磷酸化WB,二抗里能加奶粉么# Biology - 生物学L*t2012-07-14 07:071 楼第一次做磷酸化蛋白,一抗封闭用5% BSA没问题。但是二抗(CST 7074)要求稀释时加5%脱脂奶(尝试换成BSA/明胶的复方出了很多杂带), 这个对结果是否有影响?
I*y2012-07-14 07:072 楼二抗也用BSA,奶粉里可能有phosphatase【在 L*****t 的大作中提到】: 第一次做磷酸化蛋白,一抗封闭用5% BSA没问题。但是二抗(CST 7074)要求稀释时加: 5%脱脂奶(尝试换成BSA/明胶的复方出了很多杂带), 这个对结果是否有影响?
t*k2012-07-14 07:073 楼可以加牛奶。一抗如果是单抗一般使用BSA,多抗一般用脱脂牛奶,二抗统一用脱脂牛奶。【在 L*****t 的大作中提到】: 第一次做磷酸化蛋白,一抗封闭用5% BSA没问题。但是二抗(CST 7074)要求稀释时加: 5%脱脂奶(尝试换成BSA/明胶的复方出了很多杂带), 这个对结果是否有影响?
a*82012-07-14 07:074 楼most of the time, it is not a problem for me. I know some others also tryadding serum to block non-specific