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RNA extraction达人帮忙
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x*m
2
最近rna extraction很不顺,260/230ratio很低,bioanalyzer中的RIN很低。
用乙醇洗过以后,有白色的沉淀。用buffer和水溶解以后,还是可以看见白色沉淀,有
点透明。有人说可能是盐,但是用isoproponal 和乙醇洗了几遍,还是有。
avatar
T*i
3
你新来的?

【在 s*******e 的大作中提到】
: 您被举报的信息如下:
avatar
x*m
4
help plz
avatar
s*e
5
没有遇到过呀

【在 T*******i 的大作中提到】
: 你新来的?
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I*a
6
同病相怜啊,
我还是用试剂盒,
我得260/280样品在 2.03-2.05之间,260/230变化就比较大
avatar
T*i
7
所以说是新来的

【在 s*******e 的大作中提到】
: 没有遇到过呀
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s*s
8
我同样sample分两份,用机器自动抽,出来的260/230都可能有很大的区别

【在 I***a 的大作中提到】
: 同病相怜啊,
: 我还是用试剂盒,
: 我得260/280样品在 2.03-2.05之间,260/230变化就比较大

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A*e
9
属实

【在 s*******e 的大作中提到】
: 您被举报的信息如下:
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I*a
10
怎么处理260/230 ratio 底的样品?

【在 s******s 的大作中提到】
: 我同样sample分两份,用机器自动抽,出来的260/230都可能有很大的区别
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s*e
11
算了,算我自己白痴
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u*b
12
下游要做什么?我感觉提的浓度高时ratio就好,浓度低就很没准,但是好像没有影响
到下游实验。另外一般说是不要等沉淀全干再加水,否则不溶,还可以65度加热几分钟
帮助溶解。如果是盐的话就不知道了
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c*o
13
你说啥了?

【在 s*******e 的大作中提到】
: 您被举报的信息如下:
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k*o
14
用的什么方法抽RNA?TRIZOL?柱子?
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s*e
15
没啥!以后不会那么信任人类了

【在 c*******o 的大作中提到】
: 你说啥了?
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x*m
16
trizol
for RNA-seq. needs high integrity RNA
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c*o
17
淡定,你看我被跨版封了不还是活的好好的?
你要相信这个世界上还是有正常人的,不能因为mitbbs的黑暗就改变了你的人生观,哈
哈。

【在 s*******e 的大作中提到】
: 没啥!以后不会那么信任人类了
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p*p
18
260/280怎样?有可能是蛋白污染。萃取后吸水相的时候千万千万不能贪婪。

【在 x******m 的大作中提到】
: 最近rna extraction很不顺,260/230ratio很低,bioanalyzer中的RIN很低。
: 用乙醇洗过以后,有白色的沉淀。用buffer和水溶解以后,还是可以看见白色沉淀,有
: 点透明。有人说可能是盐,但是用isoproponal 和乙醇洗了几遍,还是有。

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T*e
19
对,他们地球人就是不可信
欢迎到我们火星来

【在 s*******e 的大作中提到】
: 没啥!以后不会那么信任人类了
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h*6
20
What is your sample type? Tissue? blood? Sample size in mg?
avatar
s*e
21
那种贴你也觉得pa那我只能说你没幽默感!

【在 A*******e 的大作中提到】
: 属实
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x*m
22
rat liver.
around 90 mg.

【在 h****6 的大作中提到】
: What is your sample type? Tissue? blood? Sample size in mg?
avatar
s*e
23
自己贴别人马甲就是灌水,别人贴他马甲就是不乐意,有句话怎么说的?己所不欲,勿
施于人。
avatar
x*m
24
最近rna extraction很不顺,260/230ratio很低,bioanalyzer中的RIN很低。
用乙醇洗过以后,有白色的沉淀。用buffer和水溶解以后,还是可以看见白色沉淀,有
点透明。有人说可能是盐,但是用isoproponal 和乙醇洗了几遍,还是有。
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h*e
25
sigh,让哥哥我来安慰安慰你

【在 s*******e 的大作中提到】
: 自己贴别人马甲就是灌水,别人贴他马甲就是不乐意,有句话怎么说的?己所不欲,勿
: 施于人。

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x*m
26
help plz
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c*o
27
他哪会有啥幽默感,呵呵。

【在 s*******e 的大作中提到】
: 那种贴你也觉得pa那我只能说你没幽默感!
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I*a
28
同病相怜啊,
我还是用试剂盒,
我得260/280样品在 2.03-2.05之间,260/230变化就比较大
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s*e
29
哎,还是家的感觉好呀!谢谢老大和小4
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s*s
30
我同样sample分两份,用机器自动抽,出来的260/230都可能有很大的区别

【在 I***a 的大作中提到】
: 同病相怜啊,
: 我还是用试剂盒,
: 我得260/280样品在 2.03-2.05之间,260/230变化就比较大

avatar
I*a
31
怎么处理260/230 ratio 底的样品?

【在 s******s 的大作中提到】
: 我同样sample分两份,用机器自动抽,出来的260/230都可能有很大的区别
avatar
u*b
32
下游要做什么?我感觉提的浓度高时ratio就好,浓度低就很没准,但是好像没有影响
到下游实验。另外一般说是不要等沉淀全干再加水,否则不溶,还可以65度加热几分钟
帮助溶解。如果是盐的话就不知道了
avatar
k*o
33
用的什么方法抽RNA?TRIZOL?柱子?
avatar
x*m
34
trizol
for RNA-seq. needs high integrity RNA
avatar
p*p
35
260/280怎样?有可能是蛋白污染。萃取后吸水相的时候千万千万不能贪婪。

【在 x******m 的大作中提到】
: 最近rna extraction很不顺,260/230ratio很低,bioanalyzer中的RIN很低。
: 用乙醇洗过以后,有白色的沉淀。用buffer和水溶解以后,还是可以看见白色沉淀,有
: 点透明。有人说可能是盐,但是用isoproponal 和乙醇洗了几遍,还是有。

avatar
h*6
36
What is your sample type? Tissue? blood? Sample size in mg?
avatar
x*m
37
rat liver.
around 90 mg.

【在 h****6 的大作中提到】
: What is your sample type? Tissue? blood? Sample size in mg?
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w*n
38
哈,我遇到过,提小鼠肝脏RNA,最后有一大坨白色的,溶不了。解决方法请按照TRIZOL
说明书严格操作。
1.裂解要充分,悬液要透明,看不到没溶的组织。
2.氯仿抽提离心时间要足够。
3.4度离心。
最后得到RNA应该是速溶的。

【在 x******m 的大作中提到】
: 最近rna extraction很不顺,260/230ratio很低,bioanalyzer中的RIN很低。
: 用乙醇洗过以后,有白色的沉淀。用buffer和水溶解以后,还是可以看见白色沉淀,有
: 点透明。有人说可能是盐,但是用isoproponal 和乙醇洗了几遍,还是有。

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I*a
39
2.氯仿抽提离心时间要足够。
-----一般多长时间啊?
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l*1
40
15 min 4℃
Both
[email protected]
//tools.invitrogen.com/Content/SFS/ProductNotes/F_071215_Trizol%20and%20Trizol%20LS.pdf
or
[email protected]
//www.nippongene.com/pdf/manual_english/ISOGEN_LS_2_091001.pdf

【在 I***a 的大作中提到】
: 2.氯仿抽提离心时间要足够。
: -----一般多长时间啊?

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