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大家看看这个电泳图正常吗
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m*s
2
首先还是老生重谈:
奥斯卡到底要的是什么样的影片?
在很多人看来一个漫无边际的话题,实际上不是,纵观历年来的奥斯卡获奖电影,总还
是有一个大方向是可以去摸索的。
一类是政治正确,近些年来愈发占据上风,代表作品:
《为奴十二年》(2013)《普通女人》(2017)
此类作品导演技巧、电影演技大多在水准线之上,但是远还没有好到可以获奖的地步,
但由于题材讨巧,例如《为奴十二年》,讲的是一个寻寻常常的普通黑人变成黑奴,然
后翻身的故事,天然便占着政治正确这四个字的光辉,再例如《普通女人》——变性女
人政治正不正确?更可怕的是变性女人拿起法律武器去追寻自己合法权利。
得了,政治正确×3。这奖您老且先拿走,小的家小业小,可不敢和人家民意对着干。
言归正传,我不是药神政治正不正确?
正确。
但是是属于东亚的政治正确,显然不符合美国人的观点,故而在题材上并没有加分,比
如韩国拍过很多类似的电影:《恐怖直播》、《辩护人》,《素媛》、《熔炉》,但韩
国至今没有一部电影获得过奥斯卡提名。
哪怕一部。
西方惯来讽刺政府讽刺的多,花样层出不穷,直白的如《v字仇杀队》,委婉的如《发
条橙》,讽刺到如今,都嫌腻了,好比一个成天吃大鱼大肉的人,再给他端上一盆红烧
肉,管你烧的再怎么滑而不腻,再怎么喷香四溢,耐不住人家看见了就想吐——没辙。
二来是故事拍的好。
故事拍的好有很多种,比如说故事写的好(编剧厉害)、故事讲的好(导演牛逼)、故
事演的好(演技在线),无论哪一种,足够拔尖就行。
可如今电影拍了百多年,拍过的电影数以百万计,没点让人眼前一亮的手法,是很难从
中杀出的。
我们回过头来看看《我不是药神》。
剧本不谈,第一点已经提到过,平淡无奇,而从导演手法上来看,这片子属于最最典型
的线性叙事电影,即时间地点人物都是按着时间线发展的,没有插叙,没有倒叙,更没
有如同《恐怖游轮》、《低俗小说》一般的环形叙事,这种线性叙事方法的好处显而易
见——观众看着不吃力,不烧脑,但人家奥斯卡评委少说看了上万部电影,对于观众不
吃力不烧脑的电影,在他们眼里就和幼儿动画没什么区别。
就像你不会把奖项颁给喜羊羊一样,奥斯卡评委也不会把奖项颁给《我不是药神》。
电影演员的演技怎么样?
不错。但只是不错。商业化电影有一个通病,即过于在乎观众的感受而舍弃了艺术上的
追求。我不是药神本质上是一部商业电影,当商业利益与艺术追求起到矛盾时,必然是
选择商业利益而不是艺术,所以电影充斥了大量只为博人一笑的片段,演员的演技在这
些片段时显得尤为浮夸。
邪不压正我也看了,显然是一部具有姜文风格、但却算不上特别优质的电影,导演风格
一如既往。即便遮住导演名字,一看这电影就知道只能是姜文拍的出来。编剧天马行空
,演员演技也还行,但依然存在些许浮夸,在得奖概率上,要比我不是药神高许多,但
冲奥,哪怕只是提名,想来还是有那么些许难度。
今年大概率又是陪跑了。
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D*A
3
用GPS自带的吸在挡风玻璃上好像有点挡着视线了。
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n*3
4
近来克隆了一个3kb片段到31kb质粒内,然后做单切如lane 1 和双切如lane 2,lane 3
为2切后回收31kb 的大片段,ladder 最大为12kb。 胶0.8%
正常吗,问题在哪里?
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c*x
6
ebay 搜搜看
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s*s
7
啥不正常?

3

【在 n****3 的大作中提到】
: 近来克隆了一个3kb片段到31kb质粒内,然后做单切如lane 1 和双切如lane 2,lane 3
: 为2切后回收31kb 的大片段,ladder 最大为12kb。 胶0.8%
: 正常吗,问题在哪里?

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p*h
8
http://lastcall.dailysteals.com/

【在 D********A 的大作中提到】
: 用GPS自带的吸在挡风玻璃上好像有点挡着视线了。
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n*3
9
大片段锯齿状,而且拉的比较宽,不象ladder清晰的带
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s*s
10
你load这么多,当然这样了。

【在 n****3 的大作中提到】
: 大片段锯齿状,而且拉的比较宽,不象ladder清晰的带
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n*3
11
也就几十 纳克,莫非还搞个脉冲场电泳?
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c*r
12
你确定只有几十纳克?最小那个条带如果只有几十纳克我信。如果最下边的的小片段是
3k,有几十纳克的话,31k的质粒上样有几百纳克了吧。

【在 n****3 的大作中提到】
: 也就几十 纳克,莫非还搞个脉冲场电泳?
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s*s
13
//nod
那个ladder至少每条50,3k不到的条带100,31k的说不定都有1ug了

【在 c*********r 的大作中提到】
: 你确定只有几十纳克?最小那个条带如果只有几十纳克我信。如果最下边的的小片段是
: 3k,有几十纳克的话,31k的质粒上样有几百纳克了吧。

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s*m
14
你样品的buffer是什么?
会不会是盐太高了?

3

【在 n****3 的大作中提到】
: 近来克隆了一个3kb片段到31kb质粒内,然后做单切如lane 1 和双切如lane 2,lane 3
: 为2切后回收31kb 的大片段,ladder 最大为12kb。 胶0.8%
: 正常吗,问题在哪里?

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n*3
15
看来可能是bufferr,lane 1 and lane 2 are 1x digestion buffer, lane 3 is
microinjection buffer with salt
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q*8
16
上样太多了吧。。。我做切胶回收的时候都是这个样子的。。。。。。
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n*3
17
公司认为smear是降解的dna, 让我重新提供用于注射的dna,我再调整一下上样量
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t*t
18
microinjection 你用的哪个公司?
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k*n
19
DNA load 太多了。。。。。
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n*3
20
稀释后效果好多了,没有降解。我在scripps,老板最后决定在所里的transgenic core
做,主要原因是生出来的是b6背景,2250刀一次,不保证是否能得到转基因动物,因为
我的片段大
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