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没有暗室和developer,有可能做western blotting吗?
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没有暗室和developer,有可能做western blotting吗?# Biology - 生物学
p*y
1
准备EAD和AP的renew材料放在一个信封里寄,那所有的支持材料,像combo卡复印件什
么,是要准备两份,还是一份就可以了?
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y*o
2
1. Free $100 + Extra $60 Cashback Bonus from Discover More® Card 最适合
中美间使用的多彩卡片Discover信用卡 11/15-12/31双倍holiday bonus
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2.Chase Freedom Visa- $100 Bonus Cash Back
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3. 免费的250刀 Chase SapphireSM Preferred Card需要满足这个offer的条件 优先
考虑哈 里面有指导如何满足条件
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4.Chase 力作 continental onepass信用卡 首笔消费就送30000miles(无金额限制)
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最近申请chase家的这个信用卡会弹出一个页面,写着Before you go…We hope you
will reconsider 难不成他们家最近被人拿太多这个免费机票了 不用对它客气,
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n*d
3
据德国《焦点》网站11日消息,德国警方最近批准一名马戏团驯兽师可以带他的老虎外
出散步,但条件是他必须事先通知
有关部门。10日,当这名驯兽师在德国北部石荷州带着老虎上街散步时引起了骚动,有
民众吓得急忙报警。
30岁的培恩是俄罗斯的一名马戏团驯兽师,他负责照顾三头成年野生老虎和一头七
个月大的幼虎,10日他带着幼虎在
德国北部石荷州一个小镇散步,惹来一名女子报警投诉。由于会引起民众不安,警方表
示,培恩要带老虎散步前必须先通知
他们,即使只是一只幼虎。
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d*l
4
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l*i
5
I used one copy and got my card

【在 p********y 的大作中提到】
: 准备EAD和AP的renew材料放在一个信封里寄,那所有的支持材料,像combo卡复印件什
: 么,是要准备两份,还是一份就可以了?

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s*g
6
封了丫的!
别再用Discover和Chase卡骗人了.想起他们就一肚子血泪史.还好意思到处各个版乱贴!

【在 y****o 的大作中提到】
: 1. Free $100 + Extra $60 Cashback Bonus from Discover More® Card 最适合
: 中美间使用的多彩卡片Discover信用卡 11/15-12/31双倍holiday bonus
: http://blog.sina.com.cn/bankbonus
: 2.Chase Freedom Visa- $100 Bonus Cash Back
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: 3. 免费的250刀 Chase SapphireSM Preferred Card需要满足这个offer的条件 优先
: 考虑哈 里面有指导如何满足条件
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: 4.Chase 力作 continental onepass信用卡 首笔消费就送30000miles(无金额限制)
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t*7
7
这个。。。

【在 n***d 的大作中提到】
: 据德国《焦点》网站11日消息,德国警方最近批准一名马戏团驯兽师可以带他的老虎外
: 出散步,但条件是他必须事先通知
: 有关部门。10日,当这名驯兽师在德国北部石荷州带着老虎上街散步时引起了骚动,有
: 民众吓得急忙报警。
: 30岁的培恩是俄罗斯的一名马戏团驯兽师,他负责照顾三头成年野生老虎和一头七
: 个月大的幼虎,10日他带着幼虎在
: 德国北部石荷州一个小镇散步,惹来一名女子报警投诉。由于会引起民众不安,警方表
: 示,培恩要带老虎散步前必须先通知
: 他们,即使只是一只幼虎。

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D*s
8
只能装一双钛合金狗眼了

【在 d**l 的大作中提到】
:
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f*u
9
one copy
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t*7
10
要是以后谁养只熊猫当宠物咋溜??

【在 n***d 的大作中提到】
: 据德国《焦点》网站11日消息,德国警方最近批准一名马戏团驯兽师可以带他的老虎外
: 出散步,但条件是他必须事先通知
: 有关部门。10日,当这名驯兽师在德国北部石荷州带着老虎上街散步时引起了骚动,有
: 民众吓得急忙报警。
: 30岁的培恩是俄罗斯的一名马戏团驯兽师,他负责照顾三头成年野生老虎和一头七
: 个月大的幼虎,10日他带着幼虎在
: 德国北部石荷州一个小镇散步,惹来一名女子报警投诉。由于会引起民众不安,警方表
: 示,培恩要带老虎散步前必须先通知
: 他们,即使只是一只幼虎。

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r*e
11
不要用film就没有问题,买一套western成像系统,GE的不贵,based on HRP,挺好用,
Biorad的比较贵。
不喜欢那种二抗带荧光的系统。

【在 d**l 的大作中提到】
:
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p*y
12
thanks, guys
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c*e
13
这个签名档倒是不错,哈哈

【在 n***d 的大作中提到】
: 据德国《焦点》网站11日消息,德国警方最近批准一名马戏团驯兽师可以带他的老虎外
: 出散步,但条件是他必须事先通知
: 有关部门。10日,当这名驯兽师在德国北部石荷州带着老虎上街散步时引起了骚动,有
: 民众吓得急忙报警。
: 30岁的培恩是俄罗斯的一名马戏团驯兽师,他负责照顾三头成年野生老虎和一头七
: 个月大的幼虎,10日他带着幼虎在
: 德国北部石荷州一个小镇散步,惹来一名女子报警投诉。由于会引起民众不安,警方表
: 示,培恩要带老虎散步前必须先通知
: 他们,即使只是一只幼虎。

