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请教RNA抽提问题,谢谢!
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请教RNA抽提问题,谢谢!# Biology - 生物学
h*2
1
接到移民局通知,说是指纹不能被FBI识别,要求第二次去打指纹。
不知这种情况意味着什么意思?有人有经验么?
如果第二次指纹还是不能通过。听说需要提供无犯罪公证。
请问这个公证是怎么交给移民局?会收到RFE要求无犯罪公证吗?
如果前几年在中国,是否需要提供中国的无犯罪公证?
这个中国的无犯罪公证是到哪里开?如果人不在中国,可以请亲友代办吗?
问题很多,心里很乱,请帮助!
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H*l
2
imac刚发布了个,有别家单独的显示器卖么?
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z*8
3
从微量培养细胞中抽提RNA,没有问题,RIN大于9.2
从微量病人骨髓分选细胞中抽提,少量介于8-9,大多3-8,质量不足以继续测序(for
RNAseq)。
Nanodrop测的浓度都介于20-几百ng/ul,现在浓度不是我最大的问题,RNA降解造成的
质量问题无法解决。
尝试了qiagen的两个kit: Allprep DNA/RNA/Protein 80004;Allprep DNA/RNA 80204
,两个没有大的区别,都是从培养细胞中没问题,抽提病人样品就不行。在犹豫是不是
只能用RNAeasy kit?
问了好几个qiagen的tech support,也分别尝试了他们的方法,均不能提高RNA质量
请教哪位达人有私人珍藏经验可以分享一下吗,多谢了!
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j*e
4
it means the photo of your finger print is not clear
just take the picture again
give me baozi

【在 h**********2 的大作中提到】
: 接到移民局通知,说是指纹不能被FBI识别,要求第二次去打指纹。
: 不知这种情况意味着什么意思?有人有经验么?
: 如果第二次指纹还是不能通过。听说需要提供无犯罪公证。
: 请问这个公证是怎么交给移民局?会收到RFE要求无犯罪公证吗?
: 如果前几年在中国,是否需要提供中国的无犯罪公证?
: 这个中国的无犯罪公证是到哪里开?如果人不在中国,可以请亲友代办吗?
: 问题很多,心里很乱,请帮助!

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C*e
6
试试Ambion的kit?
还有上RNAlater

for
80204

【在 z**********8 的大作中提到】
: 从微量培养细胞中抽提RNA,没有问题,RIN大于9.2
: 从微量病人骨髓分选细胞中抽提,少量介于8-9,大多3-8,质量不足以继续测序(for
: RNAseq)。
: Nanodrop测的浓度都介于20-几百ng/ul,现在浓度不是我最大的问题,RNA降解造成的
: 质量问题无法解决。
: 尝试了qiagen的两个kit: Allprep DNA/RNA/Protein 80004;Allprep DNA/RNA 80204
: ,两个没有大的区别,都是从培养细胞中没问题,抽提病人样品就不行。在犹豫是不是
: 只能用RNAeasy kit?
: 问了好几个qiagen的tech support,也分别尝试了他们的方法,均不能提高RNA质量
: 请教哪位达人有私人珍藏经验可以分享一下吗,多谢了!

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a*h
7
现在好好保护你的手,不要洗碗,擦corn huskers lotion.
如果第二次还是不通过,你会被要求收集最近5年之内的无犯罪公正,这个可以到当地
警察局办理,很简单

【在 h**********2 的大作中提到】
: 接到移民局通知,说是指纹不能被FBI识别,要求第二次去打指纹。
: 不知这种情况意味着什么意思?有人有经验么?
: 如果第二次指纹还是不能通过。听说需要提供无犯罪公证。
: 请问这个公证是怎么交给移民局?会收到RFE要求无犯罪公证吗?
: 如果前几年在中国,是否需要提供中国的无犯罪公证?
: 这个中国的无犯罪公证是到哪里开?如果人不在中国,可以请亲友代办吗?
: 问题很多,心里很乱,请帮助!

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s*s
9
我们少量sample一般是用roche的MagNA做,这个最棒,但是要有机器。
另外,有没有可能你的细胞RNA在抽提前就是降解了的。

for
80204

【在 z**********8 的大作中提到】
: 从微量培养细胞中抽提RNA,没有问题,RIN大于9.2
: 从微量病人骨髓分选细胞中抽提,少量介于8-9,大多3-8,质量不足以继续测序(for
: RNAseq)。
: Nanodrop测的浓度都介于20-几百ng/ul,现在浓度不是我最大的问题,RNA降解造成的
: 质量问题无法解决。
: 尝试了qiagen的两个kit: Allprep DNA/RNA/Protein 80004;Allprep DNA/RNA 80204
: ,两个没有大的区别,都是从培养细胞中没问题,抽提病人样品就不行。在犹豫是不是
: 只能用RNAeasy kit?
: 问了好几个qiagen的tech support,也分别尝试了他们的方法,均不能提高RNA质量
: 请教哪位达人有私人珍藏经验可以分享一下吗,多谢了!

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z*e
10
估计it打算当独家卖的

【在 H****l 的大作中提到】
: 戴尔有病吧,
: Word is that this monitor will hit the shelves by Christmas, with a $2500
: price tag.

