h*k
2 楼
使用的是tissue, 书上写的是不要超过30mg, 30mg看起来是个3mm的小方块。过量使用
tissue后效果会怎样?另外加了RLT buffer之后RNase还会降解RNA吗? 书上写的是RLT
buffer含有guanidine thiocyanate.
tissue后效果会怎样?另外加了RLT buffer之后RNase还会降解RNA吗? 书上写的是RLT
buffer含有guanidine thiocyanate.
s*y
4 楼
关于用量,没有那么严格的。多一点少一点组织无所谓,关键是你得确认所有组织都被
溶掉了,否则就一方面堵树脂,另外一方面带入过多污染物。
你可以多加点裂解液,多处理一回,然后视需要全部倒进一个小管或者分成几个
管。
RNase一般比较皮实,所以没人能保证RLT buffer一定能灭活,该注意的地方还是要注
意的。
RLT
【在 h****k 的大作中提到】
: 使用的是tissue, 书上写的是不要超过30mg, 30mg看起来是个3mm的小方块。过量使用
: tissue后效果会怎样?另外加了RLT buffer之后RNase还会降解RNA吗? 书上写的是RLT
: buffer含有guanidine thiocyanate.
溶掉了,否则就一方面堵树脂,另外一方面带入过多污染物。
你可以多加点裂解液,多处理一回,然后视需要全部倒进一个小管或者分成几个
管。
RNase一般比较皮实,所以没人能保证RLT buffer一定能灭活,该注意的地方还是要注
意的。
RLT
【在 h****k 的大作中提到】
: 使用的是tissue, 书上写的是不要超过30mg, 30mg看起来是个3mm的小方块。过量使用
: tissue后效果会怎样?另外加了RLT buffer之后RNase还会降解RNA吗? 书上写的是RLT
: buffer含有guanidine thiocyanate.
n*k
6 楼
more buffer and complete and fast lysis will do it...For a beginner, do
yourself a favor and NEVER try to save on buffer---the key is complete
lysis with enough buffer...then it can last fairly long, as long as it is fully lysed, no worry about RNase until the column step...if in doubt, use
RNAlater...it is fantastic...
RLT
【在 h****k 的大作中提到】
: 使用的是tissue, 书上写的是不要超过30mg, 30mg看起来是个3mm的小方块。过量使用
: tissue后效果会怎样?另外加了RLT buffer之后RNase还会降解RNA吗? 书上写的是RLT
: buffer含有guanidine thiocyanate.
yourself a favor and NEVER try to save on buffer---the key is complete
lysis with enough buffer...then it can last fairly long, as long as it is fully lysed, no worry about RNase until the column step...if in doubt, use
RNAlater...it is fantastic...
RLT
【在 h****k 的大作中提到】
: 使用的是tissue, 书上写的是不要超过30mg, 30mg看起来是个3mm的小方块。过量使用
: tissue后效果会怎样?另外加了RLT buffer之后RNase还会降解RNA吗? 书上写的是RLT
: buffer含有guanidine thiocyanate.
c*b
8 楼
h*k
9 楼
really good suggestions. thanks!
相关阅读
有没有做蛋白质结构功能预测的牛哥牛姐?问个发文章的问题问一个纯化蛋白的问题。ionic exchange column pools 浓缩后不经过dialysis直接上size exclusive column 是否会影响分离.关于bench的位置触目惊心:中国大陆 博士 硕士自杀一览 含海归 zz (转载)《Nature》: 研究称美科学家更倾向于造假Postdoc fellowship, Massachusetts, citizenship not required[公告] Biology 版的投票结果how hard is AHA/AICR postdoc fellowships to get?32D cell里面overexpress蛋白可以用adenovirus方法么?再问纯化蛋白的问题。size exclusive column 完全没有retension.Paper help with links, thank you!Roche Dumps RNAi, Sends Shock Waves Through Alnylam, TekmiraReference help. 2 Bao Zi, Thanks!求文章下载,一个包子酬谢。有在找Research associate 的吗?请问酶动力学是干什么的?Total RNA purification kitChinese Brain-Imaging Device a Suspected Copy of U.S. Device关于电转ES cell 的质粒纯化急!求一篇paper, 在线等,发包子