问个酵母质粒表达的弱智问题# Biology - 生物学
B*s
1 楼
一周，每天$200.
原先做过一些相关的课题，不过都2年多以前了。
有没有必要接受这个邀请去？担心看到proposal 都两眼一抹黑 怎么办
原先做过一些相关的课题，不过都2年多以前了。
有没有必要接受这个邀请去？担心看到proposal 都两眼一抹黑 怎么办
m*d
2 楼
从而XBMC魅力巨减
ATV都变得没啥用处了
ATV都变得没啥用处了
h*r
3 楼
酵母做的少，e. coli做得多点。所以就有问题了。用的基本上是商业化的质粒，pESC-
leu.
问题是看不出来翻译起始位点ATG，而且多种版本的manual上面不提这个问题.不像E.
coli的pET系列,要么在NdeI要么在NcoI.
我是不是把带有ATG的ORF放在多克隆位点就行了？我亚克隆的片段自己有终止密码子，
在此之前也有tag,所以不需要载体的tag。而且载体的tag正好在C端。当然转录方向还
是要看的。
包子伺候！
多谢啊！
leu.
问题是看不出来翻译起始位点ATG，而且多种版本的manual上面不提这个问题.不像E.
coli的pET系列,要么在NdeI要么在NcoI.
我是不是把带有ATG的ORF放在多克隆位点就行了？我亚克隆的片段自己有终止密码子，
在此之前也有tag,所以不需要载体的tag。而且载体的tag正好在C端。当然转录方向还
是要看的。
包子伺候！
多谢啊！
m*n
4 楼
怕什么. 就算两眼一抹黑, 也可以随大流说几句, 混个脸熟呗.
【在 B*****s 的大作中提到】
: 一周，每天$200.
: 原先做过一些相关的课题，不过都2年多以前了。
: 有没有必要接受这个邀请去？担心看到proposal 都两眼一抹黑 怎么办
【在 B*****s 的大作中提到】
: 一周，每天$200.
: 原先做过一些相关的课题，不过都2年多以前了。
: 有没有必要接受这个邀请去？担心看到proposal 都两眼一抹黑 怎么办
d*0
5 楼
要是没有icefilm， MU可能还不会被关。
T*i
6 楼
好像pESC 系列没有kozak sequence。你要克隆其他物种的ORF，最好引物加 yeast
kozak consensus。
要是成了，你得发包子啊。
pESC-
【在 h**********r 的大作中提到】
: 酵母做的少，e. coli做得多点。所以就有问题了。用的基本上是商业化的质粒，pESC-
: leu.
: 问题是看不出来翻译起始位点ATG，而且多种版本的manual上面不提这个问题.不像E.
: coli的pET系列,要么在NdeI要么在NcoI.
: 我是不是把带有ATG的ORF放在多克隆位点就行了？我亚克隆的片段自己有终止密码子，
: 在此之前也有tag,所以不需要载体的tag。而且载体的tag正好在C端。当然转录方向还
: 是要看的。
: 包子伺候！
: 多谢啊！
kozak consensus。
要是成了，你得发包子啊。
pESC-
【在 h**********r 的大作中提到】
: 酵母做的少，e. coli做得多点。所以就有问题了。用的基本上是商业化的质粒，pESC-
: leu.
: 问题是看不出来翻译起始位点ATG，而且多种版本的manual上面不提这个问题.不像E.
: coli的pET系列,要么在NdeI要么在NcoI.
: 我是不是把带有ATG的ORF放在多克隆位点就行了？我亚克隆的片段自己有终止密码子，
: 在此之前也有tag,所以不需要载体的tag。而且载体的tag正好在C端。当然转录方向还
: 是要看的。
: 包子伺候！
: 多谢啊！
B*s
7 楼
那就去混个脸熟吧
不用担心自己是水货，人家下次不找你了？
【在 m**n 的大作中提到】
: 怕什么. 就算两眼一抹黑, 也可以随大流说几句, 混个脸熟呗.
