qPCR amplication curve- does anyone see this before? - 未名空间MITBBS历史存档

qPCR amplication curve- does anyone see this before?# Biology - 生物学

m*n2012-09-21 07:09

1 楼

学校通讯报道我研究的文章被十几个网上媒体转载，到底算几个media report
我可以说是'meida report with a dozen news outlet?" (是NIW中证明achivement的）
还有最近搬家， i140的地址用还没有搬入的新家可以吗？可以租一个PObox作为地址吗？
以前i-140NIW悲剧过一次，这次i-140中不用提起吧？
"Has any immigrant visa petition been filed by or on behalf of this person"
我填NO, 对吗？
菜鸟初到宝地，恳求指教

c*i2012-09-21 07:09

2 楼

后院养茉莉花[night jasmine]N珠，本来盼着春天绿叶白花香气四溢，结果不知不觉
地几支刚种下的花芽被某种不知名生物啃的只剩下根须，剩下稍微大一点的逃过一劫却
也只剩下上面的绿叶还在。
百思不得其解 - 麻雀？松鼠？兔子？
想起数天前看到几只cardinal和几十只灰不溜秋叫不出名字的鸟类；想起前几天浇花
的时候惊起的数只松鼠和兔子……
于是我戴上太阳帽坐在Magnolia tree下开始守株待兔。
结果最意想不到的东西慢吞吞地出现了，悠闲地爬到我的茉莉花珠前毫不犹豫地啃了
一口又一口。我抓起这个东西，把它扔到旁边的草地，冲回家拿了手机就拍照。
嗨，难得我一个月前就看到这个东西，居然没有想到它老人家也会做采花贼，有道是
“神龟虽寿，色心不已”啊。你们说说长到这么大 - 比我巴掌还大的乌龟，会不会有
一百岁了？

e*p2012-09-21 07:09

3 楼

What's the problem?

c*e2012-09-21 07:09

4 楼

的）
yes you can. but if only one same article, hard to claim separately.
吗？
depends how long you will move to your new home
"
you should say YES i think

【在 m****n 的大作中提到】

: 学校通讯报道我研究的文章被十几个网上媒体转载，到底算几个media report
: 我可以说是'meida report with a dozen news outlet?" (是NIW中证明achivement的）
: 还有最近搬家， i140的地址用还没有搬入的新家可以吗？可以租一个PObox作为地址吗？
: 以前i-140NIW悲剧过一次，这次i-140中不用提起吧？
: "Has any immigrant visa petition been filed by or on behalf of this person"
: 我填NO, 对吗？
: 菜鸟初到宝地，恳求指教

R*C2012-09-21 07:09

5 楼

养着吧

w*r2012-09-21 07:09

6 楼

melting curve是啥样的？

m*n2012-09-21 07:09

7 楼

但好像四月斑竹说只有１４８５才算IMMIGRANT VISA.　如果说明的话，　还要把原来
的ＮＯＴＩＣＥ一起寄出去？

【在 c*****e 的大作中提到】

:
: 的）
: yes you can. but if only one same article, hard to claim separately.
: 吗？
: depends how long you will move to your new home
: "
: you should say YES i think

b*a2012-09-21 07:09

8 楼

哇，rp好啊，神龟啊！
你从哪里弄来的茉莉花啊？我们这边卖的茉莉都不香。我特喜欢那种小小朵的，但是很
香的茉莉。

【在 c********i 的大作中提到】

: 后院养茉莉花[night jasmine]N珠，本来盼着春天绿叶白花香气四溢，结果不知不觉
: 地几支刚种下的花芽被某种不知名生物啃的只剩下根须，剩下稍微大一点的逃过一劫却
: 也只剩下上面的绿叶还在。
: 百思不得其解 - 麻雀？松鼠？兔子？
: 想起数天前看到几只cardinal和几十只灰不溜秋叫不出名字的鸟类；想起前几天浇花
: 的时候惊起的数只松鼠和兔子……
: 于是我戴上太阳帽坐在Magnolia tree下开始守株待兔。
: 结果最意想不到的东西慢吞吞地出现了，悠闲地爬到我的茉莉花珠前毫不犹豫地啃了
: 一口又一口。我抓起这个东西，把它扔到旁边的草地，冲回家拿了手机就拍照。
: 嗨，难得我一个月前就看到这个东西，居然没有想到它老人家也会做采花贼，有道是

l*s2012-09-21 07:09

9 楼

Looks like too much DNA template to start with. Try to do 1:100 dilution.

c*e2012-09-21 07:09

10 楼

140表上专门一栏问你有没有以前申请过
其实有没有都不用顾虑
审查你材料的io不会考虑这点

【在 m****n 的大作中提到】

: 但好像四月斑竹说只有１４８５才算IMMIGRANT VISA.　如果说明的话，　还要把原来
: 的ＮＯＴＩＣＥ一起寄出去？

q*u2012-09-21 07:09

11 楼

家里来乌龟是福气

【在 c********i 的大作中提到】

: 后院养茉莉花[night jasmine]N珠，本来盼着春天绿叶白花香气四溢，结果不知不觉
: 地几支刚种下的花芽被某种不知名生物啃的只剩下根须，剩下稍微大一点的逃过一劫却
: 也只剩下上面的绿叶还在。
: 百思不得其解 - 麻雀？松鼠？兔子？
: 想起数天前看到几只cardinal和几十只灰不溜秋叫不出名字的鸟类；想起前几天浇花
: 的时候惊起的数只松鼠和兔子……
: 于是我戴上太阳帽坐在Magnolia tree下开始守株待兔。
: 结果最意想不到的东西慢吞吞地出现了，悠闲地爬到我的茉莉花珠前毫不犹豫地啃了
: 一口又一口。我抓起这个东西，把它扔到旁边的草地，冲回家拿了手机就拍照。
: 嗨，难得我一个月前就看到这个东西，居然没有想到它老人家也会做采花贼，有道是

