关于腺病毒表达系统的问题。 - 未名空间MITBBS历史存档

关于腺病毒表达系统的问题。# Biology - 生物学

q*n2012-11-30 08:11

1 楼

买的short ribs, 放到干锅里，不放油，煎熟，抓上一大把切成大块的蒜，一些葱，
bbq 酱，与生菜一起吃。
盆盆虾
砂锅，炒香郫县豆瓣酱，蒜，葱姜，加水，开锅之后放入处理过的鲜笋，再开之后，放
入用盐，白胡椒，米酒，芡粉抓匀的虾，芹菜，再开锅就好。
凉拌茼蒿
院子里的茼蒿风张，老天～我已经连续好几天在吃茼蒿鸟......
茼蒿飞水，空干。
热锅，上油，放入葱花，蒜蓉，姜片，小火熬油，再加香醋，生抽，白胡椒，辣椒，一
点白糖，调匀，浇到茼蒿上，拌匀就好。
桂花银耳汤
砂锅，泡好的银耳，新疆大枣，枸杞，冰糖，中小火熬上3小时，吃的时候撒上桂花就
可以了。

D*n2012-11-30 08:11

2 楼

Non-profit H-1B Premium Process
真快! USCIS My Case Status现在仍查不到我的Case,不过没关系!
Sent date 12/09/10, Fedex
Received date 12/10/10
Notice date 12/12/10
Approval notice date 12/15/10
Approval notice received date 12/20/10

w*t2012-11-30 08:11

3 楼

问个腺病毒的问题，用的是PAD EASY 系统。将CDNA 克隆进PSHUTTLE后，Q-PCR 和WB都
可以检测到，但是包装病毒后，可以测到滴度。但是再感染细胞却检测不到表达，再取
少量病毒煮沸后PCR全长CDNA，也检测不到。但是的确有病毒，不知道问题再那里？特
地请教有经验的大侠，非常感谢。

j*u2012-11-30 08:11

4 楼

nice

【在 q**********n 的大作中提到】

: 买的short ribs, 放到干锅里，不放油，煎熟，抓上一大把切成大块的蒜，一些葱，
: bbq 酱，与生菜一起吃。
: 盆盆虾
: 砂锅，炒香郫县豆瓣酱，蒜，葱姜，加水，开锅之后放入处理过的鲜笋，再开之后，放
: 入用盐，白胡椒，米酒，芡粉抓匀的虾，芹菜，再开锅就好。
: 凉拌茼蒿
: 院子里的茼蒿风张，老天～我已经连续好几天在吃茼蒿鸟......
: 茼蒿飞水，空干。
: 热锅，上油，放入葱花，蒜蓉，姜片，小火熬油，再加香醋，生抽，白胡椒，辣椒，一
: 点白糖，调匀，浇到茼蒿上，拌匀就好。

Q*r2012-11-30 08:11

5 楼

我8号file的，现在都没有receipt，太不公平了
也是premium阿

【在 D***n 的大作中提到】

: Non-profit H-1B Premium Process
: 真快! USCIS My Case Status现在仍查不到我的Case,不过没关系!
: Sent date 12/09/10, Fedex
: Received date 12/10/10
: Notice date 12/12/10
: Approval notice date 12/15/10
: Approval notice received date 12/20/10

j*x2012-11-30 08:11

6 楼

说明你的目的基因可能就没重组到pAD那个大质粒里面去。PCR检测一下你重组之后的那
个需要线性化的质粒，看看片段在不在

【在 w*****t 的大作中提到】

: 问个腺病毒的问题，用的是PAD EASY 系统。将CDNA 克隆进PSHUTTLE后，Q-PCR 和WB都
: 可以检测到，但是包装病毒后，可以测到滴度。但是再感染细胞却检测不到表达，再取
: 少量病毒煮沸后PCR全长CDNA，也检测不到。但是的确有病毒，不知道问题再那里？特
: 地请教有经验的大侠，非常感谢。

b*t2012-11-30 08:11

7 楼

秋水是真心放弃减肥了吗 lol

【在 q**********n 的大作中提到】

: 买的short ribs, 放到干锅里，不放油，煎熟，抓上一大把切成大块的蒜，一些葱，
: bbq 酱，与生菜一起吃。
: 盆盆虾
: 砂锅，炒香郫县豆瓣酱，蒜，葱姜，加水，开锅之后放入处理过的鲜笋，再开之后，放
: 入用盐，白胡椒，米酒，芡粉抓匀的虾，芹菜，再开锅就好。
: 凉拌茼蒿
: 院子里的茼蒿风张，老天～我已经连续好几天在吃茼蒿鸟......
: 茼蒿飞水，空干。
: 热锅，上油，放入葱花，蒜蓉，姜片，小火熬油，再加香醋，生抽，白胡椒，辣椒，一
: 点白糖，调匀，浇到茼蒿上，拌匀就好。

p*j2012-11-30 08:11

8 楼

non-profit

w*r2012-11-30 08:11

9 楼

用的什么感染条件？
我们通常用293A扩增腺病毒，
等293A全漂起来或者全都变圆之后，把细胞和medium都收起来，-80/37水浴冻融三次，
离心去掉293A细胞碎片后，取适量（取决于病毒的滴度）上清直接感染细胞（不要再掺
medium），3-6个小时候换回正常的培养细胞的medium就可以了。