不用担心自己是水货，人家下次不找你了？
【在 m**n 的大作中提到】
: 怕什么. 就算两眼一抹黑, 也可以随大流说几句, 混个脸熟呗.
s*d
8 楼
还是pbo好啊
h*r
9 楼
多谢你的提醒！确实好像是没有kozak.
给你5个包子
你要是能贴个好用的kozak就更赞了
谢谢
给你5个包子
你要是能贴个好用的kozak就更赞了
谢谢
M*k
10 楼
你不去我去？？
m*d
11 楼
有可能
【在 d*****0 的大作中提到】
: 要是没有icefilm， MU可能还不会被关。
【在 d*****0 的大作中提到】
: 要是没有icefilm， MU可能还不会被关。
T*i
12 楼
好像是AACAAC(ATG)。反正与mammal不一样。不过你最好google一下。我也许会记错。
【在 h**********r 的大作中提到】
: 多谢你的提醒！确实好像是没有kozak.
: 给你5个包子
: 你要是能贴个好用的kozak就更赞了
: 谢谢
【在 h**********r 的大作中提到】
: 多谢你的提醒！确实好像是没有kozak.
: 给你5个包子
: 你要是能贴个好用的kozak就更赞了
: 谢谢
B*s
13 楼
其实如果我还是圈内的，我肯定就去了
但现在 自我感觉 是圈外的，所以有点担心
【在 M*****k 的大作中提到】
: 你不去我去？？
但现在 自我感觉 是圈外的，所以有点担心
【在 M*****k 的大作中提到】
: 你不去我去？？
m*d
14 楼
MU网站上面告示写的涉嫌洗钱是怎么回事
【在 d*****0 的大作中提到】
: 要是没有icefilm， MU可能还不会被关。
【在 d*****0 的大作中提到】
: 要是没有icefilm， MU可能还不会被关。
h*r
15 楼
每个人不一样，这是最郁闷的地方。thanks!
f*5
16 楼
脏钱投资或者走账了呗。
【在 m*d 的大作中提到】
: MU网站上面告示写的涉嫌洗钱是怎么回事
【在 m*d 的大作中提到】
: MU网站上面告示写的涉嫌洗钱是怎么回事
f*u
17 楼
原核的SD序列和ATG间的距离很重要，所以经常ATG必须插在某个酶切位点。
真核的Kozak本身包含ATG，所以用什么酶切无所谓了。
另外真核通常认为Kozak不是必需的，但是加上不会有坏处。
还有就是我记得ATG后面的G据说很重要。
【在 h**********r 的大作中提到】
: 每个人不一样，这是最郁闷的地方。thanks!
真核的Kozak本身包含ATG，所以用什么酶切无所谓了。
另外真核通常认为Kozak不是必需的，但是加上不会有坏处。
还有就是我记得ATG后面的G据说很重要。
【在 h**********r 的大作中提到】
: 每个人不一样，这是最郁闷的地方。thanks!
g*n
18 楼
用XBMC好几年了，一个月前才知道icefilms add-on，可见XBMC对于我
的魅力没受影响，:-)。
【在 m*d 的大作中提到】
: 从而XBMC魅力巨减
: ATV都变得没啥用处了
的魅力没受影响，:-)。
【在 m*d 的大作中提到】
: 从而XBMC魅力巨减
: ATV都变得没啥用处了
l*n
19 楼
我才开始用了一个礼拜啊，还好我习惯down下来看而不是在线，可惜紧赶慢赶3天才
down了100G就悲剧了
【在 m*d 的大作中提到】
: 从而XBMC魅力巨减
: ATV都变得没啥用处了
down了100G就悲剧了
【在 m*d 的大作中提到】
: 从而XBMC魅力巨减
: ATV都变得没啥用处了
g*i
20 楼
最近一直用多看，还凑合，国内的还挺全
美剧可以直接在apple tv上看啊，还挺便宜的
美剧可以直接在apple tv上看啊，还挺便宜的
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