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有人愿意分享一下大蛋白如utrophin的转膜条件吗
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有人愿意分享一下大蛋白如utrophin的转膜条件吗# Biology - 生物学
s*y
1
拜读了老大的超常帖,太牛了!
硬指标牛就不说了;就光说在RFE20多天时间里,能整出这么多东西来,就是超牛啊!
佩服佩服!
在此,弱弱的问老大一句:ISI的年代分布功能和地图功能在哪儿啊?
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s*8
2
前进2个月
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l*x
3
以前western转膜最大的蛋白也就150KD左右,对于utrophin这种接近400KD的蛋白对转
膜有什么特殊要求吗?先谢过了
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t*6
4
http://www.researcherid.com/Workspace.action
摘自老大贴
"自俺老大的"超长经验总结及EB1 RFE letter"上贴后, 许多朋友问如何运用ISI的
地图功能. 首先您得先注册(当然得您的网络接口支持才行), 注册后可按如下步骤进行:
1. Opne the page of ISI web of Knowledge, click My ResarcherID on the top of
the page;
2.Sing in;
3.click My ResearcherID again, it will open another page;
4.At My Publicatoins, click Add;
5.Click Searach ISI Web of Knowledge under Option 1: ISI Web of Knowledge;
6.Enter your last name, first name and address, then click Search;
7.Select. Your paper;
8.C
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p*a
5
4月 or 2月
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a*x
6
用iblot, 10min
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S*9
7
mark
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c*s
8
托你吉言了,如果到了,我马上预约体检
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a*x
9
also soak the gel in 0.5% SDS buffer
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l*5
10
多谢TAOTAO

行:
of

【在 t******6 的大作中提到】
: http://www.researcherid.com/Workspace.action
: 摘自老大贴
: "自俺老大的"超长经验总结及EB1 RFE letter"上贴后, 许多朋友问如何运用ISI的
: 地图功能. 首先您得先注册(当然得您的网络接口支持才行), 注册后可按如下步骤进行:
: 1. Opne the page of ISI web of Knowledge, click My ResarcherID on the top of
: the page;
: 2.Sing in;
: 3.click My ResearcherID again, it will open another page;
: 4.At My Publicatoins, click Add;
: 5.Click Searach ISI Web of Knowledge under Option 1: ISI Web of Knowledge;

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B*h
11
靠普的话,我发你包子
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s*y
12
我对于特别大的蛋白,一般是30伏,转过夜

【在 l**x 的大作中提到】
: 以前western转膜最大的蛋白也就150KD左右,对于utrophin这种接近400KD的蛋白对转
: 膜有什么特殊要求吗?先谢过了

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g*x
13
mark!

行:
of

【在 t******6 的大作中提到】
: http://www.researcherid.com/Workspace.action
: 摘自老大贴
: "自俺老大的"超长经验总结及EB1 RFE letter"上贴后, 许多朋友问如何运用ISI的
: 地图功能. 首先您得先注册(当然得您的网络接口支持才行), 注册后可按如下步骤进行:
: 1. Opne the page of ISI web of Knowledge, click My ResarcherID on the top of
: the page;
: 2.Sing in;
: 3.click My ResearcherID again, it will open another page;
: 4.At My Publicatoins, click Add;
: 5.Click Searach ISI Web of Knowledge under Option 1: ISI Web of Knowledge;

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c*m
14
4个月!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!

【在 p*****a 的大作中提到】
: 4月 or 2月
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w*r
15
以前问过这个问题。记得有个哥们推荐半干式转膜,
具体不记得了
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s*8
16
What exhibit name can we give for this piece of evidence? It just has maps
but doesn't have any real numbers.
Thanks.

【在 g****x 的大作中提到】
: mark!
:
: 行:
: of

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f*c
17
co
不会等vb出来,大家都像泄了气的皮球?

【在 c*******s 的大作中提到】
: 托你吉言了,如果到了,我马上预约体检
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h*r
18
我也觉得SDS很重要,

【在 a*****x 的大作中提到】
: also soak the gel in 0.5% SDS buffer
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G*4
19
我也有一个相关的问题
这个map是很直观明了,而且把你的所有文章的引用国家都加一起了,这个我比较喜欢
但是问题是,这个map的那一页没有任何被引用文章的信息啊,IO不会怀疑我把其他人
的文章也加进来做引用国家的map了吧?
在ISI上面有个country/teritory的功能,你可以把自己每篇文章的引用国家列出来,这一页里也显示了你自己那篇文章的信息,问题就是不方便把你所有文章的引用国家加一起
不知道怎么搞好

【在 s******8 的大作中提到】
: What exhibit name can we give for this piece of evidence? It just has maps
: but doesn't have any real numbers.
: Thanks.