p*t2012-11-30 08:11

10 楼

最近我特喜欢在凉拌菜里加点炒熟炒香的猪肉末，当味精用，非常好吃。

【在 q**********n 的大作中提到】

: 买的short ribs, 放到干锅里，不放油，煎熟，抓上一大把切成大块的蒜，一些葱，
: bbq 酱，与生菜一起吃。
: 盆盆虾
: 砂锅，炒香郫县豆瓣酱，蒜，葱姜，加水，开锅之后放入处理过的鲜笋，再开之后，放
: 入用盐，白胡椒，米酒，芡粉抓匀的虾，芹菜，再开锅就好。
: 凉拌茼蒿
: 院子里的茼蒿风张，老天～我已经连续好几天在吃茼蒿鸟......
: 茼蒿飞水，空干。
: 热锅，上油，放入葱花，蒜蓉，姜片，小火熬油，再加香醋，生抽，白胡椒，辣椒，一
: 点白糖，调匀，浇到茼蒿上，拌匀就好。

q*n2012-11-30 08:11

11 楼

就算我不吃，还有一大家人呐...
再说，真的很馋哎....
少吃点～
:-)

【在 b*******t 的大作中提到】

: 秋水是真心放弃减肥了吗 lol

q*n2012-11-30 08:11

12 楼

哎～这倒是好主意，下次试试～

【在 p*********t 的大作中提到】

: 最近我特喜欢在凉拌菜里加点炒熟炒香的猪肉末，当味精用，非常好吃。

a*h2012-11-30 08:11

13 楼

我还没吃饭呢。。。。。。

q*n2012-11-30 08:11

14 楼

啥时候带着宝宝来我家吃饭？

【在 a****h 的大作中提到】

: 我还没吃饭呢。。。。。。

a*h2012-11-30 08:11

15 楼

哇，秋水太好拉。我估计我新家应该离你很近。
到时候你就该烦我拉。哈哈哈

【在 q**********n 的大作中提到】

: 啥时候带着宝宝来我家吃饭？

h*r2012-11-30 08:11

16 楼

想吃茼蒿

【在 q**********n 的大作中提到】

: 买的short ribs, 放到干锅里，不放油，煎熟，抓上一大把切成大块的蒜，一些葱，
: bbq 酱，与生菜一起吃。
: 盆盆虾
: 砂锅，炒香郫县豆瓣酱，蒜，葱姜，加水，开锅之后放入处理过的鲜笋，再开之后，放
: 入用盐，白胡椒，米酒，芡粉抓匀的虾，芹菜，再开锅就好。
: 凉拌茼蒿
: 院子里的茼蒿风张，老天～我已经连续好几天在吃茼蒿鸟......
: 茼蒿飞水，空干。
: 热锅，上油，放入葱花，蒜蓉，姜片，小火熬油，再加香醋，生抽，白胡椒，辣椒，一
: 点白糖，调匀，浇到茼蒿上，拌匀就好。

b*n2012-11-30 08:11

17 楼

我好想吃盆盆虾～～～

b*s2012-11-30 08:11

18 楼

果然又是出自秋水之手啊！
想不到茼蒿也能凉拌，赞！！

【在 q**********n 的大作中提到】

: 买的short ribs, 放到干锅里，不放油，煎熟，抓上一大把切成大块的蒜，一些葱，
: bbq 酱，与生菜一起吃。
: 盆盆虾
: 砂锅，炒香郫县豆瓣酱，蒜，葱姜，加水，开锅之后放入处理过的鲜笋，再开之后，放
: 入用盐，白胡椒，米酒，芡粉抓匀的虾，芹菜，再开锅就好。
: 凉拌茼蒿
: 院子里的茼蒿风张，老天～我已经连续好几天在吃茼蒿鸟......
: 茼蒿飞水，空干。
: 热锅，上油，放入葱花，蒜蓉，姜片，小火熬油，再加香醋，生抽，白胡椒，辣椒，一
: 点白糖，调匀，浇到茼蒿上，拌匀就好。

c*22012-11-30 08:11

19 楼

zan!

a*n2012-11-30 08:11

20 楼

请问鲜笋和桂花哪里有卖啊？谢谢！

买的short ribs, 放到干锅里，不放油，煎熟，抓上一大把切成大块的蒜，一些葱，
bbq 酱，与生菜一起吃。盆盆虾砂锅，炒香郫县豆瓣酱，蒜，葱姜，加水，开锅之后
放入处理过........
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【在 q**********n 的大作中提到】

: 买的short ribs, 放到干锅里，不放油，煎熟，抓上一大把切成大块的蒜，一些葱，
: bbq 酱，与生菜一起吃。
: 盆盆虾
: 砂锅，炒香郫县豆瓣酱，蒜，葱姜，加水，开锅之后放入处理过的鲜笋，再开之后，放
: 入用盐，白胡椒，米酒，芡粉抓匀的虾，芹菜，再开锅就好。
: 凉拌茼蒿
: 院子里的茼蒿风张，老天～我已经连续好几天在吃茼蒿鸟......
: 茼蒿飞水，空干。
: 热锅，上油，放入葱花，蒜蓉，姜片，小火熬油，再加香醋，生抽，白胡椒，辣椒，一
: 点白糖，调匀，浇到茼蒿上，拌匀就好。

q*n2012-11-30 08:11

21 楼

鲜笋是朋友自己挖的，送给我们尝鲜的～
桂花是中国超市买的。

【在 a******n 的大作中提到】

: 请问鲜笋和桂花哪里有卖啊？谢谢！
:
: 买的short ribs, 放到干锅里，不放油，煎熟，抓上一大把切成大块的蒜，一些葱，
: bbq 酱，与生菜一起吃。盆盆虾砂锅，炒香郫县豆瓣酱，蒜，葱姜，加水，开锅之后
: 放入处理过........
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