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a*k
14
买Life technologies的kit,用Quant Dot的二抗,DNA胶用的系统就能照相

【在 d**l 的大作中提到】
:
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n*d
15
在地上滚

【在 t*******7 的大作中提到】
: 要是以后谁养只熊猫当宠物咋溜??
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a*n
16
去买显影液和定影液,找个小黑屋自己压片子就行了。

【在 d**l 的大作中提到】
:
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n*d
17
你的签名档很深奥,呵呵

【在 c********e 的大作中提到】
: 这个签名档倒是不错,哈哈
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s*y
18
我憋着气等其他人说另外一种东西。。。不过其实我还是喜欢照片,主要是夹在当天的
实验记录里,查看起来很方便。数据性的看起来还是不够直观。而且不容易和实验记录
相对照。虽然现在有所谓的电子实验记录本,但是非常的不方便,比方说假如实验中间
出现了什么异常,随手就可以在本子上写一句话。但是要电子记录的话还得去开动计算
机,或者至少得抄起个iPad 啥的来输入,这样耽误时间而且又得换手套,烦啊。

【在 a****n 的大作中提到】
: 去买显影液和定影液,找个小黑屋自己压片子就行了。
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t*7
19
滚成黑熊,然后让马戏团的人带出去溜?

【在 n***d 的大作中提到】
: 在地上滚
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d*u
20
you can use AP coupled secondary antibody for directly observation.
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a*a
21
非洲那边黑帮都是养鬣狗(土狼),然后出来溜

【在 n***d 的大作中提到】
: 据德国《焦点》网站11日消息,德国警方最近批准一名马戏团驯兽师可以带他的老虎外
: 出散步,但条件是他必须事先通知
: 有关部门。10日,当这名驯兽师在德国北部石荷州带着老虎上街散步时引起了骚动,有
: 民众吓得急忙报警。
: 30岁的培恩是俄罗斯的一名马戏团驯兽师,他负责照顾三头成年野生老虎和一头七
: 个月大的幼虎,10日他带着幼虎在
: 德国北部石荷州一个小镇散步,惹来一名女子报警投诉。由于会引起民众不安,警方表
: 示,培恩要带老虎散步前必须先通知
: 他们,即使只是一只幼虎。

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g*n
22
这个挺好。敏感度如何?

【在 d******u 的大作中提到】
: you can use AP coupled secondary antibody for directly observation.
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s*0
23
可以化妆下成小猪

【在 n***d 的大作中提到】
: 据德国《焦点》网站11日消息,德国警方最近批准一名马戏团驯兽师可以带他的老虎外
: 出散步,但条件是他必须事先通知
: 有关部门。10日,当这名驯兽师在德国北部石荷州带着老虎上街散步时引起了骚动,有
: 民众吓得急忙报警。
: 30岁的培恩是俄罗斯的一名马戏团驯兽师,他负责照顾三头成年野生老虎和一头七
: 个月大的幼虎,10日他带着幼虎在
: 德国北部石荷州一个小镇散步,惹来一名女子报警投诉。由于会引起民众不安,警方表
: 示,培恩要带老虎散步前必须先通知
: 他们,即使只是一只幼虎。

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s*y
24
我以前用过这个,线形响应性很差。特别是因为一些信号太强的带会自发的进行扩散,
最后弄的作出来的东西经常脏的一塌糊涂

【在 d******u 的大作中提到】
: you can use AP coupled secondary antibody for directly observation.
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B*e
25
图片左边的背景,从近到远,依次是。。。草。。。泥。。。马。。。
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C*e
26
用AP conjugated 2nd 哪有那么烂
是一抗太差吧
HRP的如果信号太强的带还可能很快quench呢
另外lz:
用HRP的也有substrate可以买来显色做colometric的

【在 s******y 的大作中提到】
: 我以前用过这个,线形响应性很差。特别是因为一些信号太强的带会自发的进行扩散,
: 最后弄的作出来的东西经常脏的一塌糊涂

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s*c
27
做wb几乎从没用过暗室和developer,都是用fluorophore conjugated antibody。
如果某种一抗经常用,就去标记那个一抗,alexa dye那么多,想500nm就500nm,想
800nm就800nm,还可以用几种不同的一抗标记不同波长的dye去看同一块membrane,最
后用个imaging的机器去看就行了,sensitivity,contrast,用啥波长都随便调,根本
不用二抗,WB从跑胶到最后看结果小半天绝对搞定。话说,现在licor odyssey难道不
是很多人买吗?
如果一抗经常换,二抗去标记fluorophore也很方便啊~~~

【在 d**l 的大作中提到】
:
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g*n
28
谢谢。你的回帖打消了我的疑虑。准备上彩色WB.