e*p2012-09-21 07:09

12 楼

Will try dilution. M C looks like only one line

R*n2012-09-21 07:09

13 楼

的）

【在 m****n 的大作中提到】

: 学校通讯报道我研究的文章被十几个网上媒体转载，到底算几个media report
: 我可以说是'meida report with a dozen news outlet?" (是NIW中证明achivement的）
: 还有最近搬家， i140的地址用还没有搬入的新家可以吗？可以租一个PObox作为地址吗？
: 以前i-140NIW悲剧过一次，这次i-140中不用提起吧？
: "Has any immigrant visa petition been filed by or on behalf of this person"
: 我填NO, 对吗？
: 菜鸟初到宝地，恳求指教

b*a2012-09-21 07:09

14 楼

那个，再小声问，你这么长的指甲怎么种花，上网打字啊？

【在 c********i 的大作中提到】

: 后院养茉莉花[night jasmine]N珠，本来盼着春天绿叶白花香气四溢，结果不知不觉
: 地几支刚种下的花芽被某种不知名生物啃的只剩下根须，剩下稍微大一点的逃过一劫却
: 也只剩下上面的绿叶还在。
: 百思不得其解 - 麻雀？松鼠？兔子？
: 想起数天前看到几只cardinal和几十只灰不溜秋叫不出名字的鸟类；想起前几天浇花
: 的时候惊起的数只松鼠和兔子……
: 于是我戴上太阳帽坐在Magnolia tree下开始守株待兔。
: 结果最意想不到的东西慢吞吞地出现了，悠闲地爬到我的茉莉花珠前毫不犹豫地啃了
: 一口又一口。我抓起这个东西，把它扔到旁边的草地，冲回家拿了手机就拍照。
: 嗨，难得我一个月前就看到这个东西，居然没有想到它老人家也会做采花贼，有道是

e*p2012-09-21 07:09

15 楼

Will try dilution. M C looks like only one line

p*d2012-09-21 07:09

16 楼

神龜到家，紫氣東來～～～

h*e2012-09-21 07:09

17 楼

把Log换成Linear会给你更直观的图像。另外看一下Melting Curve， Tm 值怎么样。
你应该知道你每个Well里cDNA的浓度吧，我一般每个Well有50ng,40个Cycle，结果都很
好。

【在 e****p 的大作中提到】

: What's the problem?

p*d2012-09-21 07:09

18 楼

BTW，樓主手機的攝影功能很好！

Z*52012-09-21 07:09

19 楼

貌似扩增的最猛的那几条曲线有两个指数增长区。会不会是有超强的引物二聚体？你
检查一下引物看看。
一般用2ug total RNA反转录cDNA后，1:10稀释，取3ul做模板，内参GAPDH的Ct也就20
左右。按照模板差10倍，Ct值差3来看，你这个结果真的是不好解释啊，即使是过表达
也没见过这么高丰度的基因。

h*o2012-09-21 07:09

20 楼

LZ要交好运了~~~
还有，lZ的指甲好长，咋保养的？

l*s2012-09-21 07:09

21 楼

Could be rRNA.

20

【在 Z******5 的大作中提到】

: 貌似扩增的最猛的那几条曲线有两个指数增长区。会不会是有超强的引物二聚体？你
: 检查一下引物看看。
: 一般用2ug total RNA反转录cDNA后，1:10稀释，取3ul做模板，内参GAPDH的Ct也就20
: 左右。按照模板差10倍，Ct值差3来看，你这个结果真的是不好解释啊，即使是过表达
: 也没见过这么高丰度的基因。

s*d2012-09-21 07:09

22 楼

我想问一样的问题。
我们这里有些很香很香的树，现在开花，医院前后有很多，有点茉莉+桂花的香味，我
查了查植物志，怀疑是neroli。。。。

【在 b******a 的大作中提到】

: 那个，再小声问，你这么长的指甲怎么种花，上网打字啊？

e*p2012-09-21 07:09

23 楼

多谢大家，稀释以后就正常了。

w*y2012-09-21 07:09

24 楼

哇很好看的陆龟

l*12012-09-21 07:09

25 楼

Mark!

【在 e****p 的大作中提到】

: 多谢大家，稀释以后就正常了。

b*y2012-09-21 07:09

26 楼

haha
乌龟不在水里呆着，怎么跑到你家后院去了？
你家附近有池塘吗？

【在 c********i 的大作中提到】

: 后院养茉莉花[night jasmine]N珠，本来盼着春天绿叶白花香气四溢，结果不知不觉
: 地几支刚种下的花芽被某种不知名生物啃的只剩下根须，剩下稍微大一点的逃过一劫却
: 也只剩下上面的绿叶还在。
: 百思不得其解 - 麻雀？松鼠？兔子？
: 想起数天前看到几只cardinal和几十只灰不溜秋叫不出名字的鸟类；想起前几天浇花
: 的时候惊起的数只松鼠和兔子……
: 于是我戴上太阳帽坐在Magnolia tree下开始守株待兔。
: 结果最意想不到的东西慢吞吞地出现了，悠闲地爬到我的茉莉花珠前毫不犹豫地啃了
: 一口又一口。我抓起这个东西，把它扔到旁边的草地，冲回家拿了手机就拍照。
: 嗨，难得我一个月前就看到这个东西，居然没有想到它老人家也会做采花贼，有道是

b*t2012-09-21 07:09

27 楼

神龟阿！