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l*u
11
这个机器美国卖多少钱?

【在 s******s 的大作中提到】
: 我们少量sample一般是用roche的MagNA做,这个最棒,但是要有机器。
: 另外,有没有可能你的细胞RNA在抽提前就是降解了的。
:
: for
: 80204

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j*g
12
看来还是imac良心价

【在 H****l 的大作中提到】
: 戴尔有病吧,
: Word is that this monitor will hit the shelves by Christmas, with a $2500
: price tag.

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s*s
13
价格不知道。你可以看看facility里面有没有

【在 l******u 的大作中提到】
: 这个机器美国卖多少钱?
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r*i
14
都是奸商
DELL其实更良心点,标价2499,到时候ebay上1k一下就能有
4k的那个UP2414Q,标1199,ebay上Brand new的400块不要太多

【在 j******g 的大作中提到】
: 看来还是imac良心价
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z*8
15
谢谢各位回复!
问过我们的facility,没有MagNA,老板不可能现在去买 :(
细胞离心后的沉淀已经冻存在-80,当时没有加lysis buffer或RNAlater,现在只能抽
提RNA前立即放在干冰上加RLT buffer。
有人有qiagen kit的经验吗?是不是用RNAeasy只抽RNA会比抽DNA和RNA更好?
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j*g
16
4k的up3214q呢?你能在eBay多少拿下。

【在 r***i 的大作中提到】
: 都是奸商
: DELL其实更良心点,标价2499,到时候ebay上1k一下就能有
: 4k的那个UP2414Q,标1199,ebay上Brand new的400块不要太多

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l*u
17
骨髓细胞的RNA质量本来就不高,我们实验室从老鼠骨髓抽的都不高,何况病人样本。
Qiagen只抽RNA的kit质量更好,买个RNeasy Micro Kit

【在 z**********8 的大作中提到】
: 谢谢各位回复!
: 问过我们的facility,没有MagNA,老板不可能现在去买 :(
: 细胞离心后的沉淀已经冻存在-80,当时没有加lysis buffer或RNAlater,现在只能抽
: 提RNA前立即放在干冰上加RLT buffer。
: 有人有qiagen kit的经验吗?是不是用RNAeasy只抽RNA会比抽DNA和RNA更好?

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G*h
18
这比 55 寸的 4k 电视强在哪?

【在 j******g 的大作中提到】
: 看来还是imac良心价
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z*8
19
你加bme在RLT里面了没有?

【在 z**********8 的大作中提到】
: 谢谢各位回复!
: 问过我们的facility,没有MagNA,老板不可能现在去买 :(
: 细胞离心后的沉淀已经冻存在-80,当时没有加lysis buffer或RNAlater,现在只能抽
: 提RNA前立即放在干冰上加RLT buffer。
: 有人有qiagen kit的经验吗?是不是用RNAeasy只抽RNA会比抽DNA和RNA更好?

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H*l
20
这是27寸5k

【在 G*****h 的大作中提到】
: 这比 55 寸的 4k 电视强在哪?
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z*8
21
加了,照着protocol做的,你觉得这是导致降解的原因?

【在 z*********8 的大作中提到】
: 你加bme在RLT里面了没有?
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r*i
22
电视永远不能跟显示器比,更不能跟retina显示器比
看个pdf就知道

【在 H****l 的大作中提到】
: 这是27寸5k
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z*8
23
bme可以抑制RNase的activity,不过既然加了,我觉得是样品开始的时候就没有存储好
的感觉,你在liquid nitrogen里面snap freeze了么?或者你加RNAlater或者trizol了
么?其实,我个人感觉cell里面提RNA还算不是最难的,有些tissue是真心难!
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l*o
24
要我1990年掏两千五买台电脑,那我就买了。 现在这个时候谁花两千五买台电脑?除
非是服务器。
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d*0
25
有几个显卡支持这个?

【在 H****l 的大作中提到】
: imac刚发布了个,有别家单独的显示器卖么?
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H*l
26
15的mbp也要2000吧,加点配置两千五也正常,毕竟屏幕好

【在 l*****o 的大作中提到】
: 要我1990年掏两千五买台电脑,那我就买了。 现在这个时候谁花两千五买台电脑?除
: 非是服务器。

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l*o
27
屏幕是好,但是不值这么高的premium, 再说现在根本没有5K的源。 5K的摄像头都不
知道有没有,图片估计都是合成的。。。

【在 H****l 的大作中提到】
: 15的mbp也要2000吧,加点配置两千五也正常,毕竟屏幕好
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N*3
28

一般单反出的照片1800万像素,还高于这个像素值。所以不至于英雄无用武之地。
另外用5k的显示屏才能点对点的编辑4k的视频,因为要给菜单什么的留点空间。如果用
4k屏幕还是要适度缩小视频才行。
作为图像编辑和视频编辑,还是有用的

【在 l*****o 的大作中提到】
: 屏幕是好,但是不值这么高的premium, 再说现在根本没有5K的源。 5K的摄像头都不
: 知道有没有,图片估计都是合成的。。。

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