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a*a
20
4不吉利,6,8比较好。

!!

【在 c******m 的大作中提到】
: 4个月!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
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n*k
21
I am very curious about this one:
I thought iblot is essentially updated semi-dry method, or not? What make
it that efficient even with 400kd protein, thanks for clarification..
do you need add SDS to the buffer?

【在 a*****x 的大作中提到】
: 用iblot, 10min
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O*0
22
有没有人帮俺做个油灯图?在公司工作没有访问ISI等的权限。
Many many thanks.
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c*m
23
都行都行,只要能排到我就行!!!!!!

【在 a***a 的大作中提到】
: 4不吉利,6,8比较好。
:
: !!

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n*k
24
I C, it is still SDS...
what about your running conditions? and what percentage gel?

【在 a*****x 的大作中提到】
: also soak the gel in 0.5% SDS buffer
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l*5
25
你若不急的话, 可以将所有文章题目发给俺老大

【在 O***0 的大作中提到】
: 有没有人帮俺做个油灯图?在公司工作没有访问ISI等的权限。
: Many many thanks.

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p*a
26
5 OK?

【在 c******m 的大作中提到】
: 都行都行,只要能排到我就行!!!!!!
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a*x
27
3-8% Tris Acetate. Works very well for proteins as big as 400 to 500 kD.

【在 n********k 的大作中提到】
: I C, it is still SDS...
: what about your running conditions? and what percentage gel?

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t*6
28
老大超级nice!赞!
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c*m
29
可以可以,我如果排到了,给大家发包子!!!!!虽然我也没几个

【在 p*****a 的大作中提到】
: 5 OK?
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n*w
30
搭车好奇问一下,
running buffer里不是有1%的sds吗?
为啥还要在额外弄呢?
谢谢。

【在 a*****x 的大作中提到】
: also soak the gel in 0.5% SDS buffer
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G*4
31
顶一下!
老大能不能帮忙解释一下?多谢

,这一页里也显示了你自己那篇文章的信息,问题就是不方便把你所有文章的引用国家
加一起

【在 G****4 的大作中提到】
: 我也有一个相关的问题
: 这个map是很直观明了,而且把你的所有文章的引用国家都加一起了,这个我比较喜欢
: 但是问题是,这个map的那一页没有任何被引用文章的信息啊,IO不会怀疑我把其他人
: 的文章也加进来做引用国家的map了吧?
: 在ISI上面有个country/teritory的功能,你可以把自己每篇文章的引用国家列出来,这一页里也显示了你自己那篇文章的信息,问题就是不方便把你所有文章的引用国家加一起
: 不知道怎么搞好

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r*y
32
这时候还管吉利不吉利,能进4个月,我立马买一千个包子发发
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l*x
33
soak the gel in SDS, 是指跑完胶后把胶泡在SDS里吗,多长时间,有什么作用呢?

【在 l**x 的大作中提到】
: 以前western转膜最大的蛋白也就150KD左右,对于utrophin这种接近400KD的蛋白对转
: 膜有什么特殊要求吗?先谢过了

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a*t
34

赞老大

【在 l******5 的大作中提到】
: 你若不急的话, 可以将所有文章题目发给俺老大
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p*a
35
chi

【在 r********y 的大作中提到】
: 这时候还管吉利不吉利,能进4个月,我立马买一千个包子发发
avatar
l*x
36
我大部份的蛋白用这个条件转膜,原来utrophin也可以啊.
你一般大小的蛋白是用什么条件?谢谢sunnyday

【在 s******y 的大作中提到】
: 我对于特别大的蛋白,一般是30伏,转过夜
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x*6
37
可是ISI里面的citation没有google scholar查出来的多,那怎么办呢,可以把google
scholar查出来的也包括进去做个图吗?
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B*h
38

chi

【在 r********y 的大作中提到】
: 这时候还管吉利不吉利,能进4个月,我立马买一千个包子发发
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s*y
39
没有具体转过utrophin,不敢打包票,但是我们转poly-ubiquitinylated protein都是
用这个condition.
其他蛋白?其他蛋白50伏转三到五个小时。但有时候我们要偷懒的时候也会统统30伏转
过夜。

【在 l**x 的大作中提到】
: 我大部份的蛋白用这个条件转膜,原来utrophin也可以啊.
: 你一般大小的蛋白是用什么条件?谢谢sunnyday

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l*7
40
进2周
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Y*L
41
why not 8 months? to make me happy before real VB is out.
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l*e
42
前进5个月
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l*y
43
pai!
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a*1
44
8 months
:)

【在 Y**L 的大作中提到】
: why not 8 months? to make me happy before real VB is out.
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