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求助：跑琼脂糖胶，条带漂移。

求助：跑琼脂糖胶，条带漂移。# Biology - 生物学

a*t2013-07-13 07:07

1 楼

上次是签的H4,和H1一起申请485，拿到EAD/AP后回国了。中间持H4签证又回来一次。
现在H4签证过期了，AP明年3月过期，请问如果明年2月持AP入境，会有问题吗？
主要是今年3月拿到AP后就回国了，不知道是否有问题？
另外，renew的话，需要H4在美国吗？
谢谢大家

s*n2013-07-13 07:07

2 楼

http://mv.6park.com/index.php?app=forum&act=threadview&tid=163281

e*o2013-07-13 07:07

3 楼

最近跑DNA胶很邪门，首先是基因组DNA的条带大小在不同的胶里跑得不一样。做3C-
library，所以在提取的过程中没有除去蛋白质，用裂解液裂解细胞后，离心收集细胞
核，再分别用SDS和Triton X-100裂解细胞核后跑的琼脂糖胶。
其中2，3泳道是刚提取完时跑的电泳条带，1，4孔道是将同样的样品放置6个小时左右
后跑的电泳条带，结果条带大小就发生了改变，有15000bp左右减小到了几百bp，而且
每次跑胶，电泳条带的大小都不固定，大多都只有几百bp，和基因组大小不符！
然后是回收cDNA500-700bp的带加adapter,扩PCR也出现这种飘移现象。到别的lab也试
了，还是这样。跑别的特异PCR扩增和酶切质粒都是好好地。真是邪门了。
请大家分析下是什么原因造成的。谢谢！

i*42013-07-13 07:07

4 楼

No problem
Yes

【在 a****t 的大作中提到】

: 上次是签的H4,和H1一起申请485，拿到EAD/AP后回国了。中间持H4签证又回来一次。
: 现在H4签证过期了，AP明年3月过期，请问如果明年2月持AP入境，会有问题吗？
: 主要是今年3月拿到AP后就回国了，不知道是否有问题？
: 另外，renew的话，需要H4在美国吗？
: 谢谢大家

s*n2013-07-13 07:07

5 楼

孝安的演记爆棚

e*o2013-07-13 07:07

6 楼

没有遇到过这种情况吗？

s*n2013-07-13 07:07

7 楼

袁农不是个好东西，韩冰被劫，首先关心是否还是处女

s*92013-07-13 07:07

8 楼

ladder开起来很好，排除了胶的问题，所以可能是样品的问题。可能性有1）样品中大
量的离子影响电场（比如出现明显的弯月带）；2）有离子结合在DNA上。简单方法就是
用pcr purification kit处理一下再跑胶。

s*n2013-07-13 07:07

9 楼

宫庶和延蛾谈起了恋爱，哈哈

w*n2013-07-13 07:07

10 楼

【在 e***o 的大作中提到】

: 最近跑DNA胶很邪门，首先是基因组DNA的条带大小在不同的胶里跑得不一样。做3C-
: library，所以在提取的过程中没有除去蛋白质，用裂解液裂解细胞后，离心收集细胞
: 核，再分别用SDS和Triton X-100裂解细胞核后跑的琼脂糖胶。
: 其中2，3泳道是刚提取完时跑的电泳条带，1，4孔道是将同样的样品放置6个小时左右
: 后跑的电泳条带，结果条带大小就发生了改变，有15000bp左右减小到了几百bp，而且
: 每次跑胶，电泳条带的大小都不固定，大多都只有几百bp，和基因组大小不符！
: 然后是回收cDNA500-700bp的带加adapter,扩PCR也出现这种飘移现象。到别的lab也试
: 了，还是这样。跑别的特异PCR扩增和酶切质粒都是好好地。真是邪门了。
: 请大家分析下是什么原因造成的。谢谢！

s*n2013-07-13 07:07

11 楼

宫庶这个演员有点不好看

e*o2013-07-13 07:07

12 楼

谢谢给位的建议！wakesman的意思是？

s*n2013-07-13 07:07

13 楼

第28集泄露版，柳云龙发现了影子