h*k
2 楼
使用的是tissue, 书上写的是不要超过30mg, 30mg看起来是个3mm的小方块。过量使用
tissue后效果会怎样?另外加了RLT buffer之后RNase还会降解RNA吗? 书上写的是RLT
buffer含有guanidine thiocyanate.
tissue后效果会怎样?另外加了RLT buffer之后RNase还会降解RNA吗? 书上写的是RLT
buffer含有guanidine thiocyanate.
s*y
4 楼
关于用量,没有那么严格的。多一点少一点组织无所谓,关键是你得确认所有组织都被
溶掉了,否则就一方面堵树脂,另外一方面带入过多污染物。
你可以多加点裂解液,多处理一回,然后视需要全部倒进一个小管或者分成几个
管。
RNase一般比较皮实,所以没人能保证RLT buffer一定能灭活,该注意的地方还是要注
意的。
RLT
【在 h****k 的大作中提到】
: 使用的是tissue, 书上写的是不要超过30mg, 30mg看起来是个3mm的小方块。过量使用
: tissue后效果会怎样?另外加了RLT buffer之后RNase还会降解RNA吗? 书上写的是RLT
: buffer含有guanidine thiocyanate.
溶掉了,否则就一方面堵树脂,另外一方面带入过多污染物。
你可以多加点裂解液,多处理一回,然后视需要全部倒进一个小管或者分成几个
管。
RNase一般比较皮实,所以没人能保证RLT buffer一定能灭活,该注意的地方还是要注
意的。
RLT
【在 h****k 的大作中提到】
: 使用的是tissue, 书上写的是不要超过30mg, 30mg看起来是个3mm的小方块。过量使用
: tissue后效果会怎样?另外加了RLT buffer之后RNase还会降解RNA吗? 书上写的是RLT
: buffer含有guanidine thiocyanate.
n*k
6 楼
more buffer and complete and fast lysis will do it...For a beginner, do
yourself a favor and NEVER try to save on buffer---the key is complete
lysis with enough buffer...then it can last fairly long, as long as it is fully lysed, no worry about RNase until the column step...if in doubt, use
RNAlater...it is fantastic...
RLT
【在 h****k 的大作中提到】
: 使用的是tissue, 书上写的是不要超过30mg, 30mg看起来是个3mm的小方块。过量使用
: tissue后效果会怎样?另外加了RLT buffer之后RNase还会降解RNA吗? 书上写的是RLT
: buffer含有guanidine thiocyanate.
yourself a favor and NEVER try to save on buffer---the key is complete
lysis with enough buffer...then it can last fairly long, as long as it is fully lysed, no worry about RNase until the column step...if in doubt, use
RNAlater...it is fantastic...
RLT
【在 h****k 的大作中提到】
: 使用的是tissue, 书上写的是不要超过30mg, 30mg看起来是个3mm的小方块。过量使用
: tissue后效果会怎样?另外加了RLT buffer之后RNase还会降解RNA吗? 书上写的是RLT
: buffer含有guanidine thiocyanate.
c*b
8 楼
h*k
9 楼
really good suggestions. thanks!
相关阅读
Bioinformatics and Genomics internProtein Ubiquitination protocolZT 南“科”一梦:不被教育部承认学位的中国大学位(图)版上有做protein array/proteomic assay的吗?被新华社记者称奇才,方舟子气愤不已K99 问题help!!! 关于邮寄aav (virus)Postdoctoral Research fellow in standford求建议,被中国实验员到老板那告了一状现在OPT还没有办H1B,要去欧洲待一个月。签证好办么?多年博后想回国找工作的(20-50万年薪)Nat Gen: 研究称两基因变异增加子宫内膜异位患病风险Nature review以后被拒rebattle的希望大吗?paper help也说一个grant申请的故事【转自biowsnv】有人做过Primary osteoblast的转染吗?刚看到一个postdoc职位工资好高呀?浅谈生物信息的职业发展规划一个未知蛋白的的纯化疑问各位牛人,求PAUP* 4.0的LINUX或MAC版本的程序