b*1
2 楼
想做点包子、花卷、肉龙之类的给孩子做早餐吃,以前只速冻过饺子,发面的怎么保存
?
?
w*y
3 楼
我现在正在尝试从zebrafish embryo的total RNA里面提取mRNA, 用的是invitrogen的
Dynabeads和他们的mRNA purification kit。 按照他们的protocol做完后跑胶发现里
面还是有挺多rRNA。上网搜了一下发现有的人建议连续做2次protocol里说的
purification。 请问大家有什么建议么?
我试了一下发现第1次纯化后获得了大概3.8%的total RNA。第二次以后有1.5%的total
RNA。我不太确定这样连续2次purification会不会损失太多mRNA。
Dynabeads和他们的mRNA purification kit。 按照他们的protocol做完后跑胶发现里
面还是有挺多rRNA。上网搜了一下发现有的人建议连续做2次protocol里说的
purification。 请问大家有什么建议么?
我试了一下发现第1次纯化后获得了大概3.8%的total RNA。第二次以后有1.5%的total
RNA。我不太确定这样连续2次purification会不会损失太多mRNA。
m*1
4 楼
100万,妥妥的。
n*k
6 楼
do u want mRNA only or you want rRNA depletion, for rRNA depletion, rRNA-
zero from epicentre is the way to go...with one around, I got virtually no
rRNA as determined by agilent Chip...based on the kit, the starting RNA is about 5ug and ends up with 150-
400ng RNA. So about 3-8%...that's what I got for all my 8 samples...
total
【在 w***y 的大作中提到】
: 我现在正在尝试从zebrafish embryo的total RNA里面提取mRNA, 用的是invitrogen的
: Dynabeads和他们的mRNA purification kit。 按照他们的protocol做完后跑胶发现里
: 面还是有挺多rRNA。上网搜了一下发现有的人建议连续做2次protocol里说的
: purification。 请问大家有什么建议么?
: 我试了一下发现第1次纯化后获得了大概3.8%的total RNA。第二次以后有1.5%的total
: RNA。我不太确定这样连续2次purification会不会损失太多mRNA。
zero from epicentre is the way to go...with one around, I got virtually no
rRNA as determined by agilent Chip...based on the kit, the starting RNA is about 5ug and ends up with 150-
400ng RNA. So about 3-8%...that's what I got for all my 8 samples...
total
【在 w***y 的大作中提到】
: 我现在正在尝试从zebrafish embryo的total RNA里面提取mRNA, 用的是invitrogen的
: Dynabeads和他们的mRNA purification kit。 按照他们的protocol做完后跑胶发现里
: 面还是有挺多rRNA。上网搜了一下发现有的人建议连续做2次protocol里说的
: purification。 请问大家有什么建议么?
: 我试了一下发现第1次纯化后获得了大概3.8%的total RNA。第二次以后有1.5%的total
: RNA。我不太确定这样连续2次purification会不会损失太多mRNA。
p*e
7 楼
百分之十五到二十比较合理
w*y
9 楼
谢谢, 我只想要mRNA,因为我要去做mRNA-seq, 所以要去掉rRNA。 我看了rRNA-zero
kit,发现这是用在Human/Mouse/Rat上的, 似乎不能确定是否能用在zebrafish上,在
网上搜到有人说在鱼里效果不怎么样。 请问你是用在鱼里么?另外这个kit会不会导致mRNA的丢失呢?
about 5ug and ends up with 150-
【在 n********k 的大作中提到】
: do u want mRNA only or you want rRNA depletion, for rRNA depletion, rRNA-
: zero from epicentre is the way to go...with one around, I got virtually no
: rRNA as determined by agilent Chip...based on the kit, the starting RNA is about 5ug and ends up with 150-
: 400ng RNA. So about 3-8%...that's what I got for all my 8 samples...
:
: total
kit,发现这是用在Human/Mouse/Rat上的, 似乎不能确定是否能用在zebrafish上,在
网上搜到有人说在鱼里效果不怎么样。 请问你是用在鱼里么?另外这个kit会不会导致mRNA的丢失呢?
about 5ug and ends up with 150-
【在 n********k 的大作中提到】
: do u want mRNA only or you want rRNA depletion, for rRNA depletion, rRNA-
: zero from epicentre is the way to go...with one around, I got virtually no
: rRNA as determined by agilent Chip...based on the kit, the starting RNA is about 5ug and ends up with 150-
: 400ng RNA. So about 3-8%...that's what I got for all my 8 samples...