【在 s******c 的大作中提到】
: 做wb几乎从没用过暗室和developer,都是用fluorophore conjugated antibody。
: 如果某种一抗经常用,就去标记那个一抗,alexa dye那么多,想500nm就500nm,想
: 800nm就800nm,还可以用几种不同的一抗标记不同波长的dye去看同一块membrane,最
: 后用个imaging的机器去看就行了,sensitivity,contrast,用啥波长都随便调,根本
: 不用二抗,WB从跑胶到最后看结果小半天绝对搞定。话说,现在licor odyssey难道不
: 是很多人买吗?
: 如果一抗经常换,二抗去标记fluorophore也很方便啊~~~

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h*n
29
LAS-4000 system,
use regular antibody and TLC reagent.
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s*g
30
我觉得机器成象比较敏感(奶奶的,有时背景也高)(用圆珠笔标一下膜的边边,就能毁了
好结果!)
胶片没那么敏感,但质量好得多.
我也还是喜欢照片

【在 s******y 的大作中提到】
: 我憋着气等其他人说另外一种东西。。。不过其实我还是喜欢照片,主要是夹在当天的
: 实验记录里,查看起来很方便。数据性的看起来还是不够直观。而且不容易和实验记录
: 相对照。虽然现在有所谓的电子实验记录本,但是非常的不方便,比方说假如实验中间
: 出现了什么异常,随手就可以在本子上写一句话。但是要电子记录的话还得去开动计算
: 机,或者至少得抄起个iPad 啥的来输入,这样耽误时间而且又得换手套,烦啊。

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s*g
31
一抗经常换,二抗去标记fluorophore
是最好的

【在 s******c 的大作中提到】
: 做wb几乎从没用过暗室和developer,都是用fluorophore conjugated antibody。
: 如果某种一抗经常用,就去标记那个一抗,alexa dye那么多,想500nm就500nm,想
: 800nm就800nm,还可以用几种不同的一抗标记不同波长的dye去看同一块membrane,最
: 后用个imaging的机器去看就行了,sensitivity,contrast,用啥波长都随便调,根本
: 不用二抗,WB从跑胶到最后看结果小半天绝对搞定。话说,现在licor odyssey难道不
: 是很多人买吗?
: 如果一抗经常换,二抗去标记fluorophore也很方便啊~~~

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g*5
32
jiu shi bushuo.

【在 s******y 的大作中提到】
: 我憋着气等其他人说另外一种东西。。。不过其实我还是喜欢照片,主要是夹在当天的
: 实验记录里,查看起来很方便。数据性的看起来还是不够直观。而且不容易和实验记录
: 相对照。虽然现在有所谓的电子实验记录本,但是非常的不方便,比方说假如实验中间
: 出现了什么异常,随手就可以在本子上写一句话。但是要电子记录的话还得去开动计算
: 机,或者至少得抄起个iPad 啥的来输入,这样耽误时间而且又得换手套,烦啊。

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y*6
33
Try C-digit from LI-COR if your budget is limited.
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c*r
34
fluorescence的odyssey总觉得比developer要贵,不知真假,求证。
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q*g
35
要是人手一个IPAD记录试验就好了。

【在 s******y 的大作中提到】
: 我憋着气等其他人说另外一种东西。。。不过其实我还是喜欢照片,主要是夹在当天的
: 实验记录里,查看起来很方便。数据性的看起来还是不够直观。而且不容易和实验记录
: 相对照。虽然现在有所谓的电子实验记录本,但是非常的不方便,比方说假如实验中间
: 出现了什么异常,随手就可以在本子上写一句话。但是要电子记录的话还得去开动计算
: 机,或者至少得抄起个iPad 啥的来输入,这样耽误时间而且又得换手套,烦啊。

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s*i
36
用 LICOR 扫膜啊,二抗非常好用,能重复使用至少三个月

【在 d**l 的大作中提到】
:
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b*H
37
彩色成像,还能定量分析。
只是如此以来什么试剂都要用它的了。

【在 s*****i 的大作中提到】
: 用 LICOR 扫膜啊,二抗非常好用,能重复使用至少三个月
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S*1
38
不好意思没用过这个,想跟着问清楚一些:如果用fluorophore conjugated antibody
,那可以用BIO-RAD 的 Gel doc EZ imager 来检测吗? 还是必须买那个licor
odyssey? 还有在检测之前要做什么处理? 是不是直接洗完二抗就行了?另外
fluorophore conjugated antibody(主要是二抗)在哪买最好?谢谢!

【在 s******c 的大作中提到】
: 做wb几乎从没用过暗室和developer,都是用fluorophore conjugated antibody。
: 如果某种一抗经常用,就去标记那个一抗,alexa dye那么多,想500nm就500nm,想
: 800nm就800nm,还可以用几种不同的一抗标记不同波长的dye去看同一块membrane,最
: 后用个imaging的机器去看就行了,sensitivity,contrast,用啥波长都随便调,根本
: 不用二抗,WB从跑胶到最后看结果小半天绝对搞定。话说,现在licor odyssey难道不
: 是很多人买吗?
: 如果一抗经常换,二抗去标记fluorophore也很方便啊~~~

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M*n
39
买一台成像系统
最多2万5
life tech有一个很小的,看着很不错。
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