓再也不这样reckless play了。。就是希望这个