:
: total
c*n
12 楼
Do the purification twice--from my own experience. The protocol/kit doesn't
work the way it claimed. You'll lose some mRNA each round. Anyone has good
alternative ways?
total
【在 w***y 的大作中提到】
: 我现在正在尝试从zebrafish embryo的total RNA里面提取mRNA, 用的是invitrogen的
: Dynabeads和他们的mRNA purification kit。 按照他们的protocol做完后跑胶发现里
: 面还是有挺多rRNA。上网搜了一下发现有的人建议连续做2次protocol里说的
: purification。 请问大家有什么建议么?
: 我试了一下发现第1次纯化后获得了大概3.8%的total RNA。第二次以后有1.5%的total
: RNA。我不太确定这样连续2次purification会不会损失太多mRNA。
work the way it claimed. You'll lose some mRNA each round. Anyone has good
alternative ways?
total
【在 w***y 的大作中提到】
: 我现在正在尝试从zebrafish embryo的total RNA里面提取mRNA, 用的是invitrogen的
: Dynabeads和他们的mRNA purification kit。 按照他们的protocol做完后跑胶发现里
: 面还是有挺多rRNA。上网搜了一下发现有的人建议连续做2次protocol里说的
: purification。 请问大家有什么建议么?
: 我试了一下发现第1次纯化后获得了大概3.8%的total RNA。第二次以后有1.5%的total
: RNA。我不太确定这样连续2次purification会不会损失太多mRNA。
l*1
15 楼
alternatively you can try Oligotex-dt30 mRNA purification kit for total RNA
sample:
Manual book:
//catalog.takara-bio.co.jp/PDFFiles/NTrap%20mRNA_j.pdf
Vender link:
//www.mn-net.com/Products/DNAandRNApurification/RNA/NucleoTrapmRNA/tabid/1328/language/en-
US/Default.aspx
Reference:
please go to
PubMed link:
//www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18678863
T Yabu - 2008 JBC
31 Oct 2008 – In zebrafish embryonic cells, the endogenous SMase enzyme was
.... using the Oligotex-dt30 mRNA purification kit (Takara Biomedicals,
Shiga, ...
zero
致mRNA的丢失呢?
【在 w***y 的大作中提到】
: 谢谢, 我只想要mRNA,因为我要去做mRNA-seq, 所以要去掉rRNA。 我看了rRNA-zero
: kit,发现这是用在Human/Mouse/Rat上的, 似乎不能确定是否能用在zebrafish上,在
: 网上搜到有人说在鱼里效果不怎么样。 请问你是用在鱼里么?另外这个kit会不会导致mRNA的丢失呢?
:
: about 5ug and ends up with 150-
sample:
Manual book:
//catalog.takara-bio.co.jp/PDFFiles/NTrap%20mRNA_j.pdf
Vender link:
//www.mn-net.com/Products/DNAandRNApurification/RNA/NucleoTrapmRNA/tabid/1328/language/en-
US/Default.aspx
Reference:
please go to
PubMed link:
//www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/18678863
T Yabu - 2008 JBC
31 Oct 2008 – In zebrafish embryonic cells, the endogenous SMase enzyme was
.... using the Oligotex-dt30 mRNA purification kit (Takara Biomedicals,
Shiga, ...
zero
致mRNA的丢失呢?
【在 w***y 的大作中提到】
: 谢谢, 我只想要mRNA,因为我要去做mRNA-seq, 所以要去掉rRNA。 我看了rRNA-zero
: kit,发现这是用在Human/Mouse/Rat上的, 似乎不能确定是否能用在zebrafish上,在
: 网上搜到有人说在鱼里效果不怎么样。 请问你是用在鱼里么?另外这个kit会不会导致mRNA的丢失呢?
:
: about 5ug and ends up with 150-
d*e
17 楼
要口感好的话还是得放水蒸, 时间来的及的话。
w*y
18 楼
Thanks, anybody tried Oligotex mRNA kit from Qiagen?
RNA
1328/language/en-
【在 l**********1 的大作中提到】
: alternatively you can try Oligotex-dt30 mRNA purification kit for total RNA
: sample:
: Manual book:
: //catalog.takara-bio.co.jp/PDFFiles/NTrap%20mRNA_j.pdf
: Vender link:
: //www.mn-net.com/Products/DNAandRNApurification/RNA/NucleoTrapmRNA/tabid/1328/language/en-
: US/Default.aspx
: Reference:
: please go to
: PubMed link:
RNA
1328/language/en-
【在 l**********1 的大作中提到】
: alternatively you can try Oligotex-dt30 mRNA purification kit for total RNA
: sample:
: Manual book:
: //catalog.takara-bio.co.jp/PDFFiles/NTrap%20mRNA_j.pdf
: Vender link:
: //www.mn-net.com/Products/DNAandRNApurification/RNA/NucleoTrapmRNA/tabid/1328/language/en-
: US/Default.aspx
: Reference:
: please go to
: PubMed link:
b*1
20 楼
试了下,复蒸,开水3分钟,口感不错,很受欢迎。
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